ELISA: Was ist das? warum wird es gebraucht Vor- und Nachteile der Methode

IFA-Analyse - was ist das? Der vollständige Name dieser diagnostischen Methode wird als enzymgebundener Immunosorbens-Assay bezeichnet und basiert auf der Bestimmung von Antikörpern verschiedener Klassen oder Immunglobulinen im peripheren Blut, die der menschliche Körper produziert.

In der Praxis eines Arztes spielt die ELISA-Analyse eine sehr wichtige Rolle, wenn eine infektiöse Pathologie diagnostiziert werden muss. Diese Analyse zeigt nicht nur das Vorhandensein einer Infektionskrankheit, sondern auch das Stadium des pathologischen Prozesses. Nicht nur in Bezug auf den Erreger ist die ELISA-Methode zur Anwendung indiziert: Sie wird zur Diagnose allergischer Zustände verwendet. Mit diesem Test können Sie Probleme im Immunsystem mit vielen Erkrankungen des hämatopoetischen Systems, Autoimmunerkrankungen und anderen Erkrankungen identifizieren.

Warum brauche ich eine IFA??

Alle Forscher neigen dazu zu glauben, dass der Name "Antikörper" zu schlecht gewählt wird. Dennoch spiegelt es ein wichtiges Merkmal von Immunglobulinen wider: Sie können schädliche Substanzen binden und neutralisieren und nähern sich ihnen wie einem „Schlüssel“ zu einem „Schloss“. Die Menge an Antikörpern im Blut spiegelt nicht nur die allgemeine Fähigkeit des Körpers wider, sich vor Infektionen zu schützen, sondern auch die Fähigkeit, zirkulierende Immunkomplexe zu bilden, die bei verschiedenen Autoimmunerkrankungen auftreten können, beispielsweise bei rheumatoider Arthritis oder ankylosierender Spondylitis.

Antikörperkomplexe mit einem Antigen (einem schädlichen infektiösen Faktor) sind das Ergebnis der Reaktion des Organismus auf die Einführung von „Außenseitern“. Daher lernt das Immunsystem, sie zu erkennen, trainiert mit Hilfe von Lymphozyten immunkompetente Zellen und kann hochspezifische Antikörper produzieren. Daher sind Antikörper gegen das Epstein-Virus anders angeordnet als Antikörper gegen die Virushepatitis C oder gegen E. coli, und Anti-HAV oder Antikörper gegen das Hepatitis-A-Virus unterscheiden sich von Autoantikörpern gegen Knorpel. Es ist die hohe Spezifität und die Übereinstimmung von Immunglobulinen mit einem infektiösen Pathogen, die eine Laborstudie wie einen Enzymimmunoassay sehr wertvoll macht.

Nach einer starken Verbindung von Antikörpern und Antigenen zu einem einzigen Komplex (Antigen-Antikörper) verlieren schädliche Faktoren ihre Fähigkeit, Körpergewebe zu schädigen. Anschließend werden diese Komplexe entweder neutralisiert oder durch Phagozytose durch Neutrophile lysiert und „verdaut“ und verlassen den Körper.

Ein ELISA-Bluttest kann zeigen, welchem ​​spezifischen pathogenen Faktor unser Körper ausgesetzt ist und in welchem ​​Stadium die Interaktion des Körpers mit der Infektion erfolgt. Nach der Studie kann der Arzt mit einem hohen Maß an Sicherheit eine Prognose erstellen, bestimmte Arten der Behandlung verschreiben und in einigen Fällen sogar die Lebenserwartung des Patienten bestimmen, insbesondere bei chronischen Virusinfektionen, beispielsweise mit Virushepatitis C..

In einigen Fällen gibt es jedoch überhaupt keine Infektionserreger im Körper, und Antikörper „greifen“ versehentlich ihre eigenen Organe und Gewebe an, da immunkompetente Zellen falsche Informationen erhalten haben. Solche Krankheiten werden als Autoimmunerkrankungen bezeichnet, und ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay hilft auch, diese chronische Pathologie zu erkennen und die Diagnose zu erleichtern.

Mehr zu Immunglobulinen

Insgesamt produziert der menschliche Körper 5 bekannte Klassen von Antikörpern, die als Ig (was für Immunglobuline steht) bezeichnet werden und zu den Klassen A, M, G, E und D gehören. Alle von ihnen sind für die Interpretation der Ergebnisse des ELISA von großer Bedeutung. Natürlich gibt es viel mehr Komplexe, und nicht alle sind noch offen. Bei der Diagnose verschiedener Krankheiten sind jedoch die ersten drei Arten von Antikörpern am wertvollsten. Ein ELISA-Bluttest verwendet ein Maximum an Informationen: den Zeitpunkt des Auftretens von Antikörpern im Blut, die Änderung ihrer Konzentration in Abhängigkeit von der Zeit, die Dauer des Verschwindens sowie die Art des spezifischen Antikörpers.

Teilnehmer am primären, akuten Infektionsprozess sind Immunglobuline der Klasse M, die immer auf eine akute Phase hinweisen, selbst wenn die Krankheit klinisch beseitigt ist. Ein typisches Beispiel ist die anikterische Form der akuten Virushepatitis B oder C. Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay für Hepatitis zeigt, dass eine Person an akuter Hepatitis leidet und Symptome wie Hypochondrien, Mundtrockenheit, Gelenkschmerzen und andere unspezifische Symptome leicht zu verstehen sind.

Nach einigen Wochen werden diese Antikörper in einer zunehmend verschwindenden Konzentration gefunden, was zu Immunglobulinen der Klasse G führt. Sie werden monatelang oder sogar jahrelang im Blut nachgewiesen und weisen auf eine Erholung hin und können dann lebenslang verbleiben und eine starke Immunität bilden. Dies weist auf eine starke Abwehr gegen Pathogenantigene hin. Es sind also die Antikörper dieser Klasse, die eine Person gegen wiederholte Fälle von Anthrax und Pest immun machen. Es gibt jedoch Zeiten, in denen diese Antikörper die schädlichen Wirkungen von Antigenen nicht beeinträchtigen. In diesem Fall können wir über die Steigerung der Aktivität des chronischen Prozesses sprechen.

IgE hat Anwendungen bei der Diagnose verschiedener parasitärer Infektionen und allergischer Zustände, und IgD erfüllt eine Hilfsfunktion: Mit dem enzymgebundenen Immunosorbens-Assay können Sie es für die umfassende Diagnose von Asthma bronchiale und Autoimmunerkrankungen verwenden. Natürlich ist die Entschlüsselung der ELISA-Analyse viel komplizierter, und Immunologen können viel mehr sagen. Was sind die Anzeichen dafür, dass der Patient unabhängig ins Labor gehen kann, um Studien durchzuführen??

Indikationen zur Analyse

Zunächst müssen Sie verstehen, dass es keine solche Analyse gibt - "nur Blut im ELISA". Es gibt eine Analyse auf Hepatitis, manchmal auf Ureaplasma oder Syphilis. Daher kann eine Blutspende für einen ELISA nur gezielt erfolgen, indem die Suche nach der gewünschten Infektion "angeordnet" wird. Es ist einfach so unverständlich, warum man Blut aus einer Vene spendet, ohne zu wissen, wonach man suchen soll. Aus diesem Grund ist der enzymgebundene Immunosorbens-Assay ein leistungsstarkes Werkzeug, das bei der diagnostischen Suche wichtig ist. Nur ein Arzt kann diese Analyse verschreiben, da er gezielt nach einer Infektion sucht, die durch diese Symptome gekennzeichnet ist. Ein gewöhnlicher Mensch kann natürlich 150 Bluttests mit dem ELISA für "alle Infektionen" bestellen, aber dies ist ein unvernünftiger und kostspieliger Ansatz für die Diagnose, bei dem Tests für alles durchgeführt werden.

Am beliebtesten ist der Zweck dieser Tests für die folgenden Krankheiten und Zustände:

Verschiedene mikrobielle und virale Infektionen, Symptome von Infektionskrankheiten - Hautausschlag, Fieber, Gelbsucht, geschwollene Lymphknoten, Durchfallsyndrom, Verdacht auf sexuell übertragbare Krankheiten.

