Definition der Hauptblutgruppen (A, B, O) und Rh - Zubehör

Eine umfassende Studie, die es ermöglicht, das Blut des Patienten, das zu einer der Gruppen gehört, gemäß dem ABO-System zu bewerten und das Vorhandensein / Fehlen von Rh-Antigen zu bestimmen.

Wofür wird diese Analyse verwendet??

  • Feststellen, ob die Blutgruppe einer Person gemäß dem ABO-System und dem Rhesus-System zu einer der Gruppen gehört.

Wenn die Analyse geplant ist?

  • Bei der Transfusion von Blutbestandteilen an den Empfänger;
  • beim Blutspenden;
  • in Vorbereitung auf die Operation;
  • bei der Planung einer Schwangerschaft oder während dieser;
  • bei Verdacht auf fetale Erythroblastose;
  • zur Vorbereitung der Transplantation von Knochenmark, Niere, Leber und anderen Organen und Geweben;
  • nach Erhalt von Personen im Militärdienst, in den Reihen des Ministeriums für Notfälle und anderer Strafverfolgungsbehörden.

Welches Biomaterial kann für die Forschung verwendet werden??

Wie bereite ich mich auf das Studium vor??

  • Schließen Sie fetthaltige Lebensmittel vor der Analyse 24 Stunden lang von der Ernährung aus.

Studienübersicht

Jede Person hat eine einzigartige Kombination von Antigenen auf der Oberfläche ihrer Zellen, einschließlich roter Blutkörperchen. Bis heute sind mehr als 250 Antigene roter Blutkörperchen bekannt, die etwa 30 Antigensysteme bilden. In klinischer Hinsicht sind die wichtigsten davon das ABO-System und das Rhesus-System.

Das AVO-System ist das primäre Blutkompatibilitätssystem. Es wird durch die Agglutinogene A und B dargestellt, bei denen es sich um Glykoproteine ​​handelt, die sich auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen befinden, sowie durch die Agglutinine Alpha und Beta, die zur Klasse der IgM-Immunglobuline gehören und im Blutplasma zirkulieren. Abhängig von der Kombination dieser Agglutinogene und Agglutinine werden 4 Blutgruppen nach dem ABO-System unterschieden.

Die erste (I) Blutgruppe (die häufigste in der europäischen Bevölkerung, 42% der Bevölkerung) wird auch als O-Gruppe bezeichnet, da sich auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen keine A- oder B-Agglutinogene befinden und die Agglutinine Alpha und Beta im Plasma nachgewiesen werden.

Die zweite (II) Blutgruppe (37%) wird auch als A-Gruppe bezeichnet, Agglutinogen A ist auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen vorhanden, Agglutinin Beta wird im Plasma nachgewiesen.

Die dritte (III) Blutgruppe (13% der Bevölkerung) wird auch als B-Gruppe des Blutes bezeichnet, Agglutinogen B ist auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen vorhanden, Agglutinin alpha wird im Plasma nachgewiesen.

Die vierte (IV) Blutgruppe (die seltenste, nur 8% der Bevölkerung) wird auch als AB-Blutgruppe bezeichnet, Agglutinogene beider Typen A und B sind auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen vorhanden und es gibt keine Agglutinine alpha und beta im Plasma.

Das Rhesus-System besteht auch aus mehreren Antigenen, von denen das Hauptantigen als D-Antigen oder Rh-Faktor bezeichnet wird. Ungefähr 85% der Menschen auf der Oberfläche roter Blutkörperchen können den Rh-Faktor (Rh-positives Blut) nachweisen..

Die Zugehörigkeit von menschlichem Blut zu einer bestimmten Gruppe nach dem ABO-System und dem Rhesus-System ist genetisch bedingt und ändert sich im Laufe des Lebens nicht.

Wofür wird die Studie verwendet??

  • Feststellen, ob die Blutgruppe einer Person gemäß dem ABO-System und dem Rhesus-System zu einer der Gruppen gehört.

Was bedeuten die Ergebnisse??

Die Ergebnisse der Bestimmung der Blutgruppe nach dem ABO-System
Agglutinogene auf der Oberfläche roter BlutkörperchenSerumagglutinineBlutgruppe, römische ZiffernBlutgruppe, lateinische Bezeichnung
Sind abwesendAlpha und BetaichÖ
EINBetaIIEIN
IMAlphaIIIB.
AbSind abwesendIVAb

Rh-Faktor ergibt
Rhesusfaktor auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen
GefundenRh positives Blut, Rh+
Nicht gefundenRhesus-negatives Blut, Rh-

Was kann das Ergebnis beeinflussen?

  • Das Vorhandensein spezifischer Proteine ​​(M-Protein, kalte Antikörper) oder einiger Bakterien im Patientenserum kann die im Test verwendete Agglutinationsreaktion stören.
  • Die Einnahme bestimmter Medikamente (Levodopa, Methyldopa) kann zu falsch positiven Ergebnissen der Analyse des Rh-Faktors führen.

BESTIMMUNG DES BLUTZUBEHÖRES

Eine Blutuntersuchung auf Rhesus-Zugehörigkeit muss im Labor durchgeführt werden. In dringenden Fällen ist die Bestimmung des Rh-Faktors am Bett des Patienten nach der Express-Methode akzeptabel.

Die Bestimmung der Rhesus-Zugehörigkeit von Blut bei Patienten, schwangeren Frauen und anderen Personen erfolgt mit monoklonalen LNG-B-Antikörpern oder

KAPITEL IX. TRANSFUSION VON BLUTKOMPONENTEN

Standard-Spezial-Anti-D-Seren, mit denen eine Rh-positive oder Rh-negative Blutzugehörigkeit bedingt hergestellt werden kann. Die Bestimmung der Rhesus-Zugehörigkeit des Spenders erfolgt mit drei Standard-Anti-Rhesus-Seren, die Antikörper gegen D enthalten-

Agglutinationsreaktion mit normalen roten Blutkörperchen

0 (1)

A (II)

In (III)

AB (IV)

Feige. 3. Blutgruppenbestimmung nach dem ABO-System (nach Standard-Erythrozyten)

tn-s und anti-e. Halten Sie sich bei jeder Bestimmungsmethode an die an die Reagenzien gebundenen Reagenzien..

Methoden zur Bestimmung der Rhesus-Zugehörigkeit von Blut im Labor:

• Agglutinationsmethode mit mopoklonalen Antikörpern;

• Konglutinationsmethode mit Gelagin;

• Verwendung eines Reagenz Antiresus in Reagenzgläsern mit einer 33% igen Polyglycinlösung;

• durch Agglutinationsmethode in Salzmedium unter Verwendung von Seren, Inhalt-

lebende volle Rh-Antikörper;

• Verwendung eines indirekten Antiglobulintests

Derzeit besteht der optimalste Weg darin, die Rhesus-Zugehörigkeit von Blut unter Verwendung monoklonaler Antikörper zu bestimmen. Zu diesem Zweck wird Cyclicol-Anti-D-Cynep verwendet. Ein großer Tropfen (0,1 ml) Zyklon wird auf die Tablette aufgetragen. Dann einen kleinen Tropfen Blut (0,01 ml) hinzufügen und mischen. Das Ergebnis wird nach 3 Minuten ausgewertet. Das Vorhandensein von Agglutination lässt den Schluss zu, dass das Testblut Rhesus-positiv ist. In Abwesenheit von Agglutination

KAPITEL IX. TRANSFUSION VON BLUTKOMPONENTEN

Blut gilt als Rh-negativ. Die Möglichkeit, die Tablettenmethode anzuwenden, und die kurze Dauer der Reaktion ermöglichen die Anwendung dieser Methode am Bett des Patienten

Monoklonale Antikörper können verwendet werden, um D-Antigen in jeder Modifikation der direkten Agglutinationsreaktion in einer Ebene, in Reagenzgläsern, in einer Mikroplatte nachzuweisen.

Zoliklon Anti-D-Cynep ist eine klare gelbe Flüssigkeit. Erhältlich in Flaschen (Ampullen) mit 1, 2, 5 oder 10 ml (10,20, 50 bzw. 100 Dosen). Als Konservierungsmittel wird eine 0,1% ige Lösung von Natriumazid (NaN3) Haltbarkeit bei einer Temperatur von 2-8 ° C-2 Jahren. Eine geöffnete Ampulle kann einen Monat lang geschlossen gelagert werden. Der Titer von Tsikliklon erreicht 1: 1024.

