Enzymimmunoassay mit Aufschlüsselung der Indikatoren

Mit dem Fortschritt der modernen Medizin ist es möglich, bei Verdacht auf bestimmte Pathologien des Patienten eine eingehendere Diagnose durchzuführen. Eine der informativen Methoden der Laborforschung war der ELISA, der nach der Methode der venösen Blutentnahme durchgeführt wird. Das heißt, für den Patienten ändert sich insgesamt nichts. Der ELISA-Analysator führt jedoch eine ausgeklügelte Technik zur Untersuchung des gesammelten Biomaterials durch. In den IFA-Analysen und den Feinheiten der Verwendung der ELISA-Methode als Diagnose verstehen wir das folgende Material.

Was ist ein Enzymimmunoassay??

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay ist eine der Methoden der Labordiagnose, die ausschließlich auf einer Reaktion basiert, die als "Antigen-Antikörper" bezeichnet wird. Es ist sinnvoll zu verstehen, dass ein Antigen eine fremde Proteinverbindung (Molekül) ist, die mit einer parasitären, viralen oder anderen Infektion in den menschlichen Körper gelangt ist. Das heißt, einfach ein Schädling. Ein Antikörper ist wiederum eine Immunzelle (Immunglobulin), die den menschlichen Körper verteidigt, wenn darin Fremdmoleküle nachgewiesen werden.

Antikörper selbst werden durch die Antigene selbst provoziert, die in den menschlichen Körper eingedrungen sind. Wenn Antikörper in den „Kampf“ um die Gesundheit des Körpers eintreten, scheinen sie sich selbst als Antigene zu kennzeichnen, was ein Labortechniker bei Blutuntersuchungen sieht. Das heißt, in dem gesammelten Biomaterial ist es möglich, nicht nur das Vorhandensein einer Infektion zu verfolgen, sondern auch deren Spuren, nachdem sich der Körper vollständig erholt hat.

Bei der Durchführung eines ELISA kann der Laborassistent die folgenden Immunglobuline für Antigene sehen:

  • Immunglobuline M (erscheinen in den Ergebnissen als IgM). Sie bezeugen, dass der Infektionsprozess im Körper nur an Stärke gewinnt. Das heißt, eine Infektion ist kürzlich aufgetreten;
  • Immunglobuline G (erscheinen als IgG). Sie tragen wenige Tage nach Einführung der Infektion in den menschlichen Körper zur Zerstörung von Antigenen bei. Immunglobuline G können sich lange genug im Körper des Patienten befinden und Immunität gegen ein bestimmtes Virus bilden.
  • Immunglobuline E (erscheinen als IgE). Zeigen Sie parasitäre Infektionen im Körper an. Er spricht auch von atopischen Reaktionen bei Allergien. Es ist wichtig zu wissen, dass die Analyse des ELISA ein Ergebnis mit einer Genauigkeit von 90% für parasitäre Infektionen ergibt.
  • Immunglobuline A (erscheinen als IgA). Schützen Sie die Schleimhäute des Patienten.

Durch Verschreiben eines enzymgebundenen Immunosorbens-Assays für einen Patienten kann der behandelnde Arzt die Dauer der Infektion, den Grad seines Fortschreitens oder das Vorhandensein einer Immunität gegen eine bestimmte Infektion nachverfolgen.

Der ELISA-Diagnoseprozess sieht folgendermaßen aus:

  • Das gesammelte venöse Blut wird im Labor in den Zustand des Blutserums gebracht;
  • Anschließend verwendet der Laborassistent eine spezielle Schale mit Zellen, von denen jede bereits alle erforderlichen Antigene enthält. Es reicht aus, einfach Blutserum in jede Zelle zu tropfen und die Reaktion von Immunglobulinen (Antikörpern) auf Antigene zu verfolgen. Das Vorhandensein der "gewünschten" Reaktion wird durch eine Änderung der Farbe des Testmaterials belegt. Anschließend untersucht der Laborassistent die optische Dichte des Testmediums.