Die IFA-Technik hilft bei der Bestimmung von Ureaplasma und Mycoplasma, Syphilis und Chlamydien, Tuberkulose- und Cytomegalievirus-Infektionen, Herpes, Virushepatitis und Epstein-Barr-Virus. Gegenwärtig können etwa 500 verschiedene Infektionen unter Verwendung eines enzymgebundenen Immunosorbens-Assays verifiziert werden,

Bei Verdacht auf Helminthenbefall und Vorhandensein von Symptomen wie Allergien, Eosinophilie im Blut, Hautjuckreiz, Dyspepsie und Gewichtsverlust,

Lesen Sie mehr über diese Art von Studie im Artikel „Bluttest auf Würmer und Parasiten: Forschungsmethoden, ELISA, zu wem und wie?.

Bei der Identifizierung von Allergenen, die Quincke-Ödeme, Urtikaria, Atemnot und Asthmaanfälle verursachen.

In diesem Fall werden spezifische IgEs erkannt, und es gibt ganze Allergietafeln, mit deren Hilfe das Allergen genau bestimmt werden kann - Tintenfisch oder Garnelen, trockenes Fischfutter mit Daphnien und Hausstaub. Bei der Pollinose können Sie mit dieser Methode genau das Getreide, den Strauch oder den Baum finden, die im Frühling Niesen und Tränenfluss verursachen,

  • Diese Methode ist bei Verdacht auf Autoimmunerkrankungen angezeigt, die von Rheumatologen behandelt werden,
  • Wenn Tumorwachstum und -aktivität vermutet werden,
  • In der komplexen Diagnose von Immunschwäche und HIV-Infektion,
  • Für Blutkrankheiten und Transplantologie, für eine umfassende Beurteilung der Immunität, beispielsweise vor einer Leber- oder Nierentransplantation.

Jetzt wissen wir, warum wir Blut für den ELISA spenden müssen. Finden Sie heraus, wie diese Studie durchgeführt wird..

Wie wird die Analyse durchgeführt??

Das klassische Material ist das venöse Blut des Patienten. Bei Bedarf können Sie jedoch eine Vielzahl von Flüssigkeiten und Geweben untersuchen: Schleim, Speichel, Gebärmutterhalssekrete, Liquor cerebrospinalis, Glaskörper, den Inhalt der Nabelschnur und Fruchtwasser. Es ist wichtig zu bedenken, dass die Einnahme verschiedener Medikamente, übermäßige körperliche Aktivität und Alkoholmissbrauch die Testergebnisse stark verzerren können..

Es gibt verschiedene Methoden, die diese Analyse ermöglichen. Am häufigsten wird in klinischen Labors die photometrische Methode angewendet. In diesem Fall werden lackmarkierte Substanzen verwendet, nach deren Reaktion und Markierung des Antigen-Antikörper-Komplexes sich ihre Farbe ändert. Infolgedessen ändert sich auch die optische Dichte der Lösung, und diese Änderung ist direkt proportional zur Konzentration der nachgewiesenen Antikörper. Laborspektrophotometer wurden erfolgreich eingesetzt, um diese Abweichungen zu messen..

Zur Durchführung eines ELISA wird auch ein fluorimetrisches Verfahren verwendet, dessen Basis die Fluoreszenz ist. Hier wird auch die Intensität der auf den Testproben abgelagerten fluoreszierenden Substanzen berechnet..

Schließlich verwendet die immunologische Analyse elektrochemische Methoden, um die Aktivität von Enzymen zu bestimmen, die spezielle Markierungen für Antigene und Antikörper sind. Der Enzymimmunoassay selbst beinhaltet am häufigsten die Verwendung von Enzymen wie alkalischer Phosphatase, Meerrettichperoxidase und Galactosidase. Diese Enzyme können aufgrund ihrer Aktivität an Antikörper oder Antigene binden und diese markieren..

Nachteile der Methode und ihrer Vorteile

Zu den offensichtlichen „Pluspunkten“ zählen die demokratischen Kosten der Analyse und die Möglichkeit, sie für breite Bevölkerungsgruppen zu untersuchen, beispielsweise bei der Untersuchung schwangerer Frauen auf HIV. Das Enzymimmunoassay-Verfahren ist sehr spezifisch und kann verwendet werden, um die Qualität der Behandlung vieler Krankheiten zu kontrollieren. Es ist wichtig, dass die Analyse schnell erstellt wird und für den Patienten einfach und sicher ist..

Es gibt jedoch viele "Fallstricke". Wenn also keine Immunglobuline nachgewiesen werden, bedeutet dies nicht, dass die Krankheit zu 100% fehlt. Vor dem Hintergrund einer Immunschwäche hat der Körper möglicherweise einfach keine „Stärke“ bei der Synthese von Antikörpern. Wenn der Patient ein schweres Leberversagen hat, kann die Leber einfach kein Protein synthetisieren - das Baumaterial für Antikörper. In diesem Fall wird das Ergebnis als seronegativ bezeichnet, und die Bestätigung der Infektion ist durch die direkte und fortschrittlichste Forschungsmethode erforderlich - PCR oder Polymerasekettenreaktion. Im Gegensatz zum enzymgebundenen Immunosorbens-Assay erkennt diese Methode nicht die Reaktion des Körpers auf den Infektionsprozess (der möglicherweise defekt ist oder ganz fehlt), erbliches Material wird direkt durch PCR bestimmt oder der Erreger selbst wird gefunden.

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay kann vor dem Hintergrund vieler chronischer Krankheiten und vor dem Hintergrund einer immunsuppressiven Therapie einen Fehler ergeben. In der Helminthologie und Parasitologie gibt es ein Gesetz: Nur der Nachweis eines Parasiten oder seiner Eier ist ein absolut zuverlässiger Weg, um eine Diagnose zu stellen. ELISA kann Kreuz- und falsch positive Methoden liefern, die auf viele normale Ereignisse im Leben des Patienten reagieren.

Zusammenfassend muss gesagt werden, dass der enzymgebundene Immunosorbens-Assay eine leistungsstarke, aber unterstützende Methode zur Labordiagnose vieler Krankheiten ist. In jedem Fall sollte die Diagnose jedoch auf der Grundlage vieler Faktoren gestellt werden: Beschwerden und Anamnese, Untersuchungsdaten, andere unterstützende und instrumentelle Diagnosemethoden.

Enzymimmunoassay mit Aufschlüsselung der Indikatoren

Immun- und enzymatische Reaktionen

Wie der Name schon sagt, umfasst ein IFA-Bluttest mehrere Komponenten, nämlich eine Immun- und eine enzymatische Reaktion.
Eine Immunreaktion ermöglicht es Ihnen, zelluläre Elemente und Krankheitserreger miteinander zu verbinden, während eine enzymatische Reaktion es Ihnen ermöglicht, das Ergebnis einer früheren Reaktion zu visualisieren und zu bewerten.

Betrachten Sie jede Reaktion genauer..

Was sind Immunantworten??

Immun sind spezifische Reaktionen, mit denen Sie ein Antigen an einen Antikörper binden und einen Immunkomplex bilden können. Was bedeutet das? Zunächst muss verstanden werden, dass jede Zelloberfläche Moleküle enthält, die Daten über die Zelle enthalten, Antigene genannt und unterteilt in:

Einzelne Antigene weisen trotz einiger Ähnlichkeiten viele Unterschiede auf. Sie sind in einem bestimmten Organismus vorhanden und werden in anderen niemals wiederholt. Speziesantigene können in den Organismen verschiedener Arten von Lebewesen gefunden werden. So haben zum Beispiel Affen, Pferde oder Hunde ihre eigenen, anders als alles Antigen. Deshalb werden Antigene dieses Typs vom Immunsystem verwendet, um ihre eigenen und fremden Zellen zu erkennen, was in der Tat die Grundlage des Enzymimmunoassays ist.

Wie werden Antigene erkannt? Hier ist alles klar genug. In einfachen Worten, eine Immunzelle fängt eine Zelle, die sie „verdächtigt“ hat, und vergleicht ihr Antigen mit der Beschreibung. Wenn das Antigen der zweifelhaften Zelle ihm entspricht, "setzt" die Immunzelle es frei und fährt fort. Wenn die Beschreibung anders ist, ist die Reaktion des Organismus auf die Bedrohung eine - Zerstörung. Darüber hinaus beträgt die Anerkennung des "Feindes" in diesem Fall fast 100%.