Tsoliklon enthält vollständige monoklonale Angi-D-Antikörper, die zu Immunglobulinen der Klasse M gehören, und enthält keine Antikörper mit einer anderen Spezifität. Daher kann das Reagenz verwendet werden, um D-Antigen in roten Blutkörperchen jeder Blutgruppe nachzuweisen. D-Antigen kann sowohl in mit Konservierungsmitteln stabilisiertem Blut als auch in Blut ohne Konservierungsmittel bestimmt werden. Um eine klarere Agglutinationsreaktion zu erzielen, ist es ratsam, eine hohe Konzentration an roten Blutkörperchen zu verwenden.

Der Nachteil dieser Methode besteht darin, dass IgM-Antikörper einige Erythrozytenproben nicht mit mildem D-Angigen oder partiellem D agglutinieren. Daher muss Blut, das beim Testen mit einem monokloialen Anti-D-Reagenz als D-negativ bestimmt wurde, zusätzlich getestet werden Methode der Konglutination mit Gelatine oder indirektem Aptiglobulintest.

Das Gelatinekonglutinationsverfahren basiert auf einer Reaktion, die zwischen roten Blutkörperchen, die Rh-Antigene enthalten, und Antikörpern gegen den Serum-Rh-Faktor auftritt.

Um die erforderliche Methode auszuführen:

• Standardserum mit Antikörpern gegen bekannte
Art des Rhesusfaktors [aHTii-Rh0D, falls erforderlich anni-rlV (C),

Anti-R (E) und andere], zwei Serien;

• Standard Rh-positive und Rh-negative rote Blutkörperchen;

• physiologische Lösung von Natriumchlorid;

• 10% ige Gelatinelösung.

Die Bestimmung wird mit zwei verschiedenen Serien von Anti-Rzus-Serum durchgeführt, so dass 2 Röhrchenreihen im Stativ installiert sind. Standardseren sollten in einer Gruppe mit Testblut vorliegen..

KAPITEL 1. TRANSFUSION VON BLUTKOMPONENTEN

Als Kontrolle werden Rh-positive und Rh-negative Erythrozyten der 0 (1) -Gruppe oder einer Gruppe mit dem Testblut sowie die Reaktion auf eine mögliche Autoagglutination ohne Zugabe von Standardserum verwendet.

Am Boden jedes Röhrchens werden 1 Tropfen rote Blutkörperchen, 1 Tropfen Gelatinelösung und 1 Tropfen Serumantiresus verabreicht. Die Röhrchen werden geschüttelt und 10 Minuten in ein Wasserbad bei 46-48ºC gestellt. Nach dem Herausziehen der Röhrchen aus dem Wasserbad geben sie 5-10 ml physiologische Kochsalzlösung hinzu (bis sie rosa sind). Die Röhrchen werden 2-3 Mal umgedreht, um den Inhalt zu mischen und das Ergebnis zu bewerten.

Ohne Agglutination im Reagenzglas ist in Gegenwart von „Flocken“ eine gleichmäßig gefärbte homogene Flüssigkeit sichtbar. Zunächst werden Kontrollproben verifiziert, um die Spezifität und Aktivität des Serumantiresus und der Gelatine zu bestätigen, d.h. das Vorhandensein von Agglutination in einem Reagenzglas mit Rh-positiven roten Blutkörperchen und das Fehlen davon mit Rh-negativen. Dann werden die Testproben auf ähnliche Weise bewertet. Wenn die Röhrchen agglutiniert sind, enthalten die roten Blutkörperchen daher die entsprechenden Rh-Antigene

Gegenwärtig wird allgemein angenommen, dass nur das Vorhandensein von Rh-Faktor D das Blut bestimmt, das zur Rh-positiven Gruppe gehört. In Gegenwart einer Agglutination mit Standard-Anti-D-Serum wird das Blut als Rh-positiv erkannt. In Gegenwart einer Agglutination mit Standardseren Anti-C, Anti-E usw. sowie in Abwesenheit einer Agglutination gehört das Blut zur Rh-negativen Gruppe.

Hinzugefügt am: 06.12.2014; Aufrufe: 2659. Copyright-Verletzung

Bestimmung des Rhesus mit Standard

Universelles Reagenz

In ein Reagenzglas wird 1 Tropfen (0,05 ml) des universellen Standard-Anti-Rhesus-Reagens (enthält Anti-D-Antikörper) und 1 Tropfen (0,05 ml) des Testbluts gegeben. Der Inhalt der Röhrchen wird durch Schütteln gemischt und dann langsam entlang der Achse gedreht, wobei fast in eine horizontale Position gekippt wird, so dass sich der Inhalt über die Wände verteilt. Diese Ausbreitung von Blut entlang der Wände der Röhrchen verstärkt die Reaktion. Der Kontakt der roten Blutkörperchen mit dem Reagenz beim Drehen der Röhrchen wird mindestens 5 Minuten lang bei Raumtemperatur (+ 18 ° C - + 22 ° C) durchgeführt. Nach 5 Minuten werden 2-3 ml einer isotonischen 0,9% igen NaCl-Lösung in die Röhrchen gegeben und der Inhalt mit 2-3-facher Inversion der Röhrchen ohne Schütteln gemischt. Reagenzgläser werden im Licht betrachtet. Das Ergebnis wird durch das Vorhandensein oder Fehlen einer Agglutination roter Blutkörperchen interpretiert..

Bei Agglutination in Form großer Klumpen oder Flocken geklebter roter Blutkörperchen vor dem Hintergrund einer geklärten Flüssigkeit gilt das Testblut als Rh-positiv (Rh +). Ohne Agglutination (homogene Färbung verbleibt im Reagenzglas) sollte das Testblut als Rh-negativ (Rh-) eingestuft werden (Abbildung 8)..

Das Ergebnis der Bestimmung der Rhesus-Zugehörigkeit unter Verwendung eines universellen Reagenzes

Gleichzeitig werden Kontrollproben unter Verwendung von Standard-Rh-positiven und Rh-negativen roten Blutkörperchen inszeniert.

Bluttransfusion (Komponenten)

Bei der Bluttransfusion werden die Gruppen- und Rhesus-Kompatibilität sowie die individuelle Kompatibilität berücksichtigt. Trotz der Tatsache, dass Personen mit Blutgruppe II Blut der Gruppen II und I transfundieren können; Personen mit Gruppe III - III und I; und für Personen mit Gruppe IV kann Blut einer der 4 Gruppen transfundiert werden (Personen mit Blutgruppe I sind universelle Spender, wobei Gruppe IV universelle Empfänger sind, Abbildung 9). Derzeit transfundieren sie ausschließlich Einzelgruppenblut, was mit dem Rh-Faktor übereinstimmt.

In Übereinstimmung mit den derzeit geltenden Gebrauchsanweisungen „Transfusion von Spenderblut und seinen Bestandteilen“, die auf Anordnung des Gesundheitsministeriums der Republik Belarus Nr. 118–1103 vom 1. Dezember 2003 genehmigt wurden:

1. Transfusionskomponenten, nicht Vollblut, da es praktisch keine Indikationen für die Transfusion von Vollblut gibt. Vollblut sollte als Quelle für die Herstellung von Blutbestandteilen betrachtet werden und kann nur in sehr wenigen Fällen direkt zur Transfusion verwendet werden.

Blutbestandteile sollten nur in dieser Gruppe des AB0-Systems und in der Rhesuszugehörigkeit des Empfängers transfundiert werden.

In Ausnahmefällen sind in Abwesenheit von Blut oder Blutbestandteilen des AB0-Systems und Notfallindikationen (mit Ausnahme von Kindern) Bluttransfusionen, rote Blutkörperchen, gewaschene rote Blutkörperchen der Gruppe 0 (I) („universeller Spender“), Rh-kompatibel oder Rh zulässig negativ für den Empfänger mit einer beliebigen Blutgruppe in einer Menge von bis zu 500 ml. Plasma-AB (IV) -Blutgruppen dürfen Empfänger mit jeder Blutgruppe transfundieren (in Abwesenheit einer einzelnen Gruppe)..