Im Allgemeinen hilft ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay für Parasiten, solche parasitären Pathologien zu identifizieren:

  • Askaridose und Enterobiasis (Spulwürmer und Madenwürmer);
  • Trichinose;
  • Opisthorchiasis in akuten und chronischen Formen;
  • Giardiasis;
  • Amöbiasis;
  • Toxoplasmose;
  • Leishmaniose in jeglicher Form.

Wichtig: Der Enzymimmunoassay ist sowohl qualitativ als auch quantitativ. Im ersten Fall bestätigt oder widerlegt der Laborassistent nur das Vorhandensein der gewünschten Substanz im Blut. Im zweiten Fall zeigt die Analyse die Konzentration im Körper des Patienten an.

Nachteile der Methode

Bei all den Vorteilen dieser Diagnosemethode ist es sinnvoll zu verstehen, dass ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay kein Weg ist, die Ursache der Krankheit eines Patienten zu finden, sondern nur eine Methode zur Bestätigung der vom behandelnden Arzt angenommenen Diagnose. Und angesichts der Tatsache, dass Forschung ziemlich teuer ist, muss sie mit Bedacht eingesetzt werden. In diesem Fall sollten die Ergebnisse der Studie nur von einem qualifizierten Spezialisten interpretiert werden.

Vorbereitung für die Parasitenanalyse

Es ist wichtig zu verstehen, dass die Identifizierung von Parasiten durch eine Blutuntersuchung eine gewisse Vorbereitung des Patienten erfordert. Bevor Sie Blut spenden, müssen Sie Folgendes tun:

  • Am Tag vor der Einnahme des Biomaterials sollten fetthaltige Lebensmittel, Alkohol und geräucherte Lebensmittel von der Ernährung ausgeschlossen werden.
  • Blut für einen enzymgebundenen Immunosorbens-Assay auf Parasiten und andere Infektionen sollte morgens auf leeren Magen gespendet werden.
  • Vor der Blutspende ist das Rauchen mindestens 3-4 Stunden lang verboten.
  • Am Tag der Blutentnahme ist es ratsam, nicht nervös zu sein und nicht auf erhöhte körperliche Aktivität zurückzugreifen.

Die Einhaltung dieser Regeln hilft, falsch positive Ergebnisse für Antikörper gegen Parasiten zu vermeiden..

Ergebnisse entschlüsseln

Nachdem wir die Abkürzung ELISA und das, was es ist, zerlegt haben, haben wir herausgefunden, dass es sich lohnt, zur Interpretation der Ergebnisse zu gehen. Es ist wichtig zu verstehen, dass das Ergebnis nur positiv oder negativ ist, wenn die Analyse qualitativ durchgeführt wurde. Das heißt, die Diagnose bestätigt entweder den Verdacht des Arztes bezüglich einer bestimmten Diagnose oder widerlegt sie. In diesem Fall sind die Zeichen "+" bzw. "-".

Wichtig: Ein negatives Testergebnis zeigt nicht immer das Fehlen einer Infektion an. Tatsache ist, dass sich innerhalb von 14 Tagen nach der Infektion Antikörper gegen Antigene bilden können und es wahrscheinlich ist, dass sie noch nicht gebildet wurden.

Wenn eine quantitative Analyse durchgeführt wird, werden die Art der Antikörper, ihre Menge und ihr Aktivitätsstadium bestimmt. Insbesondere werden mit einer solchen Diagnose IgG- und IgM-Antikörper (Immunglobuline) bestimmt, die zu verschiedenen Zeitpunkten des Infektionsverlaufs gebildet werden. Die häufigsten Ergebnisse in diesem Fall sind:

  • Erhöhtes IgM und völlige Abwesenheit von IgG. Dieses Bild zeigt eine kürzlich aufgetretene Infektion und eine akute Phase der Pathologie..
  • Erhöhte Aktivität beider Arten von Immunglobulinen (IgM und IgG). Spricht über den langen und chronischen Verlauf des Infektionsprozesses.
  • IgG-Aktivität und völlige Abwesenheit von IgM. Die Infektion war vor mindestens sechs Monaten und jetzt befindet sich das Virus in einem langwierigen chronischen Stadium.
  • Das Fehlen der Antikörper IgG und IgA. Das Ergebnis ist nicht definiert..
  • Das Fehlen der Antikörper IgM, IgA und IgG. Zeigt einen Mangel an Immunität gegen eine bestimmte Infektion an..
  • Die Aktivität der Antikörper IgG, IgM und IgA zeigt eine Verschärfung des chronischen Prozesses an.