Sandwich-Immunoassay Immunoassay

Feige. 2. Schematische Darstellung des Immunoassay- "Sandwich" -Typs. ATP ist ein Antikörper eines Substrats, ATd ist ein Nachweisantikörper, AH ist ein Antigen, M ist eine Markierung, die kovalent an einen Nachweisantikörper gebunden ist, P ist ein Substrat, auf dem der Antikörper des Substrats adsorbiert ist.

In dieser Variante des Immunoassays (Fig. 2) wird ein Paar von Antikörpern verwendet, die für räumlich entfernte Epitope des untersuchten Antigens spezifisch sind.

I. Sorption von Substratantikörpern

In den Vertiefungen einer Immunoassay-Platte mit 96 Vertiefungen werden Substratantikörper von 1 bis 2 & mgr; g pro Vertiefung in 100 & mgr; l phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) sorbiert. Die Inkubation wird 30 Minuten bei Raumtemperatur durchgeführt und auf einem horizontalen Tablettenschüttler geschüttelt. Das Waschen (2-fach) von ungebundenen Antigenmolekülen wird mit phosphatgepufferter Salzlösung durchgeführt, die 0,1% Tween-20 (PBST) enthält..

II. Sperren

Um unspezifische Bindungsstellen zu blockieren, werden Plattenvertiefungen mit PBST gefüllt und 10-15 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert.

III. Antigen-Inkubation

50 & mgr; l der Testlösung oder Standardverdünnungen des Antigens werden in die Vertiefungen der voradsorbierten Antikörperplatte gegeben. Antigenverdünnungen sollten auf der Basis von PBST hergestellt werden, da Tween-20 die unspezifische Bindung von Proteinmolekülen aneinander und an die Oberfläche der Tablette verringert. Sowohl die Testlösung als auch die Standardverdünnungen des Antigens werden paarweise (oder 3 Wiederholungen) eingeführt, wobei zwei (drei) Vertiefungen für jede Proteinverdünnung verwendet werden. Die Inkubation wird 30 Minuten bei Raumtemperatur unter konstantem Rühren durchgeführt. Das Waschen wird dreimal mit PBST-Lösung durchgeführt.

IV. Enzymmarkierte Antikörperinkubation

100 & mgr; l einer Lösung spezifischer Antikörper, die mit einer Enzymmarkierung konjugiert sind, werden in die Vertiefungen der Platte gegeben. Die optimale Konzentration an konjugierten Antikörpern wird normalerweise vom Hersteller angegeben (normalerweise eine Konzentration von 2-4 μg / ml verwenden). Die Inkubation mit Antikörpern, die die Enzymmarkierung enthalten, wird 30 Minuten bei Raumtemperatur durchgeführt und auf einem horizontalen Plattenschüttler geschüttelt. Das Waschen wird 5-6 mal mit PBST durchgeführt.

V. Durchführung einer enzymatischen Reaktion, begleitet vom Auftreten eines gefärbten Produkts

100 & mgr; l Substratlösung werden in die Vertiefungen gegeben und 10 Minuten bei Raumtemperatur unter konstantem Rühren inkubiert..

VI. Stoppen der enzymatischen Reaktion

Vor der Messung der optischen Dichte wird eine Farbreaktion mit 0,5 M H gestoppt2SO4. Nach der Inkubation werden 50 & mgr; l einer Lösung von 0,5 M Schwefelsäure mit einer Arbeitslösung von RPD in die Vertiefungen gegeben. Danach können Sie sofort mit der Messung der optischen Dichte beginnen.

VII. Absorptionsmessung

Die optische Dichte der Lösung des gefärbten Produkts wird bei λ = 490 nm unter Verwendung eines Tablettenspektrophotometers gemessen.

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Mehr zu Immunglobulinen

Insgesamt produziert der menschliche Körper 5 bekannte Klassen von Antikörpern, die als Ig (was für Immunglobuline steht) bezeichnet werden und zu den Klassen A, M, G, E und D gehören. Alle von ihnen sind für die Interpretation der Ergebnisse des ELISA von großer Bedeutung. Natürlich gibt es viel mehr Komplexe, und nicht alle sind noch offen. Bei der Diagnose verschiedener Krankheiten sind jedoch die ersten drei Arten von Antikörpern am wertvollsten. Ein ELISA-Bluttest verwendet ein Maximum an Informationen: den Zeitpunkt des Auftretens von Antikörpern im Blut, die Änderung ihrer Konzentration in Abhängigkeit von der Zeit, die Dauer des Verschwindens sowie die Art des spezifischen Antikörpers.

Teilnehmer am primären, akuten Infektionsprozess sind Immunglobuline der Klasse M, die immer auf eine akute Phase hinweisen, selbst wenn die Krankheit klinisch beseitigt ist. Ein typisches Beispiel ist die anikterische Form der akuten Virushepatitis B oder C. Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay für Hepatitis zeigt, dass eine Person an akuter Hepatitis leidet und Symptome wie Hypochondrien, Mundtrockenheit, Gelenkschmerzen und andere unspezifische Symptome leicht zu verstehen sind.

Nach einigen Wochen werden diese Antikörper in einer zunehmend verschwindenden Konzentration gefunden, was zu Immunglobulinen der Klasse G führt. Sie werden monatelang oder sogar jahrelang im Blut nachgewiesen und weisen auf eine Erholung hin und können dann lebenslang verbleiben und eine starke Immunität bilden. Dies weist auf eine starke Abwehr gegen Pathogenantigene hin. Es sind also die Antikörper dieser Klasse, die eine Person gegen wiederholte Fälle von Anthrax und Pest immun machen. Es gibt jedoch Zeiten, in denen diese Antikörper die schädlichen Wirkungen von Antigenen nicht beeinträchtigen. In diesem Fall können wir über die Steigerung der Aktivität des chronischen Prozesses sprechen.

IgE hat Anwendungen bei der Diagnose verschiedener parasitärer Infektionen und allergischer Zustände, und IgD erfüllt eine Hilfsfunktion: Mit dem enzymgebundenen Immunosorbens-Assay können Sie es für die umfassende Diagnose von Asthma bronchiale und Autoimmunerkrankungen verwenden. Natürlich ist die Entschlüsselung der ELISA-Analyse viel komplizierter, und Immunologen können viel mehr sagen. Was sind die Anzeichen dafür, dass der Patient unabhängig ins Labor gehen kann, um Studien durchzuführen??

Wie werden ELISA-Analysen durchgeführt?

Unter den Bedingungen ausgestatteter Labors und medizinischer Zentren kann die treponemale Bestimmung durch den Enzymimmunoassay mit verschiedenen Methoden durchgeführt werden, die als direkt und indirekt bezeichnet werden. Die Grundlage dieser Reaktionen ist jedoch eine Möglichkeit, mit der Sie mittels ELISA auf Syphilis analysieren können. Dieser Test wird auf eine bestimmte Weise durchgeführt..

Der Arzt des Laborarztes hat eine spezielle Tablette - eine Platte mit Löchern in Form von runden Hohlräumen in Höhe von bis zu hundert. Konzentrierte Syphilis-Antigene werden auch speziell in den Assay-Kits hergestellt, die in den Vertiefungen der ELISA-Platte platziert werden. Nach der morgendlichen Blutentnahme des Patienten auf nüchternen Magen wird das Serum vom Blut getrennt und in Vertiefungen mit Antigenen gegeben. Antigen-Antikörper-Bindungsreaktion tritt in Vertiefungen auf.

Der ELISA für Syphilis basiert auf der Reaktion der Bindung der Immunverbindungen und Konjugate der ersten Stufe mit einer speziellen Enzymmarkierung, die zum Ablesen der Reaktionsqualität erforderlich ist. In diesem Stadium werden zusätzlich zur enzymatischen Peroxidase chromogene Farbstoffe eingeführt, um das Material abhängig vom Ergebnis der Reaktion zu färben.

Basierend auf den erscheinenden farbigen Löchern in der Tablette wird der Test entschlüsselt. In Sätzen verschiedener ELISA-Methoden sind Tabellen mit Farbschemata beigefügt, die die Menge, den Gehalt an Immunglobulinen und Antikörpern aus dem Patientenserum in 1 Volumeneinheit bestimmen.