Die Erythrozytenmasse, gewaschene Erythrozyten der Gruppe A (II) oder B (III), Rhesus-kompatibel, kann nicht nur an die Empfänger transfundiert werden, die der Gruppe entsprechen, sondern in Ausnahmefällen an den Empfänger mit der AB (IV) -Gruppe. Ein Patient mit einer AB (IV) -Blutgruppe kann als „universeller Empfänger“ betrachtet werden. “.

3. In allen Fällen der Transfusion von Erythrozyten-haltigen Blutbestandteilen ist ausnahmslos ein biologischer Test vor der Transfusion von Proben auf individuelle Verträglichkeit und zu Beginn der Transfusion unbedingt erforderlich.

Hinzugefügt am: 17.07.2019; Ansichten: 74;

Bestimmung der Blutgruppe

1901 entdeckte der herausragende Wissenschaftler Karl Landsteiner Blutgruppen und legte den Grundstein für die moderne Transfusiologie. Der Forscher identifizierte drei Gruppen basierend auf verschiedenen Varianten der Agglutinationsreaktion von roten Blutkörperchen und Blutserum. Das Material für die Studie wurde von den Mitarbeitern unseres eigenen Labors entnommen. Die Schüler von Landsteiner Decastello und Stürli entdeckten einige Jahre später die vierte Gruppe, hielten sie jedoch für zweifelhaft und von den Forschungsergebnissen ausgeschlossen. 1906 bestätigte ein Psychiater aus Prag, Jan Jansky, die Existenz der Gruppe AB (IV). Die Veröffentlichung der Studie in der lokalen Publikation blieb nahezu unbemerkt. Nach der Wiederentdeckung der vierten Gruppe durch Moss im Jahr 1910 musste Jan Jansky den Vorrang der Entdeckung beweisen. Der tschechische Wissenschaftler schlug eine digitale Bezeichnung von Blutgruppen vor: I, II, III, IV.

In der Transfusiologie beziehen sich Blutgruppen auf verschiedene Kombinationen von Antigenen roter Blutkörperchen. Antigene sind genetische Merkmale: Sie werden von den Eltern geerbt und bleiben während des gesamten Lebens unverändert. 1980 entwickelte die International Blood Transfusion Community eine numerische Terminologie für Antigene roter Blutkörperchen. 23 Blutgruppensysteme wurden identifiziert, darunter 194 Antigene. Die Nummerierung entspricht in den meisten Fällen der Reihenfolge der Erkennung. Die in jedem der 23 Systeme enthaltenen Antigene sind mit einer sechsstelligen Nummer codiert: Die ersten drei Ziffern sind die Systemnummer, die verbleibenden drei Ziffern geben die Spezifität des Antigens innerhalb des Systems an.

SystemnummerNameBezeichnungGennameChromosomenlokalisation
001AB0AB0AB09q34.1 - q34.2
002MnsMnsGYPA, GYPB, GYPE4q28 - q31
003P.P1P122q11.2 - qter
004RhRhRHD, RHCE1p36.2 - p34
005LutheranerLuLu19q12 - q13
006KellKelKel7q33
007LewisLEFUT319p33
008DuffyFyFy1q22 - q23
009ScherzJkJk18q11 - q12
010DiegoDIAE117q12 - q21
011YtYtSCHMERZEN7q22
012XgXgXgXp22.32
013SciannaSCSC1p36.2 - p22
014DombrockMACHENMACHENUnbekannt
015ColtonCOAQP17p14
016Landsteiner-WienerLwLw19p13.2 - cen
017Chido / RogersCH / RGC4A, C4B6p21.3
018HhH.FUT119q13
019KxXKXKXp21.1
020GerbichGEGypc2q14 - q21
021CromerCROMDAF1q32
022KnopsKnCR11q32
023indischIMCD4411p13

Blutgruppensystem AB0

Gruppenzugehörigkeit nach dem AB0-System

AgglutinogeneAgglutinine
0α und β
EINβ
B.α
AbNein
  • 0 (I): Antigene A und B fehlen, Antikörper α und β werden nachgewiesen (35 - 40% der Weltbevölkerung);
  • A (II): Antigen A und Antikörper β sind vorhanden (35%);
  • B (III): Agglutinogen B und Agglutinin α wurden nachgewiesen (15 - 20%);
  • AB (IV): das Vorhandensein der Agglutinogene A und B, das Fehlen der Agglutinine α und β (5 - 10%).

Wenn Sie sich von West nach Ost von Eurasien bewegen, nimmt die Erkennungsrate von Antigen A ab und Antigen B nimmt zu. Antigen 0 ist in Asien selten, aber unter den indigenen Völkern Südamerikas, Polynesiens und Australiens weit verbreitet. Der Grund ist die Epidemie von Infektionskrankheiten.

Das Ergebnis der Blutgruppe wird in der Anamnese oder auf der Spenderkarte festgehalten. Der Transfusiologe gibt das Datum und die Zeichen an.

In einigen Fällen wird während der Typisierung eine leichte Agglutination der roten Blutkörperchen beobachtet. Die unzureichend exprimierte Reaktion wird durch das Vorhandensein schwacher Varianten der Antigene A und B erklärt. Die größte klinische Bedeutung ist die Untergruppe A.1 und ein2. Schwache Varianten wurden erstmals 1911 von den Wissenschaftlern Dungern und Hirszeld entdeckt. Später im Jahr 1930 schlugen Landsteiner und Levine die Namen der Untergruppe A vor1 und ein2. EIN2 tritt in Gruppe A bis zu 20% und in Gruppe AB bis zu 35% auf. Serum aus Blutproben A.2 kann Anti-A enthalten1-Antikörper: in 2% der Fälle in Gruppe A.2 und 30% in A.2B. Anti-A-Antikörper1 ein Risiko aufgrund der Agglutination der roten Blutkörperchen der Gruppe A darstellen.

Methode zur Bestimmung von Blutgruppen A.2 und ein2B.

RBC A.2 variiert erheblich in Abhängigkeit von den verwendeten Reagenzien. Wir vergleichen die Ergebnisse der Studie mit verschiedenen Methoden zur Bestimmung der Blutgruppen A.2 und ein2B..

  • Anti-a1 (Lektin, Phytohämagglutinin). Diagnosticum agglutiniert eindeutig (durch +++ / ++++) A.1 rote Blutkörperchen unmittelbar nach dem Mischen mit der Probe. Agglutiniert nicht A.2 oder verursacht eine kleine Agglutination in der fünften Minute und später.
  • Standard-Isohämagglutinierungsserum.
  • Zyklone Anti-A und Anti-AB.
  • Zoliklon Anti-A schwach.
Die Anzahl der analysierten ProbenBlutgruppe A (II)Blutgruppe AB (IV)
Die Anzahl der analysierten ProbenGruppe A2 (II) in%Die Anzahl der analysierten ProbenGruppe A2B (IV) in%
Anti-a1 (Lektin, Phytohämagglutinin)159214.735723.5
Zyklone: ​​Anti-A, Anti-AB35992.1 *3577.03 *
Zoliklon Anti-A - schwach35874,5 *35711,2 *
Standard-Isohämagglutinierungsserum159217.434434.2

Hinweis: * - Die Agglutination ist schwach, es gibt kleine Agglutinate auf einem rosa Hintergrund.

Anti-A bietet die genaueste Forschung.1 (Lektin, Phytohämagglutinin). Der Test wird zum Nachweis von Untergruppen von Antigen A bei Kindern unter zwei Jahren empfohlen. Der Grund ist die physiologische Unreife neugeborener Erythrozyten, die zu fehlerhaften Ergebnissen einer Studie mit Standard-Isohämagglutinierungsseren führt.