Neben der Identifizierung der Antikörpertypen gibt der Laborassistent in einer speziellen Spalte auf dem Formular auch deren Anzahl im Blutvolumen an. Denken Sie daran, nachdem Sie die ELISA-Methode verstanden haben, die Ergebnisse nicht selbst zu interpretieren. Die Ergebnisse können nur vom behandelnden Arzt mit Genauigkeit interpretiert werden, abhängig von der vorgeschlagenen Diagnose, basierend auf dem Krankheitsbild des Patienten..

ELISA-Bluttest

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay (ELISA) wird durchgeführt, um die Schutzfunktionen des Körpers umfassend zu bewerten. Während der Studie werden Anzahl und Eigenschaften der Immunzellen sowie das Vorhandensein der notwendigen Antikörper bestimmt. Ein ELISA-Bluttest wird durchgeführt, um infektiöse, hämatologische, Autoimmunerkrankungen sowie primäre und sekundäre Immundefekte zu diagnostizieren. Überlegen Sie, was eine Blutuntersuchung mittels ELISA ist und welche Indikationen für diese Studie vorliegen.

Was ist das

Ein ELISA ist eine Labormethode, mit der Antikörper oder Antigene in einer Blutprobe bestimmt werden. Diese Studie wird verwendet, um den Gehalt an Immunglobulinen, immunologischen Komplexen und Hormonen nachzuweisen..

Indikationen zur Analyse

Für die Ernennung eines ELISA-Bluttests liegen folgende Indikationen vor:

  • Diagnose sexuell übertragbarer Infektionen - Ureaplasma, Mycoplasma, Chlamydien, Trichomonas, Syphilis;
  • Diagnose von Viruserkrankungen - Cytomegalievirus, Herpes, Hepatitis, Epstein-Barr-Virus;
  • Bestimmung des Hormonspiegels;
  • Diagnose von Krebs;
  • Bestimmung des Immundefekts;
  • Diagnose von Allergien;
  • präoperative umfassende Untersuchung vor Organtransplantation;
  • Einschätzung der Wirksamkeit der Therapie.

Methodenprinzip

Das Prinzip der Enzymimmunoassay-Methode basiert auf der Bestimmung spezifischer Antikörperproteine ​​in den Blut-Immunglobulinen. Immunglobuline werden vom menschlichen Immunsystem produziert, wenn Antigene (fremde Mikroorganismen) in den Körper gelangen. Solche Immunmoleküle binden an viele infektiöse Krankheitserreger im Körper und neutralisieren sie..

Immunglobuline haben eine wichtige charakteristische Spezifität. Aufgrund dessen können sie an ein bestimmtes Antigen binden und einen Antigen-Antikörper-Komplex bilden. Während des ELISA einer Blutuntersuchung wird dieser Komplex qualitativ und quantitativ bestimmt.

Es gibt fünf Klassen von Immunglobulinen. In der Regel werden jedoch drei Klassen definiert - Immunglobuline A, M, G. Diese Antikörper reichern sich zu unterschiedlichen Zeitpunkten ab dem Zeitpunkt der Infektion im Körper an..