Zur Beurteilung des Reaktionsergebnisses wird eine spezielle Ausrüstung verwendet - ein Spektrophotometer zur Photometrie und Bewertung der Dichte des Materials in den Vertiefungen im Vergleich zu Kontrollproben. Basierend auf der Dichte wird ein Ergebnis erhalten, das für jeden Erreger der Syphilis innerhalb der Grenzen von Normen und Pathologie eindeutig festgelegt ist.

allgemeine Informationen

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay kann verwendet werden, um den Gehalt an Hormonen, Immunglobulinen, immunologischen Komplexen sowie einer Reihe von biologisch aktiven Substanzen zu bestimmen. Als Material für eine solche Studie können Sie Blut, Liquor cerebrospinalis, den Inhalt des Glaskörpers usw. spenden..

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay wurde in letzter Zeit aufgrund einer Reihe von Vorteilen zunehmend verwendet:

  • Empfindlichkeit über 90 Prozent;
  • stabile Lagerung der zum Halten benötigten Zutaten;
  • schnelle und einfache Diagnose;
  • Mindestkosten für Materialien;
  • automatisierter Prozess;
  • kostengünstig.

Darüber hinaus können Sie mit einem ELISA Infektionen, einschließlich Hepatitis, frühzeitig erkennen. Aus diesem Grund wird es manchmal anstelle von PCR-Studien sowie während der Schwangerschaft empfohlen. Es kommt jedoch nicht ohne Nachteile aus. Die Ergebnisse solcher Tests sprechen nur über die Reaktion des Körpers auf den Erreger, werden jedoch nicht bestimmt. In den meisten Fällen wird eine Kombination aus ELISA und PCR empfohlen..

Mithilfe von IFA-Tests können Sie die Ergebnisse eines ganzen Satzes ermitteln. Insbesondere werden die Norm der Schilddrüsenhormone, das Vorhandensein von Tumormarkern und eine Reihe von Infektionen bestimmt. Die Norm wird für jeden Indikator separat ausgewählt. Daher sollte der ELISA für Erwachsene normalerweise TG-Werte innerhalb von 70 IE / ml zeigen, T4 im Bereich von 64 bis 146 nmol / l, T3 wird in einer Menge von 1,8 bis 2,8 nmol / l berechnet.

Bei der Planung einer Schwangerschaft können solche Tests durchgeführt werden, um Sexualhormone zu bestimmen. Insbesondere Luteinisieren. Die Werte variieren je nach Tag des Zyklus. Insbesondere kann ein Maximalwert von 150 und ein Minimum von 1 mU / l beobachtet werden.

Wenn zur Bestimmung des Sexualhormons bei Männern ein ELISA verwendet wird, ist ein Wert im Bereich von 0,5 bis 10 mU / l ein normaler Indikator. Wenn chronisches Gonadotropin untersucht wird, variieren die Ergebnisse je nach Geschlecht. Insbesondere für erwachsene Männer und Frauen ohne Schwangerschaft sollte der Indikator innerhalb von 5 mU / ml liegen. Wenn Tests während der Schwangerschaft durchgeführt werden, können die Ergebnisse je nach Trimester bis zu Zehntausenden von Einheiten unterschiedlich sein.

Was ist Chlamydien?

PCR wird wie ELISA in modernen Labors häufig zur Diagnose sexuell übertragbarer Krankheiten eingesetzt. Gleichzeitig schlagen Ärzte häufig vor, beide Tests durchzuführen. Viele Patienten glauben, dass dies ein zusätzlicher Gewinn ist, aber diese Tests haben einen gravierenden Unterschied, obwohl sie auf den ersten Blick identisch erscheinen mögen. Eine Klassifizierung psychologischer Forschungsmethoden kann jedoch in gewissem Umfang angewendet werden.

Die Ergebnisse von PCR und ELISA werden häufig während der Schwangerschaft verwendet, wenn eine Chlamydieninfektion ausgeschlossen werden muss. Oft ist ein so positives Ergebnis für die Infektion eine Antwort auf die Frage von Männern und Frauen: "Warum kann ich nicht schwanger werden?". Zusätzlich zum Risiko einer Unfruchtbarkeit birgt Chlamydien während der Schwangerschaft ein Infektionsrisiko für das Baby.

Das Hauptproblem bei der Diagnose einer solchen Infektion ist der asymptomatische Verlauf. Spezifische Antikörper können jedoch zehn Tage nach der Infektion nachgewiesen werden. Wenn ein PCR-Test während der Schwangerschaft das Vorhandensein oder Fehlen solcher Krankheitserreger nachweist, zeigt Ihnen der ELISA, in welchem ​​Stadium sich der Prozess jetzt befindet

Eine solche Studie ist auch wichtig, um die Therapieergebnisse zu bewerten.

Decodierungsanalyse

Eine Analyse der Hepatitis oder eines anderen Pathogens bei der ELISA-Leistung wirft häufig Fragen auf. Insbesondere, wie die Entschlüsselung durchgeführt wird. Im Moment zeigen die Ergebnisse eines von fünf Immunglobulinen: IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. Sie sind es, die auffallen, da die Rolle der anderen nicht bis zum Ende geklärt wurde. Die wichtigsten für die Studie sind die Klassen A, M und G..

Immunglobulin A ist hauptsächlich für die Schutzfunktionen der Schleimhäute verantwortlich. Das Ergebnis ihres Vorhandenseins ist negativ, wenn die Krankheit zu Beginn in ihrer akuten Form identifiziert wird. Das Auftreten solcher Schutzmarker tritt gewöhnlich zwei Wochen nach dem Ausbruch der Krankheit auf. Manchmal wird sogar später ein positives Ergebnis erzielt.

Die Hauptfunktion dieser Antikörper ist der Nachweis und die Zerstörung von Mikroorganismen. Ihre Zahl wird immer verringert, wenn die Krankheit abklingt. Normalerweise fehlt acht Wochen nach Ausbruch der Krankheit wieder ein positives Ergebnis. Der Nachweis von Immunglobulinen der Klasse A zu einem späteren Zeitpunkt kann auf einen Prozess hinweisen, der in eine chronische Erkrankung übergeht.

Die Hauptmarker, deren Dekodierung zur Bestimmung der akuten Phase der Pathologie beiträgt, sind Immunglobuline der Klasse M. Sie können sie fünf Tage nach der Infektion im Blut nachweisen. Sie sind etwa sechs Wochen im Blut verzögert, danach tritt ihr Verschwinden schnell auf.

Immunglobuline der Klasse G sind für die Bildung eines verbleibenden Immuneffekts verantwortlich. Ungefähr einen Monat nach der Infektion beginnen sie, im Blut nachgewiesen zu werden. In Zukunft wird ihre Definition über viele Monate ausgedehnt. Oft kann man sie dein ganzes Leben lang beobachten. Solche Immunglobuline werden als Schutzreaktion gebildet, die eine erneute Infektion verhindert. Beispielsweise werden solche Immunglobuline im Blut einer Person gebildet, die im Kindesalter Windpocken hatte und dementsprechend bis zum Lebensende Immunität erhielt. Natürlich gibt es auch andere Infektionen, deren Rückkehr möglich ist. In diesem Fall wird durch die Analyse ein erneutes Wachstum dieser Gruppe von Immunglobulinen festgestellt.

Immunglobuline E werden zum Nachweis von Parasiten im Körper verwendet. Das zur Gruppe D gehörende Immunglobulin befindet sich in B-Lymphozyten und ist bei gesunden Menschen in einigen Mengen vorhanden. Mit etwa zehn Jahren erreichen sie ihre Maximalwerte. Die Menge dieses Immunglobulins steigt während der Schwangerschaft an. Darüber hinaus kann das Vorhandensein in einer größeren Menge als üblich ein Zeichen für Asthma bronchiale sein, einen Immundefizienzzustand.

Entschlüsselung

Antikörper, sie sind auch Immunglobuline, werden in fünf Klassen unterteilt, von denen jedoch normalerweise nur drei bestimmt werden: M, G und A, die sich zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Infektion im Körper ansammeln.

Immunglobuline M erscheinen zuerst, sie sind IgM. Sie entstehen 4-5 Tage nach der Infektion und sind anderthalb Monate im Blut, danach verschwinden sie. Wenn der ELISA ihre Anwesenheit zeigt, haben wir es mit einer akuten Periode der Krankheit oder ihrer Verschlimmerung zu tun.