1930 entdeckten Landsteiner und Levine den Subtyp Aint: eine Zwischenvariante zwischen A.1 und ein2. Dieses Antigen ist charakteristisch für Neger und erreicht 8,5% bei Personen mit Blutgruppe A. Bei Kaukasiern wurde Aint nur bei 1% der Personen mit einer zweiten Blutgruppe beobachtet. In äußerst seltenen Fällen fehlen einer Person alle Antigene des AB0-Systems. Der Bombay-Phänotyp ist auf den hh-Genotyp zurückzuführen. In Abwesenheit von H-Antigen bei Individuen dieser Kategorie werden Anti-A- und Anti-B-Antikörper nachgewiesen.

Die Methode zur Bestimmung von Blutgruppen

Algorithmus zur Bestimmung der hämagglutinierenden Seren von Blutgruppen

Um die Blutgruppe AB0 durch ein direktes Verfahren zu bestimmen, werden zwei Serien von Standard-Isohämagglutinierungsseren verwendet. Bereiten Sie zwei Seren in drei Gruppen mit einem Titer von 1:32 oder höher vor. Verwenden Sie eine separate, etikettierte Pipette, um jedes Serum zu sammeln. Bereiten Sie AB (IV) Serum zur Kontrolle vor.

  1. Sorgen Sie für gute Beleuchtung und Lufttemperatur von 18 - 25 ° C..
  2. Markieren Sie die Tafel: 0 (I) - links, A (II) - in der Mitte, B (III) - rechts. Geben Sie oben in der Mitte den Namen oder die Blutzahl des Spenders an.
  3. Pip 1 bis 2 Tropfen (ungefähr 0,1 ml) Serum in zwei Reihen pro Vertiefung gemäß dem Etikett der Platte.
  4. Platzieren Sie mit einer Pipette oder einem Glasstab einen kleinen Tropfen der untersuchten roten Blutkörperchen neben den Serumtropfen. Das Serumvolumen sollte ungefähr das 10-fache des Volumens der Erythrozyten-haltigen Flüssigkeit betragen.
  5. Mischen Sie die Tropfen in den Vertiefungen mit einem Zauberstab.
  6. Um die Reaktion zu beschleunigen, schaukeln Sie die Tablette vorsichtig.
  7. Nach drei Minuten einen Tropfen NaCl in die Vertiefungen der Platte geben, in denen die Agglutination begann. Warten Sie noch zwei Minuten.
  8. Fünf Minuten später bewerten Sie die Ergebnisse der Reaktion im Passing-Set. Bei nicht exprimierter Agglutination einen weiteren Tropfen NaCl zugeben.
  • Eine negative Reaktion in drei Vertiefungen zeigt das Fehlen von Antigenen auf den roten Blutkörperchen der Testprobe an. Blut gehört zur Gruppe 0 (I).
  • Die Agglutination in Vertiefungen mit Serum 0 (I) und B (III) zeigt das Vorhandensein von Agglutinogen A an und gehört zur Gruppe A (II)..
  • Der Beginn der Reaktion mit Serum 0 (I) und A (II) zeigt das Vorhandensein von Antigen B und Gruppe B (III) an..
  • Die Reaktionsergebnisse in allen Vertiefungen zeigen das Vorhandensein der Agglutinogene A und B an und entsprechen der vierten Gruppe AB (IV).

Stellen Sie im letzteren Fall sicher, dass keine unspezifische Reaktion auftritt: Tragen Sie 2-3 Tropfen auf die entsprechende Serum-AB (IV) -Gruppe auf der Platte auf und geben Sie einen Tropfen der analysierten roten Blutkörperchen hinzu. Rühren Sie die Flüssigkeiten um und bewerten Sie das Ergebnis nach fünf Minuten. Das Fehlen einer Agglutination weist auf die Zugehörigkeit zur AB (IV) -Gruppe hin, das Vorhandensein ist ein Zeichen für eine unspezifische Reaktion. Wiederholen Sie in diesem Fall sowie bei leichter Agglutination die Studie mit anderen Seren.

Technik zur Bestimmung der Blutgruppe durch Zyklone

Monoklonale Antikörper gegen Antigene roter Blutkörperchen ersetzten isohämagglutinierende Seren. Für jede Typisierung ist eine Reihe von Anti-A-, Anti-B- und Anti-AB-Reagenzien ausreichend. Die Einführung monoklonaler Reagenzien ermöglichte eine signifikante Vereinfachung und Standardisierung der AB0-Blutgruppenbestimmungstechnik. Wir geben eine kurze Schritt-für-Schritt-Anleitung zur Recherche auf einem Tablet.

  1. Sorgen Sie für gute Beleuchtung. Bei Raumtemperatur arbeiten.
  2. Untersuchungsgegenstand - Erythrozyten-haltige Medien.
  3. Markieren Sie die Vertiefungen der Platte: Anti-A, Anti-B, Anti-AB oder verwenden Sie eine Tablette mit einem beschrifteten Aufkleber.
  4. Tragen Sie ungefähr 0,1 ml des geeigneten monoklonalen Reagens auf jede der drei signierten Vertiefungen auf..
  5. Fügen Sie ungefähr 0,03 ml der analysierten roten Blutkörperchen neben jedem Tropfen Diagnostum hinzu.
  6. Mischen Sie das Reagenz mit den roten Blutkörperchen in den Vertiefungen mit einzelnen Glasstäben.
  7. Schütteln Sie die Tablette etwa drei Minuten lang.
  8. Überprüfen Sie die Vertiefungen auf Agglutination.

In der Regel wird bereits in den ersten Sekunden nach dem Mischen eine Reaktion festgestellt. In diesem Fall können schwache Varianten der Antigene A und B eine spätere Agglutination ergeben..

Indirekte Blutgruppenbestimmung: Aktionsalgorithmus

Die Blutgruppenbestimmungstechnik basiert auf der Wechselwirkung von roten Blutkörperchen von vortypisierten Individuen der Gruppen 0, A, B oder einer Mischung von roten Blutkörperchen von mehreren Einzelgruppenspendern mit Isohämagglutininen α und β im Testserum.

Verwenden Sie für jedes Typisierungsreagenz Pipetten mit chemischer Reinigung. Spülen Sie die Rührstäbchen und Pipetten in einer 0,9% igen NaCl-Lösung.

  • Bereiten Sie einen Teller oder eine Tablette vor. Sorgen Sie für eine gute Raumbeleuchtung.
  • Sammeln Sie 3 bis 5 ml Blut ohne Stabilisator in einem Reagenzglas. Lassen Sie das Serum 1,5 - 2 Stunden bei Raumtemperatur stehen.
  • Waschen Sie die roten Blutkörperchen des Tests in 0,9% iger Kochsalzlösung. 5% Suspension vorbereiten.
  • Markieren Sie die Abschnitte auf der Tablette: 0 (I), A (II), B (III).
  • In jede der drei Vertiefungen 2 Tropfen (ca. 0,1 ml) des analysierten Plasmas geben.
  • Geben Sie ungefähr 0,03 ml rote Blutkörperchen in die Vertiefungen..
  • Mischen Sie die typisierten roten Blutkörperchen mit Serum in separaten Stäbchen..
  • Schütteln Sie die Tablette vorsichtig 5 Minuten lang.
  • Führen Sie eine visuelle Beurteilung der Ergebnisse der Agglutinationsreaktion im Durchlicht durch.

Gruppenschlussfolgerung

Die Ergebnisse der Analyse von Plasma mit Standard-roten BlutkörperchenGruppenzugehörigkeit
0 (I)A (II)B (III)
-++0 (I)
--+A (II)
-+-B (III)
---AB (IV)

+ - das Vorhandensein von Agglutination, - - eine negative Reaktion.

  • 0 (I): Reaktion in den Vertiefungen A (II), B (III) (Antikörper α und β nachgewiesen).
  • A (II): Agglutination mit B (III) roten Blutkörperchen (β-Agglutinine nachgewiesen).
  • B (III): Agglutination in Vertiefung A (II) (Agglutinine α bestimmt).
  • AB (IV): Fehlende Reaktion führt in allen Vertiefungen (keine Antikörper im Plasma nachgewiesen).