  • Immunglobuline der Klasse M (IgM) treten am fünften Tag nach dem Zeitpunkt der Infektion zum ersten Mal im Blut auf. Sie sind 5-6 Wochen im Körper und verschwinden dann aus dem Blutkreislauf. IgM-Antikörper zeigen eine akute Periode der Krankheit oder eine Verschlimmerung der Krankheit in ihrem chronischen Verlauf an.
  • Ungefähr 3-4 Wochen nach der Infektion erscheinen Immunglobuline der Klasse G (IgG) im Blut. Sie können mehrere Monate oder sogar Jahre im Blut einer Person existieren. Nach der Interpretation des ELISA eines Bluttests sprechen zwei nach zwei Wochen nacheinander entnommene Blutproben, die die Anzahl der IgG-Immunglobuline erhöht haben, von einer aktuellen Infektion oder Reinfektion - einer erneuten Infektion mit derselben Infektion.
  • Immunglobuline der Klasse A (IgA) können mit dieser Testmethode 2–4 Wochen nach Infektion oder Verschlimmerung einer Infektionskrankheit nachgewiesen werden. Von diesen zirkulieren nur 20% im Blut, der Rest befindet sich im Geheimnis der Schleimhäute. IgA-Antikörper verschwinden 2–8 Wochen nach der Zerstörung der Infektionserreger aus dem Blutkreislauf. Das Verschwinden dieser Immunglobuline bedeutet eine Heilung der Infektion. Wenn das Vorhandensein von IgA-Antikörpern im Blut nach dem Ende der Krankheit festgestellt wird, ist die Krankheit in das chronische Stadium übergegangen.

Analysevorbereitung

Für die Analyse von Blut mittels ELISA wird am häufigsten menschliches Blut verwendet. Sie können aber auch den Inhalt des Glaskörpers, der Cerebrospinalflüssigkeit und des Fruchtwassers untersuchen.

Dem Patienten wird eine Blutprobe zur Untersuchung aus der Kubitalvene entnommen. Es wird empfohlen, Blut auf leeren Magen zu spenden (ab dem Moment der letzten Mahlzeit sollten mindestens 12 Stunden vergehen). Es ist notwendig, den Arzt zu informieren, wenn der Patient Medikamente einnimmt, da einige von ihnen das Ergebnis der Analyse ändern können. Die Zuverlässigkeit der Ergebnisse der Studie wird durch den Konsum von Alkohol und Drogen beeinträchtigt..

Entschlüsselung

Die Ergebnisform dieser Analyse zeigt das positive (+) oder negative (-) Ergebnis der Bestimmung jeder Klasse von Immunglobulinen an.

Betrachten Sie die Interpretation einer möglichen Dekodierung eines ELISA-Bluttests.

  • Negatives Ergebnis von IgM, IgG, IgA - mangelnde Immunität gegen Infektionen.
  • Negativ IgM, IgA und IgG positiv - Immunität nach Infektion oder Impfung.
  • Negative oder positive IgG-, IgA- und IgM-positive - akute Infektion.
  • Ein positives Ergebnis von IgM, IgG, IgA - Verschlimmerung einer chronischen Infektionskrankheit.
  • Negatives IgM-Ergebnis und negatives oder positives IgG, IgA-Ergebnis - chronische Infektion.
  • Negatives IgM-Ergebnis und nicht bestimmtes IgG, IgA - Erholung.

Methodenvorteile

Ein ELISA-Bluttest hat viele Vorteile. Die wichtigsten können unterschieden werden:

  • relativ hohe Genauigkeit (Empfindlichkeit);
  • die Möglichkeit einer frühzeitigen Diagnose;
  • die Fähigkeit, die Dynamik des Infektionsprozesses zu verfolgen;
  • hoher Vereinigungsgrad, der ein Massenscreening ermöglicht;
  • eine kurze Zeitspanne, die erforderlich ist, um ein Analyseergebnis zu erhalten;
  • Bequemlichkeit bei der Arbeit;
  • Automatisierung aller Analysephasen;
  • relativ niedrige Kosten.

Nachteile

Der Nachteil der ELISA-Methode besteht darin, dass sie manchmal falsch negative oder falsch positive Ergebnisse liefert. Neben technischen Fehlern während der Studie kann der Rheumafaktor des Patienten, das Vorhandensein chronischer Krankheiten (bei denen Antikörper produziert werden), Stoffwechselstörungen und die Verwendung bestimmter Medikamente die Ursache für falsche Ergebnisse sein.