In drei bis vier Wochen tritt IgG, dh Immunglobuline der Klasse G, auf. Sie können mehrere Monate oder sogar Jahre hintereinander vorhanden sein. Wenn der ELISA zweimal im Abstand von zwei Wochen durchgeführt wurde und die Menge an IgG in beiden Proben erhöht war, können wir über eine Infektion oder eine erneute Infektion damit sprechen.

IgA, dh Antikörper der Klasse A, werden nach einer Verschlimmerung der Infektion oder einen Monat nach ihrem Auftreten im Körper nachgewiesen. Die meisten von ihnen zirkulieren in unseren Schleimhäuten und nur ein Fünftel im Blut. Sie verschwinden erst, nachdem alle Infektionserreger zerstört wurden, dh mindestens zwei Wochen nach der Infektion maximal acht.

Wenn die Analyse des ELISA nach der Heilung das Vorhandensein zeigt, ist die Krankheit in das chronische Stadium übergegangen.

Bei der Entschlüsselung müssen Sie auch die Zeichen + und - im Formular beachten. Nur ein Arzt kann ein vollständiges Urteil fällen, aber einige Merkmale des Körpers können anhand der folgenden Daten beurteilt werden:

Nur ein Arzt kann ein vollständiges Urteil fällen, aber einige Merkmale des Körpers können anhand der folgenden Daten beurteilt werden:

  • Ein Mangel an Immunität gegen Infektionen wird durch eine Kombination von Indikatoren wie JgM, JgG, JgA mit einem Minus überall angezeigt;
  • Das Vorhandensein einer Immunität nach einem Impfstoff oder einer Infektion wird durch JgM und JgA mit einem Minuszeichen und JgG mit einem Pluszeichen (JgG (+)) angezeigt;
  • Die folgenden Indikatoren können auf das Vorhandensein einer akuten Infektion hinweisen: JgA (- / +), JgG (- / +) und JgM (+);
  • Im Falle einer Verschlimmerung chronischer Infektionen enthält das Formular die folgende Notation: JgM, JgG und JgA mit Pluspunkten überall;
  • Bei chronischen Infektionen wird das folgende Bild beobachtet: JgG (+/-), JgM (-) und JgA (+/-);
  • JgM (-) zeigt die Wiederherstellung an.

Oft wird auch eine Studie wie ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay von Blutserum durchgeführt. Es wird für das Studium der Schilddrüsenhormone benötigt. Die Indikatoren für Hormone wie Thyroxin, freies Thyroxin, Triiodthyronin, freies Triiodthyronin und Thyreoglobulin sind hier wichtig.

Darüber hinaus ist eine solche Studie zur Diagnose von Infektions- und Autoimmunerkrankungen nützlich..

ELISA-Analyse - Was ist das? Dekodierung eines enzymgebundenen Immunosorbens-Assays auf Parasiten, Syphilis, HIV, Tuberkulose. Norm in der Tabelle, Ergebnisse

Dank der Entwicklung der modernen Medizin muss sich der Arzt bei der Diagnose nicht mehr auf indirekte Manifestationen von Krankheiten konzentrieren oder mehrstufige Laborstudien durchführen. Es reicht aus, eine Analyse durchzuführen, die die angebliche Erstdiagnose bestätigt oder widerlegt..

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay (ELISA) ist diese Methode. Mit dieser Studie können Sie spezifische Antikörper und Antigene nachweisen, die einer Vielzahl von Pathologien inhärent sind, was die Diagnose erheblich beschleunigt.

Was ist IFA?

Die ELISA-Analyse ist ein Labortest (Methode), mit dessen Hilfe das Vorhandensein oder Fehlen bestimmter Antikörper im Körper zur Bekämpfung des Virus und ihrer Anzahl bestimmt werden kann.

Grundlage der Studie ist die natürliche Reaktion eines Antigens (eines für den Körper schädlichen Objekts) - eines Antikörpers (eines Proteins, das schädliche Objekte zerstört), mit dem das Vorhandensein einer Vielzahl von Viren und Bakterien nachgewiesen werden kann.

ELISA ist eine natürliche Immunantwort des Körpers - die Wechselwirkung eines Antikörpers mit dem entsprechenden Antigen. Während des ELISA werden Antigene oder Antikörper abwechselnd mit dem Material in das Röhrchen gegeben, wonach die Konzentration der resultierenden Antigen-Antikörper-Komplexe nachgewiesen wird.

Wenn Zufälle gebildet werden, entstehen Immunkomplexe, dann findet eine enzymatische Reaktion des Farbstoffs mit dem kombinierten Molekül statt. Es ist auf die Farbänderung während der enzymatischen Indikation zurückzuführen, dass die Krankheit nach Untersuchung des Spiegels der nachgewiesenen Verbindung identifiziert wird.

Arten von Immunglobulinen

Humane Immunglobuline unterscheiden sich in mehrere Klassen, die sich in Eigenschaften, Struktur und antigenen Eigenschaften schwerer Ketten (H-Ketten) voneinander unterscheiden. Bei allen Säugetieren, einschließlich Menschen, werden fünf H-Ketten isoliert, die die Zugehörigkeit von Immunglobulinen zur entsprechenden Klasse bestimmen: G, M, A, D, E..

Jede Klasse unterscheidet sich in ihren biologischen Eigenschaften, ihrer Fähigkeit, Antigene zu binden, sowie in der Geschwindigkeit und Stärke ihrer Bindungen an das Molekül..

Die Funktionen jedes Immunglobulins (lg) sind unterschiedlich:

Menge im KörperFunktionenHalbwertszeit (Tage)Wert
G70%Passive Immunität beim Neugeborenen bilden;

notwendig für eine Immunantwort

Verbesserung der Phagozytose,

21-24bieten lang anhaltende humorale Immunität bei Infektionskrankheiten
M.5-10%benötigt, um die Phagozytose zu aktivieren,

in der Lage, 5 Antigenmoleküle zu binden,

fünfBietet eine primäre Immunantwort
UND10-15Neutralisieren Sie Toxine und Viren

benötigt für die Bildung der frühen Immunität

Lokale Immunitätserziehung

4-5Schleimhautschutz
E.0,2%verursachen Allergien und Anaphylaxie aktivieren Gewebe-Basophile2Parasitenschutz
D.0,2%beteiligt an der Produktion von Lymphozyten, die als Membranrezeptor für Antigene notwendig sind;3Ihre Rolle ist wenig verstanden.

Das Auftreten von Immunglobulinen erfolgt in einer Art "Kette" - IgM IgG. So reagiert der Körper auf das Auftreten von Antigen im Körper. Während der Labordiagnose wurde eine Bewertung der Konzentration von drei Haupt-Immunglobulinen - G, M, A - durchgeführt.

Indikationen zur Immunglobulinanalyse

Die ELISA-Analyse wird von Jahr zu Jahr beliebter..

Eine solche Studie beschleunigt die Diagnose, und dies ist sehr wichtig für die Behandlung von Pathologien wie:

  • Virushepatitis;
  • HIV infektion;
  • Cytomegalovirus,
  • Epstein Barr Virus,
  • Herpesvirus,
  • Masern
  • Röteln,
  • Tuberkulose,
  • Salmonellose,
  • Ruhr,
  • durch Zecken übertragene Enzephalitis,
  • Helicobacter-Bakterien,
  • Borreliose,
  • Tetanus,
  • Syphilis,
  • Diphtherie,
  • Leptospirose,
  • Chlamydien,
  • Ureaplasmose,
  • Mykoplasmose,
  • Keuchhusten.

Mit der Analyse können Sie auch die Infektion mit Parasiten bestimmen:

  • Plattwürmer
  • Spulwurm
  • histologische Amöbe,
  • Leberzitaden,
  • Lamblia,
  • Toxoplasma,
  • Trichine,
  • hepatisch,
  • Cestodosen.

ELISA ist eine Art Marker für Autoimmunerkrankungen und maligne Neoplasien.

Vorbereitung auf den Test

Zur Vorbereitung der Studie sollten Sie folgende Regeln einhalten:

  • Einen Tag vor der Blutentnahme dürfen Sie nicht rauchen und Alkohol trinken,
  • Nehmen Sie nicht an Sport oder anderen körperlichen Aktivitäten teil,
  • versuche Stress zu vermeiden,

Bevor Sie eine ELISA-Analyse bestehen, müssen Sie Stress vermeiden.