Rhesus-System

Levine und Stetson entdeckten 1939 Rhesus-Antigene. Die Wissenschaftler untersuchten die Ursachen für die Entwicklung hämolytischer Reaktionen bei Frauen, die während der Transfusionen bei Frauen gebären, die in den Erythrozytensystemen AB0, MN und P des Ehemanns identisch sind. Ein Jahr später produzierten Landsteiner und Wiener die Antikörperproduktion, indem sie Kaninchen mit Rhesusaffen mit roten Blutkörperchen immunisierten. Antikörper werden als Anti-RH-Antikörper bezeichnet. Die resultierenden Agglutinine reagierten mit Erythrozyten-Rhesus-Erythrozyten und mit Erythrozyten von 85% der weißen New Yorker auf Agglutination. Das Antigen, das die Bildung von Antikörpern verursacht hat, wird als RH-Faktor (D-Faktor) bezeichnet..

In seltenen Fällen enthalten menschliche rote Blutkörperchen kein einziges Rhesus-Antigen. Phänotyp bezeichnet mit RhNull. Xr-GenÖ in diesem Fall liegt es in homozygoter Form vor und hemmt die Produktion aller Antigene. Rh-PhänotyphalterNull zeigen keine agglutinogene Aktivität, haben aber die Fähigkeit, Antigene durch Vererbung zu übertragen.

Bei den Europäern liegt die Inzidenz von Rh-positivem D-Antigen bei 85%. Etwa 10.000 bis 30.000 D-Moleküle befinden sich normalerweise auf der Membran der roten Blutkörperchen. Es gibt zwei spezielle Arten von D-positiven Individuen: D u (schwach) und D partiell (partiell). Das partielle Immunsystem D u und D kann Anti-D-Antikörper produzieren.

Ein schwaches Antigen wird in 1,5% der Rh-positiven Individuen gefunden und ist durch eine geringe Anzahl (100-500) von D-Molekülen auf der Membran gekennzeichnet. Es ist immunogen für Rh-negative Personen. In diesem Fall kann die Transfusion von D-positiven roten Blutkörperchen an Patienten mit schwachem D eine Sensibilisierung der Blutkörperchen des Spenders verursachen. Rote Blutkörperchen mit Du agglutinieren schwach oder gehen keine direkte Agglutinationsreaktion mit vollständigen Anti-Rh-Antikörpern ein. Die Bestimmung der Rhesuszugehörigkeit erfolgt in einem indirekten Antiglobulintest. Träger D u betrachteten Rh-positive Spender und Rh-negative Empfänger.

Teil D weist einen Mangel an einem oder mehreren Epitopen des Proteinmoleküls auf. Das Immunsystem von Menschen mit D-Partialität kann Antikörper gegen fehlende Epitope produzieren. Unter den Trägern von partiellem Antigen werden sieben Gruppen von Individuen unterschieden. Die Beförderung von D VI ist von größter klinischer Bedeutung (nur das Z-Epitop ist vorhanden): Besitzer dieser Kategorie produzieren Antikörper gegen unverändertes Antigen und gegen Teilantigene D I - D V, D VII. Die Technik zur Bestimmung des Rhesusfaktors D VI besteht in der sequentiellen Verwendung von zwei Diagnostika: monoklonalen IgM-Anti-D-Antikörpern (Coliclon Anti-D-Super- oder Anti-D-IgM) und polyklonalen oder monoklonalen IgG-Antikörpern Anti-D (Standard-Universalreagenz oder Anti-Zyklon) -D). Ein negatives Ergebnis der Reaktion im ersten und ein positives Ergebnis im zweiten Stadium der Studie zeigen den Nachweis von D VI an. Typischerweise entspricht Kategorie D VI dem CcDee-Genotyp. Schwangeren mit D VI, wenn sie einen Fötus mit vollem D tragen, wird Anti-Rhesus-Immunglobulin verschrieben.

Antikörper gegen Rhesusantigene sind immun. Sie entstehen durch Isosensibilisierung. Die Spezifität wird durch die Antigene bestimmt, die die Bildung von Antikörpern provozierten. Vollständige und unvollständige Antikörper werden isoliert.

Komplett sind IgM-Antikörper. Sie zeichnen sich durch ein hohes Molekulargewicht aus und sind im Vergleich zu unvollständigen Antikörpern seltener anzutreffen. Kann rh-positive rote Blutkörperchen agglutinieren. Weniger wichtig für die Transfusion.

Unvollständig gehören überwiegend zur Klasse der IgG. Sie werden auf der Oberfläche von Rh-positiven roten Blutkörperchen ohne Bildung von Agglutinaten fixiert. Die Bindung von Blutzellen erfolgt in Gegenwart von kolloidalen Lösungen und proteolytischen Enzymen oder nach Behandlung mit Antiglobulinserum. Sie haben im Vergleich zu Vollantikörpern ein niedrigeres Molekulargewicht. Kann durch die Plazenta gehen. Während der Sensibilisierung werden zuerst vollständige Antikörper produziert, dann werden in größerem Umfang unvollständige (IgG-Immunglobuline) Antikörper produziert..

Rhesuserkennungstechnik mit Anti-D-Super-Zyklon

Zicolon Anti-D-Super ist ein vollständiger menschlicher Anti-D-IgM-Antikörper. Um zuverlässige Ergebnisse zu erhalten, muss die analysierte Probe eine ausreichende Anzahl roter Blutkörperchen enthalten.

  1. Sorgen Sie für gute Beleuchtung und Raumtemperatur.
  2. Geben Sie einen großen Tropfen (ca. 0,1 ml) Anti-D-IgM auf die Platte.
  3. Geben Sie als nächstes einen kleinen Tropfen (ungefähr 0,03 ml) der untersuchten roten Blutkörperchen.
  4. Mischen Sie zwei Tropfen mit einem sterilen Stab.
  5. Schaukeln Sie die Platte nach 10 bis 15 Sekunden vorsichtig 20 bis 30 Sekunden lang.
  6. Überprüfen Sie die Agglutination drei Minuten nach dem Mischen.

Im Falle einer Reaktion wird Blut als Rh-positiv (Rh +) bewertet, wenn keine Reaktion vorliegt - als Rh-negativ (Rh-). Bei negativer oder schwacher Agglutination muss die Studie mit unvollständigen Anti-D-IgG-Antikörpern wiederholt werden, um schwaches oder partielles D-Antigen nachzuweisen.

Methode zur Bestimmung des Rhesusfaktors D u in einem Reagenzglas

Parallel zur Analyse werden drei Kontrollproben durchgeführt: das Anti-D-Cologlon-Reagenz (Anti-D-IgG) mit Standard-Rh-positiven und Rh-negativen roten Blutkörperchen, die analysierten roten Blutkörperchen mit Gelatinelösung ohne das Anti-D-IgG-Diagnostikum.

  1. In ein Reagenzglas 0,05 - 0,1 ml (ein Tropfen) rote Blutkörperchen aus einem geronnenen Blutgerinnsel geben oder aus einem Konservierungsmittel waschen.
  2. 0,1 ml (zwei Tropfen) bei 45 - 50 ° C 10% Gelatine vorverflüssigt zugeben.
  3. Fügen Sie einen Tropfen Anti-D-Cyclicolon (Anti-D-IgG) hinzu..
  4. Rühren.
  5. Inkubieren Sie das Röhrchen 10 - 15 Minuten in einem Wasserbad oder eine halbe Stunde in einem Inkubator bei 48 ° C..
  6. 5 - 6 ml isotonische Lösung hinzufügen.
  7. Drehen Sie das Rohr 1 bis 2 Mal um.
  8. Bewerten Sie die vorübergehende Agglutination.

Das Fehlen von Reaktionsergebnissen mit Anti-D-IgM und die ausgeprägte Agglutination mit Anti-D-IgG weisen auf den Nachweis schwacher Formen von Antigen D hin. Wenn die Agglutination schwach ist, wiederholen Sie die Studie in einem indirekten Coombs-Test.

Bestimmung von Rhesuszubehör mit einem universellen Standardreagenz

Standardreagenz Anti-Rhesus Rh0D enthält polyklonale unvollständige Anti-D-Antikörper. Parallel zur Analyse der Probe wurde eine Kontrollstudie des Reagens Rh0D mit Standard-Rh-positiven (Einzelgruppe oder Gruppe 0) und Rh-negativen (Einzelgruppe) roten Blutkörperchen.