ELISA-Bluttest auf Parasiten

Mit dieser Methode bestimmen Blutuntersuchungen das Vorhandensein der folgenden parasitären Prozesse im Körper:

  • Ascariasis;
  • Trichinose - die Analyse wird mehrmals durchgeführt, der maximale Antikörperspiegel wird 4-12 Wochen nach der Infektion bestimmt;
  • Zystizerkose;
  • Teniose;
  • Faszioliasis - Antikörper werden im akuten Stadium der Krankheit bestimmt;
  • Opisthorchiasis - Differenzialdiagnose zwischen der chronischen und der akuten Form der Krankheit durchführen;
  • Giardiasis;
  • viszerale und kutane Leishmaniose;
  • Amöbiasis;
  • Toxoplasmose.

Ein ELISA-Bluttest auf Parasiten wird verwendet, um Antigene (Parasiten und ihre Stoffwechselprodukte) und Antikörper (Immunglobuline) nachzuweisen. Immunglobuline werden im Körper als Antikörper gegen Antigene produziert. Die Spezifität dieser Methode bei der Bestimmung von Parasiten beträgt 90%. Mit dieser Analyse können Sie die Art der Parasiten, ihre Anzahl und aufgrund der Menge an Antikörpern bestimmen, um die Dynamik der Prozesse zu verfolgen.

ELISA-Analyse - Was ist das? Dekodierung eines enzymgebundenen Immunosorbens-Assays auf Parasiten, Syphilis, HIV, Tuberkulose. Norm in der Tabelle, Ergebnisse

Dank der Entwicklung der modernen Medizin muss sich der Arzt bei der Diagnose nicht mehr auf indirekte Manifestationen von Krankheiten konzentrieren oder mehrstufige Laborstudien durchführen. Es reicht aus, eine Analyse durchzuführen, die die angebliche Erstdiagnose bestätigt oder widerlegt..

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay (ELISA) ist diese Methode. Mit dieser Studie können Sie spezifische Antikörper und Antigene nachweisen, die einer Vielzahl von Pathologien inhärent sind, was die Diagnose erheblich beschleunigt.

Was ist IFA?

Die ELISA-Analyse ist ein Labortest (Methode), mit dessen Hilfe das Vorhandensein oder Fehlen bestimmter Antikörper im Körper zur Bekämpfung des Virus und ihrer Anzahl bestimmt werden kann.

Grundlage der Studie ist die natürliche Reaktion eines Antigens (eines für den Körper schädlichen Objekts) - eines Antikörpers (eines Proteins, das schädliche Objekte zerstört), mit dem das Vorhandensein einer Vielzahl von Viren und Bakterien nachgewiesen werden kann.

ELISA ist eine natürliche Immunantwort des Körpers - die Wechselwirkung eines Antikörpers mit dem entsprechenden Antigen. Während des ELISA werden Antigene oder Antikörper abwechselnd mit dem Material in das Röhrchen gegeben, wonach die Konzentration der resultierenden Antigen-Antikörper-Komplexe nachgewiesen wird.

Wenn Zufälle gebildet werden, entstehen Immunkomplexe, dann findet eine enzymatische Reaktion des Farbstoffs mit dem kombinierten Molekül statt. Es ist auf die Farbänderung während der enzymatischen Indikation zurückzuführen, dass die Krankheit nach Untersuchung des Spiegels der nachgewiesenen Verbindung identifiziert wird.

Arten von Immunglobulinen

Humane Immunglobuline unterscheiden sich in mehrere Klassen, die sich in Eigenschaften, Struktur und antigenen Eigenschaften schwerer Ketten (H-Ketten) voneinander unterscheiden. Bei allen Säugetieren, einschließlich Menschen, werden fünf H-Ketten isoliert, die die Zugehörigkeit von Immunglobulinen zur entsprechenden Klasse bestimmen: G, M, A, D, E..