  • Beenden Sie den Drogenkonsum spätestens 10 Tage vor der Manipulation.
  • Ärzte empfehlen auch eine spezielle Diät - schließen Sie fetthaltige und frittierte Lebensmittel aus. Wenn die Studie auf Hepatitis durchgeführt wird, müssen Sie kein Orangengemüse und insbesondere keine Zitrusfrüchte verwenden. Morgens Blut auf leeren Magen spenden.

    Eine falsch positive Analyse ist auf unerfüllte Empfehlungen zurückzuführen, insbesondere auf die Verwendung von fetthaltigen Lebensmitteln, was zu einer zu hohen Konzentration von Triglyceriden im Plasma führt, wodurch die Leitfähigkeit des ELISA abnimmt.

    Probenahmeverfahren

    Als Testmaterial kann Vollblut, Serum oder venöses Blutplasma verwendet werden. Materialprobenahme, üblicherweise aus der Ulnarvene, hierfür werden eine Einwegnadel und ein Vakuumröhrchen verwendet, 5-10 ml Blut werden benötigt.

    Für die Genauigkeit des Ergebnisses ist es wichtig, die richtige Probenahmetechnik einzuhalten - die Punktion des Gefäßes selbst und des umgebenden Gewebes muss mit einer Manipulation durchgeführt werden. Daher wird eine kurze Nadel mit großem Durchmesser verwendet, damit die gegenüberliegende Wand der Vene nicht verletzt wird und die roten Blutkörperchen nicht beschädigt werden.

    Um die Unversehrtheit der roten Blutkörperchen zu erhalten, muss das Blut durch die Wände des Röhrchens fließen.

    Während der Lagerung des Materials sollte eine mögliche Ionisierung vermieden werden. Außerdem sollte das Material nicht mit den Resten von Desinfektionsmitteln in Kontakt kommen. Daher wird nur ein Einweg-Kunststoffschlauch mit dem Namen, dem Datum und der Uhrzeit der Lieferung des Materials des Patienten verwendet.

    Wenn eine kurze Lagerung des Testmaterials erforderlich ist, wird ein Kühlschrank mit einer Temperatur von 2 bis 4 ° C verwendet. Wenn eine längere Lagerung erforderlich ist, wird das Material bei einer Temperatur von -20 ° C eingefroren.

    Wie erfolgt die Analyse?

    Nach der Vorbereitung des Testmaterials fährt der Laborassistent mit den erforderlichen Manipulationen fort. Hierzu werden eine Reihe spezieller Antigensätze verwendet, die es ermöglichen, die Reaktion des Körpers auf einen Reizstoff zu provozieren. Hierbei handelt es sich um verschiedene Infektionen, Hormone und Allergene.

    Das erwartete Antigen-Antikörper-Reaktionsschema sieht ungefähr so ​​aus:

    • Die primäre Reaktion ist nachweisbares Ig (Ab) und gereinigtes Pathogenantigen (Ag)..
    • Um die resultierenden Immunkomplexe nachzuweisen, folgt eine neue immunologische Reaktion, bei der das spezifische spezifische Ig als Antigen und das Konjugat-Ig (Ab) als Antikörper dafür fungiert.
    • Der letzte Schritt ist eine enzymatische Reaktion zusammen mit einem Katalysatorkonjugatmolekül. Das Substrat ist ein Chromogen (nicht gefärbt), das sich im Verlauf der Reaktion färbt, und die Farbintensität bestimmt den quantitativen Indikator des Immunglobulins in der Probe.

    Derzeit wurden viele verschiedene ELISA-Optionen entwickelt, und es gibt keine eindeutige Klassifizierung. Typischerweise werden Methoden auf der Grundlage der Trennung in heterogene und homogene Methoden betrachtet - alle Phasen der Analyse erfolgen unter Verwendung einer festen Phase oder nur unter Verwendung einer Lösung.

    Moderne klinische Diagnoselabors verwenden normalerweise einen heterogenen (Festphasen-) ELISA. In diesem Fall bedeutet die Festphase die Absorption von Antigenen oder Antikörpern auf der festen Oberfläche von speziellen Vertiefungen, die sich auf einer Polystyrol-Mikroplatte befinden. Die Methode ist in direkten und indirekten ELISA unterteilt.

    Bei einem direkten ELISA fixiert sich das eingeführte Antigen während des Inkubationsprozesses auf der Oberfläche leerer Vertiefungen. Dazu werden die untersuchten Proben des Materials 20 bis 25 Minuten lang in saubere Vertiefungen gegeben. Dies ist erforderlich, um das Antigen an ihrer Oberfläche zu befestigen. Danach werden die notwendigen Antikörper hinzugefügt. Ferner bleibt das Material für eine bestimmte Zeit, um Bindungen zu bilden.

    Antikörper werden immer im Überschuss zugesetzt. Selbst wenn sie vorhanden sind, verbleiben ungebundene Antigene in der Probe, und wenn überhaupt keine Antigene vorhanden sind, gibt es keine Bindungen. Um die "zusätzlichen" Antikörper zu entfernen, wird eine Dekantierung durchgeführt, wonach nur diejenigen Antikörper übrig bleiben, die eine Verbindung mit dem Antigen hergestellt haben.

    Danach folgt eine enzymatische Reaktion - Zugabe einer Lösung des Enzyms zu den Vertiefungen, wonach die erhaltenen Bindungen gefärbt werden.

    Bei der indirekten ELISA-Methode sind die verwendeten Antikörper mit dem Substrat der enzymatischen Reaktion vorverbunden; In diesem Fall erfolgt die Bindung von Antikörpern an das Antigen während des Inkubationsprozesses, wonach eine Mobilisierung von Bindungen auf der Oberfläche der Vertiefungen erfolgt und das nach der Reaktion eingeführte konjugierte und substratchromogene Reagenz die Reaktion färbt.

    Daher besteht der Hauptunterschied zwischen der indirekten Methode und der direkten Methode nicht darin, das Material an die Oberfläche der sauberen Vertiefungen zu kleben, sondern an das auf der Tablette immobilisierte Antigen zu binden.

    Die Reaktion stoppt unter Verwendung spezieller Vorrichtungen, dann wird jede Vertiefung einem photometrischen Prozess unterzogen, gefolgt von einer vergleichenden Beschreibung des Ergebnisses, das mit zuvor durchgeführten Kontrollproben erhalten wurde.

    Wird in der Probe eine Zunahme der optischen Dichte festgestellt, wird auch die Konzentration spezifischer Antikörper im Testergebnis überschätzt..

    Wann wird die Analyse fertig sein?

    Die Studie dauert nicht viel Zeit, von der Blutentnahme bis zur Erzielung des Ergebnisses. Je nach diagnostischen Maßnahmen dauert sie 1 bis 10 Tage.

    Testergebnisse und deren Interpretation

    Ein negatives oder positives Ergebnis für bestimmte Klassen von Immunglobulinen ist auf dem Formular angegeben, das der Patient als Ergebnis der Diagnose erhalten hat, und ein quantitativer Indikator für verschiedene Klassen von Antikörpern ist ebenfalls angegeben.

    Unterschiedliche Interpretationen der Ergebnisse sind möglich:

    1. IgM (+) (IgA, IgG nicht bestimmt) - der Heilungsprozess;
    2. IgM (-); IgG (+), IgA (+) - chronische infektiöse Pathologie;
    3. IgM, IgG, IgA (alle mit - Wert) - fehlende Schutzmechanismen für Infektionen;
    4. IgG (+/-) und IgA (+/-), IgM (+) - ein akuter Prozess;
    5. IgM (-), IgA (-), IgG (+) - postinfektiöse Immunität;
    6. IgM, IgG, IgA (+) - chronische Pathologie im akuten Stadium.

    Wenn beispielsweise IgG und IgM nachgewiesen wurden, kann der Patient eine der folgenden Krankheiten haben:

    • Virushepatitis;
    • Cytomegalovirus;
    • Herpes;
    • Windpocken;
    • Chlamydien
    • Staphylokokken- oder Streptokokkeninfektion.