  1. Geben Sie einen Tropfen Rh Diagnosticum auf den Boden des Röhrchens0D..
  2. Fügen Sie einen Tropfen rote Blutkörperchen hinzu..
  3. Schütteln Sie das Röhrchen mehrmals.
  4. Kippen Sie das Rohr fast horizontal und drehen Sie es langsam für mindestens 3 Minuten. Wenn Sie den Inhalt entlang der Wände verteilen, erhalten Sie ein ausgeprägteres Reaktionsergebnis. Die Agglutination erfolgt normalerweise in den ersten 60 Sekunden. Eine Zeitspanne wird benötigt, um ein schwaches Antigen D u nachzuweisen.
  5. 2–3 ml isotonische NaCl-Lösung hinzufügen und das Röhrchen 2–3 Mal ohne Schütteln umdrehen..
  6. Visuell auf Agglutination prüfen. Deutliche Flocken gegen eine klare Lösung zeigen das Vorhandensein von Antigen D an. Eine gleichmäßig gefärbte Flüssigkeit zeigt das Fehlen von Antigen an..

Das Ergebnis wird erst nach Überprüfung der Kontrollproben als zuverlässig angesehen: Beginn einer Reaktion mit Standard-Rh-positiven und Fehlen einer Reaktion mit Rh-negativen roten Blutkörperchen.

Informationen zur schrittweisen Formulierung des indirekten Coombs-Tests unter Verwendung unvollständiger Anti-D-Antikörper finden Sie im Abschnitt Coombs-Reaktion auf der Website..

Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors

Die Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors erfolgt auf zwei Arten:

  1. primäre Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors (Anti-A-, Anti-B- und Anti-D-Zyklonklone)
  2. Sekundärdiagnose der Blutgruppe und des Rh-Faktors (Standardserum- und Querschnittsmethode, Bestimmung des Phänotyps, d. h. der Antigene C, c, E, e, C w, K, k)

Die Expressdiagnostik (die anfängliche Definition einer Blutgruppe und eines Rh-Faktors) berücksichtigt keine Kell-Antigene, ganz zu schweigen von anderen Verifizierungssystemen. Daher werden Coliclone nur zur anfänglichen Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors sowie im Notfall zur Indikation der Transfusion von Blutbestandteilen verwendet.

Weitere Informationen zur seltensten Blutgruppe der Welt finden Sie hier..

Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors mit Anti-A-, Anti-B- und Anti-D-Tsikllonov nach AB0-System und Rhesus-System

Die Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors mit Anti-A-, Anti-B- und Anti-D-Superzyklonen ist die modernste und relativ einfachste Methode. Zur Bestimmung der Blutgruppe werden Zyklone verwendet, d.h. monoklonale Antikörper.

Was ist erforderlich, um die Blutgruppe und den Rh-Faktor zu bestimmen?

- Tsikolikon Anti-A;

- Tsikolikon Anti-B;

- Tsikoliklon Anti-D;

- eine 0,9% ige Natriumchloridlösung; spezielle Tablette; sterile Sticks.

Algorithmus und Verfahren zur Bestimmung der Blutgruppe

Tragen Sie Anti-A- und Anti-B-Zyklonklone auf eine spezielle Tablette mit einem großen Tropfen (0,1 ml) unter den entsprechenden Beschriftungen auf.

Lassen Sie daneben das Testblut (0,01-0,03 ml) fallen, einen kleinen Tropfen. Rühren Sie sie um und beobachten Sie 3 Minuten lang den Beginn oder das Fehlen einer Agglutinationsreaktion. Bei zweifelhaften Ergebnissen 1 Tropfen 0,9% ige Kochsalzlösung hinzufügen.

Entschlüsselung der Blutgruppenergebnisse

  • Wenn die Agglutinationsreaktion mit einem Anti-A-Zyklon aufgetreten ist, gehört das Testblut zur Gruppe A (II).
  • Wenn die Agglutinationsreaktion mit einem Anti-B-Zyklon auftrat, gehört das Testblut zur Gruppe B (III).
  • Wenn die Agglutinationsreaktion bei Anti-A- und Anti-B-Zyklonen nicht auftrat, gehört das Testblut zur Gruppe 0 (I).
  • Wenn die Agglutinationsreaktion mit Anti-A- und Anti-B-Zyklonen auftrat, gehört das Testblut zur Gruppe AB (IV), wie in der Abbildung gezeigt.
Bestimmung des Rh-Faktors durch den Zyklon Anti-D

Ein großer Tropfen (0,1 ml) Anti-D-Coliclon und ein kleiner Tropfen (0,01 ml) des Bluts des Patienten werden auf einer Tablette gemischt. Der Beginn der Agglutinationsreaktion oder ihre Abwesenheit wird 3 Minuten lang überwacht.

  • Wenn die Agglutinationsreaktion mit dem Anti-D-Tsiklonom auftrat, gehört das Testblut zum Rh-Positiven (Rh +).
  • Wenn die Agglutinationsreaktion mit dem Anti-D-Tsiklonom nicht auftrat, bezieht sich das Testblut auf Rh-negativ (Rh -)

Mit anderen Worten, wenn das Anti-D-Cyclicolon mit Rh-positiven roten Blutkörperchen gemischt wird, tritt eine Agglutinationsreaktion auf, und wenn das Blut Rh-negativ ist, gibt es keine Agglutination (wie in der Figur gezeigt, ist die vierte Blutgruppe Rh-negativ)..

Bestimmung von Blutgruppen mit Standardseren

Bestimmung von Blutgruppen durch isohämagglutinierende Standardseren - Suche und Nachweis der Antigene A und B im Blut mittels der Agglutinationsreaktion. Um das Ziel zu erreichen, verwenden Sie:

  • Standard-Isohämagglutinierungsseren der Blutgruppen O (I) - farblos, A (II) - blau, B (III) - rot, AB (IV) - gelb.
  • Weiße Platten mit Blutgruppen markiert: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Glasstäbe

Methode zur Bestimmung der Blutgruppe mit Standardseren

Methode zur Bestimmung der Blutgruppe mit Standardseren

  1. Unterschreiben Sie die Platte (vollständiger Name des Patienten);
  2. Legen Sie die Bezeichnungen von zwei Serien von Standardseren der Blutgruppen I, II und III in ein Volumen von 0,1 ml und bilden Sie zwei Reihen mit drei Tropfen von links nach rechts: 0 (I), A (II), B (III);
  3. Nimm Blut aus einer Vene. Übertragen Sie sechs Tropfen des Testbluts des Patienten mit einem Glasstab an sechs Stellen neben einem Tropfen Standardserum auf die Platte und mischen Sie.

Die Agglutination beginnt in 30 Sekunden. In den Tropfen, in denen eine Agglutination auftrat, wird 0,9% NaCl ein Tropfen zugegeben und das Ergebnis bewertet.

Bewertung der Ergebnisse Bestimmung von Blutgruppen-Standardseren

Eine positive Agglutinationsreaktion kann sandig oder blütenblattförmig sein. Bei einer negativen Reaktion bleibt der Tropfen gleichmäßig rot gefärbt. Die Ergebnisse der Reaktionen in Tropfen mit Seren derselben Gruppe (zwei Reihen) sollten übereinstimmen. Die Zugehörigkeit des Testbluts zur entsprechenden Gruppe wird durch das Vorhandensein oder Fehlen einer Agglutination in der Reaktion mit den entsprechenden Seren nach 5-minütiger Beobachtung bestimmt. Es ist zu beachten, dass wenn die Seren aller drei Gruppen eine positive Reaktion zeigten, dies anzeigt, dass das Testblut beide Agglutinogene (A und B) enthält und zur Gruppe AB (IV) gehört. In solchen Fällen ist es jedoch erforderlich, eine zusätzliche Kontrollstudie des Testbluts mit Standard-Isohämagglutinierungsserum der Gruppe AB (IV) durchzuführen, das keine Agglutinine enthält, um eine unspezifische Agglutinationsreaktion auszuschließen. Nur das Fehlen einer Agglutination in diesem Tropfen in Gegenwart einer Agglutination in Tropfen, die Standardseren der Gruppen 0 (I), A (II) und B (III) enthalten, ermöglicht es uns, die Reaktion als spezifisch zu betrachten und das Testblut der Gruppe AB (IV) zuzuordnen..