Jede Klasse unterscheidet sich in ihren biologischen Eigenschaften, ihrer Fähigkeit, Antigene zu binden, sowie in der Geschwindigkeit und Stärke ihrer Bindungen an das Molekül..

Die Funktionen jedes Immunglobulins (lg) sind unterschiedlich:

Menge im KörperFunktionenHalbwertszeit (Tage)Wert
G70%Passive Immunität beim Neugeborenen bilden;

notwendig für eine Immunantwort

Verbesserung der Phagozytose,

21-24bieten lang anhaltende humorale Immunität bei Infektionskrankheiten
M.5-10%benötigt, um die Phagozytose zu aktivieren,

in der Lage, 5 Antigenmoleküle zu binden,

fünfBietet eine primäre Immunantwort
UND10-15Neutralisieren Sie Toxine und Viren

benötigt für die Bildung der frühen Immunität

Lokale Immunitätserziehung

4-5Schleimhautschutz
E.0,2%verursachen Allergien und Anaphylaxie aktivieren Gewebe-Basophile2Parasitenschutz
D.0,2%beteiligt an der Produktion von Lymphozyten, die als Membranrezeptor für Antigene notwendig sind;3Ihre Rolle ist wenig verstanden.

Das Auftreten von Immunglobulinen erfolgt in einer Art "Kette" - IgM IgG. So reagiert der Körper auf das Auftreten von Antigen im Körper. Während der Labordiagnose wurde eine Bewertung der Konzentration von drei Haupt-Immunglobulinen - G, M, A - durchgeführt.

Indikationen zur Immunglobulinanalyse

Die ELISA-Analyse wird von Jahr zu Jahr beliebter..

Eine solche Studie beschleunigt die Diagnose, und dies ist sehr wichtig für die Behandlung von Pathologien wie:

  • Virushepatitis;
  • HIV infektion;
  • Cytomegalovirus,
  • Epstein Barr Virus,
  • Herpesvirus,
  • Masern
  • Röteln,
  • Tuberkulose,
  • Salmonellose,
  • Ruhr,
  • durch Zecken übertragene Enzephalitis,
  • Helicobacter-Bakterien,
  • Borreliose,
  • Tetanus,
  • Syphilis,
  • Diphtherie,
  • Leptospirose,
  • Chlamydien,
  • Ureaplasmose,
  • Mykoplasmose,
  • Keuchhusten.

Mit der Analyse können Sie auch die Infektion mit Parasiten bestimmen:

  • Plattwürmer
  • Spulwurm
  • histologische Amöbe,
  • Leberzitaden,
  • Lamblia,
  • Toxoplasma,
  • Trichine,
  • hepatisch,
  • Cestodosen.

ELISA ist eine Art Marker für Autoimmunerkrankungen und maligne Neoplasien.

Vorbereitung auf den Test

Zur Vorbereitung der Studie sollten Sie folgende Regeln einhalten:

  • Einen Tag vor der Blutentnahme dürfen Sie nicht rauchen und Alkohol trinken,
  • Nehmen Sie nicht an Sport oder anderen körperlichen Aktivitäten teil,
  • versuche Stress zu vermeiden,

Bevor Sie eine ELISA-Analyse bestehen, müssen Sie Stress vermeiden.

  • Beenden Sie den Drogenkonsum spätestens 10 Tage vor der Manipulation.
  • Ärzte empfehlen auch eine spezielle Diät - schließen Sie fetthaltige und frittierte Lebensmittel aus. Wenn die Studie auf Hepatitis durchgeführt wird, müssen Sie kein Orangengemüse und insbesondere keine Zitrusfrüchte verwenden. Morgens Blut auf leeren Magen spenden.

    Eine falsch positive Analyse ist auf unerfüllte Empfehlungen zurückzuführen, insbesondere auf die Verwendung von fetthaltigen Lebensmitteln, was zu einer zu hohen Konzentration von Triglyceriden im Plasma führt, wodurch die Leitfähigkeit des ELISA abnimmt.