    Für hormonelle Studien wird häufig ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay verschrieben. Die Normen sind in der Tabelle aufgeführt:

    Hormon NameFußbodenNorm
    1Thyreoglobulinm / wBis zu 70 IE / ml
    2Thyroxinm / w64-146 nmol / l
    3Triiodthyroninm / w1,8-2,8 nmol / l
    4Thyroxin freim / w11-25 pmol / l
    fünfFreies Triiodritoninm / w4,49-9,3 pmol / l
    6Testosteron, DehydrotestosteronF.0,5-10 mU / l

    Die ELISA-Analyse ist eine diagnostische Studie, mit der Sie die Wahrscheinlichkeit der Bildung von Krebspathologien beurteilen können. Die Interpretation der Ergebnisse erfolgt jedoch nur durch den behandelnden Arzt.

    Der Wert der Testergebnisse

    ELISA eignet sich zum Nachweis verschiedener Formen von Genitalinfektionen, einschließlich Syphilis, und wird häufig zum Screening schwangerer Frauen verwendet..

    Dank dieser Studie können Sie herausfinden, wie lange die Infektion und das Stadium der Krankheit zum Zeitpunkt der Studie aufgetreten sind:

    • Immunglobuline M geben die Dauer der Krankheit an;
    • IgA - der Patient wurde vor mehr als 30 Tagen infiziert;
    • IgG wird auf dem "Höhepunkt" von Krankheiten oder zu dem Zeitpunkt gefunden, an dem die Therapie vor kurzem beendet wurde.

    Während der Studie bleiben die Vertiefungen auf der Tablette mit einem negativen Indikator farblos und die positiven sind hellgelb gefärbt. Wenn die Farbe der positiven Vertiefungen nicht mit der Farbe der Kontrolle übereinstimmt, wird das Ergebnis als zweifelhaft angesehen und eine erneute Untersuchung ist erforderlich..

    Der enzymgebundene Immunosorbens-Assay ist der erste Schritt bei der Diagnose von HIV. Es ist unmöglich, die Analyse unmittelbar nach der angeblichen Infektion durchzuführen. Es muss bis zum Ende der Inkubationszeit (von 14 Tagen bis 6 Monaten) gewartet werden..

    Im Verlauf der Analyse werden Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2 bestimmt, eine Suche nach Antikörpern der Klasse G, die üblicherweise zu einem späteren Zeitpunkt auftritt, und Antikörper der Klassen A und M können in den frühen Stadien (während der Inkubationszeit) bestimmt werden..

    Nach Erhalt positiver Proben sollte Folgendes sein:

    • Wenn der erste Test ein positives Ergebnis ergab, wird das Blut erneut von einem anderen Laborassistenten überprüft.
    • Das wiederholte positive Ergebnis beinhaltet die Rücknahme von Material,
    • Bei Wiederholung des Ergebnisses wird dem Patienten ein Immunoblot zugewiesen.

    Die endgültige Schlussfolgerung über das Vorhandensein einer HIV-Infektion wird erst nach dem Ergebnis des Immunoblots gezogen.

    Der ELISA wird auch als diagnostische Studie zur Tuberkulose verwendet. Selbst wenn der Patient sogar Antikörper gegen diese Pathologie aufweist, bestätigt dies nicht immer das Vorhandensein von Tuberkulose. Daher wird der ELISA häufig als Klärungstechnik oder zur Diagnose einer verborgenen extrapulmonalen Form verwendet.

    Die ELISA-Analyse ist eine solche Studie, mit der Sie eine Infektion eines Patienten mit Parasiten und Protozoen nachweisen können. Während der Diagnose können Sie sogar den Zeitpunkt der Infektion bestimmen.

    ChlamydienCytomegalovirusParasiten
    IgM - 7 Tage nach der Infektion nachgewiesen,IgM werden 30-45 Tage nach der Infektion oder während der Reaktivierung der Infektion für 4-6 Monate nachgewiesenDie Studie bestimmte IgME.

    IgG - chronisches Stadium der Invasion

    IgA - Infektion trat vor mehr als 30 Tagen auf
    Die IgG-Invasion befindet sich in der akuten Phase
    IgG - bestätigt die Diagnose und zeigt die Wirksamkeit der Therapie

    Vor- und Nachteile der Analyse

    IFA hat viele Vorteile, was seine Beliebtheit bei Ärzten und Patienten erklärt:

    • hohe Genauigkeit des Ergebnisses,
    • bezahlbarer Preis,
    • schnelles Ergebnis,
    • Identifizierung des Krankheitsstadiums,
    • Dynamik der Krankheitsbekämpfung.

    Neben den Vorteilen gibt es jedoch einen Nachteil: In seltenen Fällen ist die Analyse falsch positiv oder falsch negativ.

    Warum das Ergebnis möglicherweise unzuverlässig ist

    Fehler können aufgrund technischer Verstöße auftreten, die Analyse ist auch bei Menschen mit einigen chronischen Erkrankungen (Rheumafaktor) unzuverlässig, für die die Produktion spezifischer Antikörper charakteristisch ist.

    Das Endergebnis wird auch durch die Verwendung von Patientenmedikamenten und Stoffwechselstörungen beeinflusst. Aus diesen Gründen muss ein positives HIV- und onkologisches Testergebnis erneut getestet werden..

    Forschungskosten

    Der Preis für ELISA variiert je nach Diagnoserichtung (Rubel):

    • Hepatitis 250-900;
    • Viren - 250-1000;
    • HIV - 250-350;
    • Helminthenbefall - 280 - 900;
    • Syphilis -150-250;
    • Pilzinfektionen 400-500.

    Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay ist eine der effektivsten Methoden zur Untersuchung einer Vielzahl von viralen Pathologien, parasitären Infektionen und onkologischen Pathologien. Eine Studie wie der ELISA erleichtert die Diagnose erheblich. Diese Analyse sollte jedoch nicht vom Patienten selbst interpretiert werden, sondern nur von einem Arzt behandelt werden.

    Gepostet von: Bacio

    Artikelgestaltung: Oleg Lozinsky

    ELISA für Syphilis

    ELISA - Enzyme-Linked Immunosorbent Assay - ist eine der fortschrittlichsten Methoden zur Diagnose von Syphilis. Es zeigt Anzeichen für das Vorhandensein des Erregers in verschiedenen Stadien des letzteren. Die Analyse basiert auf der Identifizierung spezifischer Antikörper, die im Blut des Patienten auftreten, wenn ein blasses Treponem (ein bakterieller Erreger) in den Körper eingeführt wird.

    Die ELISA-Methode funktioniert nicht nur bei einer Gruppe sexuell übertragbarer Krankheiten. Es ist gleichermaßen für die Diagnose einer Vielzahl von Krankheiten infektiöser Natur anwendbar. Das Prinzip der Analyse wurde bereits in den 60er Jahren des letzten Jahrhunderts entwickelt. Es wurde jedoch erst nach 20 Jahren aktiv genutzt..

    Jetzt wird ELISA verwendet, um Syphilis, AIDS, Tuberkulose und viele andere Krankheiten zu diagnostizieren. Zum Nachweis von Antikörpern werden speziell entwickelte Enzyme verwendet, die aktiv auf bestimmte Blutproteine ​​reagieren..

    In welchen Fällen wird IFA verschrieben??

    Der Patient selbst kann zur Analyse in die Klinik kommen, wenn er verdächtige Symptome hat (charakteristische Hautausschläge am Körper, Fieber, Muskelschmerzen usw.). In bestimmten Stadien manifestiert sich die Krankheit jedoch nicht so deutlich. Einige Wochen nach der Infektion verschwinden die Symptome, und der Patient kann sich fälschlicherweise als erholt betrachten. Aus diesem Grund gibt es eine Reihe von Fällen, in denen der ELISA unbedingt durchgeführt wird:

    1. Bei der Bewerbung um eine Stelle in Unternehmen, in denen Kontakt zu einer großen Anzahl von Menschen, Lebensmitteln, Kindern und medizinischen Gütern besteht.
    2. Bei der Registrierung einer schwangeren Frau. Die Krankheit wird von der kranken Mutter auf das Baby übertragen, daher ist es wichtig, sie rechtzeitig zu identifizieren.
    3. Mit Blutspende. Vor der Blutspende muss der Spender auf gefährliche Infektionen, einschließlich Syphilis, prüfen.
    4. Während der Vorbereitung auf die Operation. Solche Eingriffe beinhalten den direkten Kontakt mit dem Blut des Patienten. Dies kann für das medizinische Personal und andere Patienten der Klinik unsicher sein..
    5. Wenn Symptome bei einem der Sexualpartner gefunden werden. In diesem Fall muss der zweite Partner ebenfalls Blut spenden.
    6. Während des Militärdienstes sowie im Falle einer Inhaftierung. In beiden Situationen besteht ein längerer Kontakt mit einer großen Anzahl von Personen. Da die Krankheit nicht nur sexuell, sondern auch durch Kontakt und Alltag übertragen wird, ist jede Person aus der Umgebung der infizierten Person gefährdet.