Bestimmung der Blutgruppe

Bestimmung der Querschnittsblutgruppe - Nachweis des Vorhandenseins oder Nichtvorhandenseins der Antigene A und B in der Blutprobe unter Verwendung von Standard-Isohämagglutinierungsseren sowie der Antikörper α und β unter Verwendung von Standard-Erythrozyten. Die Reaktion mit Standardseren wird wie oben beschrieben durchgeführt..

Die Methode zur Kreuzbestimmung der Blutgruppe

Die Reaktion mit normalen roten Blutkörperchen

Um mit normalen roten Blutkörperchen zu reagieren, sind normale rote Blutkörperchen von drei Blutgruppen erforderlich: 0 (I), A (II), B (III).

Die Reaktionstechnik mit Standard roten Blutkörperchen

  1. Das zu untersuchende Blut wird aus einer Vene in ein Reagenzglas entnommen, zentrifugiert oder 30 Minuten stehen gelassen, um Serum zu erhalten.
  2. Drei große Tropfen (0,1 ml) Blutserum aus einem Reagenzglas werden auf eine markierte Platte aufgetragen, und daneben ein kleiner Tropfen (0,01 ml) Standard-Blutkörperchen der Gruppen.
  3. Die entsprechenden Tropfen werden mit Glasstäben gemischt, die Platte wird geschüttelt, 5 Minuten lang beobachtet, 0,9% NaCl werden unter Agglutination zu den Tropfen gegeben und das Ergebnis wird bewertet.

Auswertung der Ergebnisse der Reaktion mit normalen roten Blutkörperchen

Die Ergebnisse, die mit Standard-Isohämagglutinierungsseren und Standard-roten Blutkörperchen erhalten wurden, werden ausgewertet. Die Besonderheit der Ergebnisse der Reaktion mit normalen roten Blutkörperchen - roten Blutkörperchen der Gruppe 0 (I) - wird als Kontrolle angesehen. Das Ergebnis der Querschnittsmethode wird als zuverlässig angesehen, wenn bei der Reaktion mit Standard-Isohämagglutinierungsseren und Standard-Erythrozyten die Antworten über die Gruppe des zu testenden Blutes übereinstimmen. Geschieht dies nicht, sollten beide Reaktionen wiederholt werden..

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Medizinisches Krankheitsverzeichnis

Blutgruppen. Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors.

BLUTGRUPPEN.


Zahlreiche Studien haben gezeigt, dass verschiedene Proteine ​​(Agglutinogene und Agglutinine) im Blut vorhanden sein können, deren Kombination (Vorhandensein oder Nichtvorhandensein) vier Blutgruppen bildet.
Jede Gruppe erhält ein Symbol: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
Es wurde festgestellt, dass nur Einzelgruppenblut transfundiert werden kann. In Ausnahmefällen, in denen kein Einzelgruppenblut vorhanden ist und eine Transfusion von entscheidender Bedeutung ist, ist eine Transfusion von Nichtgruppenblut zulässig. Unter diesen Bedingungen kann Blut der Gruppe 0 (I) für Patienten mit jeder Blutgruppe transfundiert werden, und für Patienten mit Blut der Gruppe AB (IV) kann Spenderblut jeder Gruppe transfundiert werden.

Daher ist es vor Beginn einer Bluttransfusion erforderlich, die Blutgruppe und die transfundierte Blutgruppe des Patienten genau zu bestimmen.

Bestimmung der Blutgruppe.


Zur Bestimmung der Blutgruppe werden Standardseren der Gruppen 0 (I), A (II), B (III) verwendet, die speziell in Laboratorien von Bluttransfusionsstationen hergestellt werden.
Auf eine weiße Platte in einem Abstand von 3-4 cm von links nach rechts die Zahlen I, II, III geben, die das Standardserum anzeigen. Ein Tropfen der Standard-Serum-0 (I) -Gruppe wird in den Sektor der Platte pipettiert, angezeigt durch die Nummer I; dann verursacht eine zweite Pipette einen Tropfen der Serum A (II) -Gruppe unter der Nummer II; Nehmen Sie auch Serum B (III) Gruppe und eine dritte Pipette, tragen Sie unter der Nummer III.

Dann wird der Finger auf das Subjekt hingewiesen und das fließende Blut wird auf einen Tropfen Serum auf einer Platte mit einem Glasstab übertragen und gemischt, bis die Farbe gleichmäßig ist. Mit einem neuen Bazillus auf jedes Blutserum übertragen. Nach 5 Minuten ab dem Zeitpunkt der Färbung (stundenweise!) Wird die Blutgruppe durch die Änderung der Mischung bestimmt. In dem Serum, in dem eine Agglutination auftritt (Verkleben roter Blutkörperchen), erscheinen gut sichtbare rote Körner und Klumpen; In Serum, in dem keine Agglutination auftritt, bleibt ein Blutstropfen homogen und gleichmäßig rosa gefärbt.

Abhängig von der Blutgruppe des Probanden tritt in bestimmten Proben eine Agglutination auf. Wenn das Subjekt eine Blutgruppe von 0 (I) hat, kleben rote Blutkörperchen nicht mit Serum.
Wenn das Subjekt eine Blutgruppe A (II) hat, gibt es keine Agglutination nur mit dem Serum der Gruppe A (II), und wenn das Subjekt eine B (III) -Gruppe hat, gibt es keine Agglutination mit Serum B (III). Eine Agglutination wird bei allen Seren beobachtet, wenn das Testblut der AB (IV) -Gruppe angehört.

Rhesus Faktor.


Manchmal werden sogar bei der Transfusion von Einzelgruppenblut schwere Reaktionen beobachtet. Studien haben gezeigt, dass ungefähr 15% der Menschen kein spezielles Protein im Blut haben, den sogenannten Rh-Faktor.

Wenn diese Personen eine zweite Bluttransfusion erhalten, die diesen Faktor enthält, tritt eine schwerwiegende Komplikation auf, die als Rhesuskonflikt bezeichnet wird, und es entsteht ein Schock. Daher müssen derzeit alle Patienten den Rh-Faktor bestimmen, da nur ein Rh-negatives Blut an einen Empfänger mit einem negativen Rh-Faktor transfundiert werden kann.

Eine beschleunigte Methode zur Bestimmung der Rhesus-Zugehörigkeit. 5 Tropfen Anti-Rhesus-Serum der gleichen Gruppe wie beim Empfänger werden auf eine Petrischale aus Glas aufgetragen. Ein Blutstropfen des Probanden wird zum Serum gegeben und gründlich gemischt. Eine Petrischale wird in ein Wasserbad mit einer Temperatur von 42–45 ° C gestellt. Die Reaktionsergebnisse werden nach 10 Minuten ausgewertet. Wenn eine Blutagglutination aufgetreten ist, hat die untersuchte Person Rh-positives Blut (Rh +); Wenn keine Agglutination vorliegt, ist das Testblut Rh-negativ (Rh-).
Eine Reihe anderer Methoden zur Bestimmung des Rh-Faktors wurde entwickelt, insbesondere unter Verwendung des universellen Anti-Rhesus-Reagens D..

Definition der Blutgruppe und der Rhesuszugehörigkeit zu allen Patienten im Krankenhaus. Die Ergebnisse der Studie sollten im Reisepass des Patienten festgehalten werden..

Wie man den Rh-Faktor von Blut herausfindet?

Der Rh-Faktor ist einer der Parameter des Blutes, der die Anwesenheit oder Abwesenheit des speziellen Rh-Proteins auf den Membranen der roten Blutkörperchen widerspiegelt. Wenn es eines gibt, ist das Blut Rh-positiv und wird als Rh + bezeichnet, in Abwesenheit Rh-negativ - Rh-.

Dieses Protein befindet sich in den roten Blutkörperchen der meisten Menschen auf dem Planeten, aber etwa 15% nicht. Seine Abwesenheit oder Anwesenheit beeinträchtigt in keiner Weise die Gesundheit. Rh wird von den Eltern übertragen und bleibt während des gesamten Lebens unverändert.