    Wie ist?

    Das Hauptmerkmal des ELISA ist die hohe Genauigkeit der Daten. Es ermöglicht nicht nur den Nachweis von Antikörpern, sondern auch deren quantitatives Verhältnis.

    Dies bedeutet, dass Sie mit einem enzymgebundenen Immunosorbens-Assay die Krankheit mit einer Wahrscheinlichkeit von 99,99% identifizieren und gleichzeitig bestimmen können, in welchem ​​Entwicklungsstadium sich die Krankheit derzeit befindet.

    Bei der Durchführung eines ELISA entnimmt ein Patient Blut aus einer Vene. Dann wird es speziell vorbereitet und auf eine Styroporplatte mit vielen Löchern gelegt. Während der Diagnose werden dem Blutserum spezielle Enzyme zugesetzt, die in Gegenwart von Antikörpern / Krankheitsantigenen starke Verbindungen mit ihnen bilden.

    Das Ergebnis der Bildung solcher Verbindungen ist eine Änderung der Farbe des Blutplasmas in der Vertiefung (von farblos zu hellgelb). Für den Laboranten reicht es aus, das Ergebnis visuell auszuwerten, um zu verstehen, dass das Panel das Blut des Patienten enthält.

    Interpretation der Ergebnisse

    Wenn der ELISA auf Syphilis das Vorhandensein von 3 Klassen von Antikörpern (Immunglobulinen) beurteilt: A, M und G. Diese Substanzen werden im Blut einer infizierten Person in einer genau definierten Reihenfolge gebildet:

    1. Das Vorhandensein von Immunglobulin A zeigt an, dass seit der Infektion mit blassem Treponem mehr als ein Monat vergangen ist.
    2. Antikörper M werden bei längerer Infektion im Körper nachgewiesen. Sie können auch eine Reaktion auf eine Verschlimmerung einer chronischen Krankheit sein..
    3. Der Körper produziert Immunglobulin G am Höhepunkt der Krankheit sowie nach der Behandlung.

    Die Intensität der Blutplasmafärbung in hellem Gelb während des ELISA zeigt direkt die Anzahl der Antikörper an. Wenn die Farbe des Plasmas leicht gelblich ist, werden die Ergebnisse in Frage gestellt und der Vorgang wiederholt. Bei einem negativen Ergebnis ändert sich die Farbe des Plasmas nicht und bleibt transparent.

    Falsch positiver ELISA

    Während des gesamten Lebens muss eine Person häufig einen ELISA gegen Syphilis durchführen (bevor sie sich für eine Stelle bewirbt usw.). Ein positives Ergebnis wird immer stressig. Keine Panik im Voraus! Manchmal kann ELISA ein falsch positives Ergebnis liefern. In diesem Fall ist eine erneute Prüfung sinnvoll.

    Experten raten davon ab, sich nach dem ersten positiven ELISA-Ergebnis Sorgen zu machen, da diese Studie darauf abzielt, nicht das blasse Treponem selbst zu identifizieren, sondern Antikörper, die der Körper als Reaktion auf einen Angriff pathogener Bakterien produziert. ELISA - Analyse mit hoher Genauigkeit (die Fehlerwahrscheinlichkeit beträgt weniger als 1%). Im Zweifelsfall diagnostizieren die Ärzte nicht sofort, sondern schlagen vor, dass der Patient erneut Blut spendet.

    Eine falsch positive ELISA-Reaktion ist bei Krankheiten möglich:

    • Bindegewebe, Gelenke (Vaskulitis, rheumatoide Arthritis usw.);
    • Herz (hauptsächlich bei entzündlichen Erkrankungen: Myokarditis, Endokarditis);
    • endokrines System (Diabetes);
    • ansteckend (Hepatitis, Tuberkulose usw.).

    Ein falsch positives Ergebnis kann während der Schwangerschaft sein oder wenn die Patientin kurz vor dem ELISA geimpft wurde. Der Konsum von Alkohol und Drogen kann auch die Ergebnisse der Analyse zum Besseren verändern..

    In einer ausreichend großen Anzahl von Fällen wird eine positive Reaktion durch eine Blutuntersuchung von Patienten ausgelöst, die sich bereits einer Behandlung unterzogen haben. Bei 10% der geheilten Patienten bleibt eine positive Reaktion lebenslang bestehen, da eine bestimmte Menge an Antikörpern als Immunantwort auf eine einmal aufgetretene Krankheit ständig im Blut zirkuliert..

    Falsch negatives Ergebnis

    Neben falsch positiven ist auch eine falsch negative Reaktion möglich. Zu Beginn der Krankheit, wenn das Treponem nur in den Körper gelangt, werden Antikörper in unzureichenden Mengen zum Nachweis produziert. Enzyme können sie möglicherweise nicht fixieren, daher sind die Ergebnisse des ELISA negativ.

    Wenn der Verdacht auf Syphilis besteht (der Patient hatte ungeschützten Geschlechtsverkehr, auf die eine oder andere Weise mit möglichen Patienten in Kontakt gebracht usw.), wird eine wiederholte Analyse durchgeführt..

    Kontaktprüfung

    Es gibt ein bestimmtes Aktionsprotokoll für den Fall, dass ein Patient mit 100% iger Sicherheit diagnostiziert wurde. Zunächst wird die Untersuchung von seinem Sexualpartner durchgeführt: Ehemann, Ehefrau, andere Personen, die eine enge Beziehung zu der infizierten Person eingegangen sind. In dieser Hinsicht sind Ärzte kategorisch. Die Untersuchung von Sexualpartnern ist obligatorisch, um die Ausbreitung einer gefährlichen Krankheit zu verhindern.

    Alle Familienmitglieder des Patienten werden behandelt, auch wenn ihre Tests ein negatives Ergebnis zeigten. Denken Sie daran: Syphilis ist eine akut ansteckende Krankheit, die auf dem Weg des Kontakthaushalts übertragen wird. Kinder und andere Familienmitglieder können Treponema bekommen, während sie das Badezimmer benutzen, gemeinsame Handtücher, Geschirr.

    Maßnahmen nach Bestätigung der Diagnose

    Sobald die ELISA-Daten für Syphilis bestätigt wurden, werden die infizierte Person und diejenigen, die mit ihm in Kontakt kamen, einer Antibiotikatherapie unterzogen. Alle Empfehlungen des Arztes - Dosierung, Häufigkeit der Medikation - müssen genau eingehalten werden!

    Für die Dauer der Behandlung erhalten arbeitende Bürger eine Bescheinigung mit der Diagnose gemäß ICD-10. Nach einer vollständigen Heilung wird das medizinische Buch erweitert. Ein wiederhergestellter Mitarbeiter kann seine unmittelbaren Aufgaben beginnen. Der Arbeitgeber ist nicht berechtigt, die Wiedereinstellung am Arbeitsplatz zu verweigern..

    Dies sind die Basisdaten zur Durchführung des ELISA. Die Infizierten müssen sich daran erinnern: Die Diagnose beendet nicht das spätere Leben des Patienten. Jetzt gibt es wirksame Medikamente, die diese Krankheit zuverlässig heilen können. Eine rechtzeitige Untersuchung und Behandlung kann die gefährlichsten Folgen der Krankheit vermeiden und andere Mitglieder der Gemeinschaft davor schützen.

    Literatur Zu Dem Herzrhythmus

    Wie wirkt sich die Verträglichkeit von Blutgruppen von Eltern auf die Empfängnis eines Kindes und den Verlauf der Schwangerschaft aus??

    Die Beurteilung der Verträglichkeit von Blutpartnern ist das wichtigste Kriterium, das das Risiko einer pathologischen Entwicklung des Fetus bestimmt.

    Glycerin (rektale Zäpfchen, 1,24 g)

    Bedienungsanleitung Russisch қазақшаHandelsnameInternationaler nicht geschützter NameDarreichungsformRektale Zäpfchen 1,24 g oder 2,11 gKomposition1 Zäpfchen enthält