Wenn sie auf Rh testen

Die Bestimmung des Rh-Faktors erfolgt während einer Blutuntersuchung pro Gruppe. Diese Informationen sind während der Transfusion, zur Vorbereitung auf die Operation und während der Schwangerschaft erforderlich.

Während der Schwangerschaft kann ein Konflikt zwischen dem Blut der werdenden Mutter und dem Blut des Babys auftreten. In dem Wissen, dass die Frau Rh-negativ ist, können Ärzte im Voraus Maßnahmen ergreifen, um Konflikte zu vermeiden und die Gesundheit des Rh-positiven Fötus zu erhalten.

Sie können Rhesus im Labor einer Klinik oder in einem Krankenhaus Blut spenden. Für die Forschung machen Sie einen Zaun aus einem Finger oder aus einer Vene.

Wie zu bestimmen

Es gibt verschiedene Methoden zur Bestimmung von Rh:

  • Auf Petrischalen durch Konglutination.
  • Mit Hilfe von Zyklonen.
  • Express-Methode in Reagenzgläsern ohne Erhitzen.
  • Gelatine-Methode.

Das Wesentliche der Analyse ist der Nachweis von Antigen D mit Anti-Rhesive-Seren oder monoklonalen Reagenzien (Zyklonen) bei der Agglutinationsreaktion (Verkleben roter Blutkörperchen und Bildung von Flocken) in Reagenzgläsern oder im Flugzeug.

Auf Petrischalen

Zur Bestimmung des Rhesusfaktors benötigen Sie Petrischalen, einzelne Pipetten, isotonische Natriumchloridlösung und Standardseren für alle Blutgruppen. Verhaltensordnung:

  1. Lassen Sie zwei Tropfen des Reagenzes aus zwei Serien für drei Studien nebeneinander fallen (in drei Reihen)..
  2. In jede der Serien einen Tropfen Testblut und rote Blutkörperchen geben (Kontrolle positiv und Kontrolle negativ).
  3. Rühren Sie die Tasse zehn Minuten lang in ein Wasserbad (47 ° C).
  4. Das Ergebnis wird durch das Vorhandensein oder Fehlen von Flocken (anhaftende rote Blutkörperchen) bestimmt. Wenn die roten Blutkörperchen anhaften, ist Rh positiv, wenn keine Adhäsion auftritt, ist Rh negativ.

Bestimmung der Rh-Zugehörigkeit zu Zyklonen

Um den Rh-Faktor herauszufinden, werden monoklonale Reagenzien verwendet - Zyklonklone, die gentechnisch aus der Aszitesflüssigkeit von Mäusen gewonnen werden. Rh wird während der Agglutinationsreaktion bestimmt, die in der Ebene auftritt.

  1. Ein großer Tropfen Reagenz wird mit einer einzelnen Pipette (ca. 0,1 ml) auf die Tablette getropft..
  2. Testblut (ein kleiner Tropfen) oder Erythrozyten in einer Menge von 0,01 ml werden um das Reagenz getropft.
  3. Unter Verwendung eines Glasstabs werden das Reagenz und das Blut richtig gemischt und alle 30 Sekunden wird die Platte drei Minuten lang geschüttelt, wobei die Reaktion visuell beobachtet wird.
  4. Die Agglutinationsreaktion beginnt nach 15 Sekunden, wird nach 1 Minute ausgeprägt, das Ergebnis wird jedoch erst nach drei Minuten berücksichtigt.

Wenn die Agglutinationsreaktion begonnen hat (Verkleben der roten Blutkörperchen und deren Ausfällung), wird das Blut als Rh-positiv markiert, wenn keine Verklumpung der roten Blutkörperchen beobachtet wird, ist der Rh-Faktor negativ. Geklebte rote Blutkörperchen, die Flocken sind, sind mit bloßem Auge sichtbar.

Express-Methode

Als Reagenz wird ein Serum namens "Anti-Rhesus" verwendet, das für alle Blutgruppen universell ist.

  1. Ein Tropfen Blut (Erythrozyten) in einer Menge von 0,05 ml wird in ein Reagenzglas gegeben, dann werden 2 Tropfen des Anti-Rhesus-Reagens zugegeben.
  2. Das Röhrchen wird ohne Schütteln gedreht, so dass der Inhalt gemischt und gleichmäßig auf dem Glas verteilt wird.
  3. Nach etwa drei bis fünf Minuten haften die roten Blutkörperchen zusammen.
  4. Um die Aggregation roter Blutkörperchen auszuschließen, geben Sie eine isotonische NaCl-Lösung in einer Menge von 2-3 ml in das Röhrchen und drehen Sie das Röhrchen mehrmals um, damit sich der Inhalt vermischt.
  5. Danach wird das Ergebnis gelesen. Wenn Flocken auf dem Hintergrund einer leichteren Flüssigkeit erscheinen, ist Rh positiv, wenn keine Flocken vorhanden sind, ist die Flüssigkeit gleichmäßig rosa gefärbt, Rh ist negativ.

Es muss gesagt werden, dass universelle Seren eine falsch positive Reaktion mit Rh-negativen roten Blutkörperchen hervorrufen können. Es kann zu einer unspezifischen Adhäsion von roten Blutkörperchen kommen, auf deren Oberfläche sich andere Antikörper befinden - nicht Atyresus. Daher wird parallel mit einer Steuerlösung des Verstärkers getestet. Wenn nach Verabreichung der Kontrolllösung eine Agglutination auftritt, wird das Ergebnis als unzuverlässig angesehen und der Test mit einem anderen Reagenz wiederholt.

Mit Gelatine

Diese Technik basiert auf der Verwendung von Gelatine (in Form einer 10% igen Lösung). Zum Testen werden sowohl Standard-Anti-Rhesus-Reagenzien als auch Coliclone verwendet..

  1. Ein Tropfen Blut (0,05 ml) oder rote Blutkörperchen in Form einer Suspension im Serum (50%) wird in ein Reagenzglas getropft.
  2. Dann werden 2 Tropfen Gelatinelösung auf einen flüssigen Zustand vorgewärmt.
  3. Die nächsten 2 Tropfen Reagenz dann mischen.
  4. Das Röhrchen wird fünf bis zehn Minuten in ein Wasserbad (47 ° C) oder eine halbe Stunde in einen Trockenthermostat mit derselben Temperatur gestellt.
  5. Dann wird physiologische Kochsalzlösung (5-8 ml) in das Röhrchen gegeben, mit einem Deckel verschlossen und zum Mischen vorsichtig zwei- bis dreimal gedreht.
  6. Um das Vorhandensein von Flocken festzustellen, wird der Inhalt des Röhrchens mit bloßem Auge auf Licht oder durch eine Lupe untersucht.

Bei Verwendung von Gelatine tritt keine unspezifische Agglutination auf. Nach einem solchen Test sind Kontrolltests erforderlich:

  • mit Standard Rh + roten Blutkörperchen;
  • mit Standard-Rh-Erythrozyten;
  • mit Testblut (rote Blutkörperchen) und Gelatine.

Fazit

Bei einer Bluttransfusion werden Informationen zum Rhesusfaktor benötigt. Für die Bluttransfusion kann nur mit der Gruppe und dem Rhesus kompatibles Blut verwendet werden. Zusätzlich sollte der Rhesusfaktor während der Schwangerschaft bestimmt werden. Besser noch, lernen Sie ihn in der Planungsphase kennen. Dies ist notwendig, um einen Rhesuskonflikt zwischen einem Rh-positiven Fötus und einer Rh-negativen Frau zu verhindern..

Literatur Zu Dem Herzrhythmus

Wie ist der Duplex-Scan der Arteria brachiocephalica?

Diese Art von Studie hilft bei der Bestimmung des Zustands von Blutgefäßen, die die Blutversorgung des Gehirns direkt beeinflussen. Obwohl das Duplex-Scannen von brachiozephalen Gefäßen verwendet werden kann, um den Zustand der Halsarterien zu überprüfen.

Hämorrhoiden ohne Blut

Was ist die Gefahr von Hämorrhoiden ohne Blut?Aus dem Griechischen übersetzt klingt das Wort Hämorrhoiden wie „Blutung“, da das Hauptsymptom der Krankheit, insbesondere im ersten Stadium, Blutungen sind.