    Probenahmeverfahren

    Als Testmaterial kann Vollblut, Serum oder venöses Blutplasma verwendet werden. Materialprobenahme, üblicherweise aus der Ulnarvene, hierfür werden eine Einwegnadel und ein Vakuumröhrchen verwendet, 5-10 ml Blut werden benötigt.

    Für die Genauigkeit des Ergebnisses ist es wichtig, die richtige Probenahmetechnik einzuhalten - die Punktion des Gefäßes selbst und des umgebenden Gewebes muss mit einer Manipulation durchgeführt werden. Daher wird eine kurze Nadel mit großem Durchmesser verwendet, damit die gegenüberliegende Wand der Vene nicht verletzt wird und die roten Blutkörperchen nicht beschädigt werden.

    Um die Unversehrtheit der roten Blutkörperchen zu erhalten, muss das Blut durch die Wände des Röhrchens fließen.

    Während der Lagerung des Materials sollte eine mögliche Ionisierung vermieden werden. Außerdem sollte das Material nicht mit den Resten von Desinfektionsmitteln in Kontakt kommen. Daher wird nur ein Einweg-Kunststoffschlauch mit dem Namen, dem Datum und der Uhrzeit der Lieferung des Materials des Patienten verwendet.

    Wenn eine kurze Lagerung des Testmaterials erforderlich ist, wird ein Kühlschrank mit einer Temperatur von 2 bis 4 ° C verwendet. Wenn eine längere Lagerung erforderlich ist, wird das Material bei einer Temperatur von -20 ° C eingefroren.

    Wie erfolgt die Analyse?

    Nach der Vorbereitung des Testmaterials fährt der Laborassistent mit den erforderlichen Manipulationen fort. Hierzu werden eine Reihe spezieller Antigensätze verwendet, die es ermöglichen, die Reaktion des Körpers auf einen Reizstoff zu provozieren. Hierbei handelt es sich um verschiedene Infektionen, Hormone und Allergene.

    Das erwartete Antigen-Antikörper-Reaktionsschema sieht ungefähr so ​​aus:

    • Die primäre Reaktion ist nachweisbares Ig (Ab) und gereinigtes Pathogenantigen (Ag)..
    • Um die resultierenden Immunkomplexe nachzuweisen, folgt eine neue immunologische Reaktion, bei der das spezifische spezifische Ig als Antigen und das Konjugat-Ig (Ab) als Antikörper dafür fungiert.
    • Der letzte Schritt ist eine enzymatische Reaktion zusammen mit einem Katalysatorkonjugatmolekül. Das Substrat ist ein Chromogen (nicht gefärbt), das sich im Verlauf der Reaktion färbt, und die Farbintensität bestimmt den quantitativen Indikator des Immunglobulins in der Probe.

    Derzeit wurden viele verschiedene ELISA-Optionen entwickelt, und es gibt keine eindeutige Klassifizierung. Typischerweise werden Methoden auf der Grundlage der Trennung in heterogene und homogene Methoden betrachtet - alle Phasen der Analyse erfolgen unter Verwendung einer festen Phase oder nur unter Verwendung einer Lösung.

    Moderne klinische Diagnoselabors verwenden normalerweise einen heterogenen (Festphasen-) ELISA. In diesem Fall bedeutet die Festphase die Absorption von Antigenen oder Antikörpern auf der festen Oberfläche von speziellen Vertiefungen, die sich auf einer Polystyrol-Mikroplatte befinden. Die Methode ist in direkten und indirekten ELISA unterteilt.

    Bei einem direkten ELISA fixiert sich das eingeführte Antigen während des Inkubationsprozesses auf der Oberfläche leerer Vertiefungen. Dazu werden die untersuchten Proben des Materials 20 bis 25 Minuten lang in saubere Vertiefungen gegeben. Dies ist erforderlich, um das Antigen an ihrer Oberfläche zu befestigen. Danach werden die notwendigen Antikörper hinzugefügt. Ferner bleibt das Material für eine bestimmte Zeit, um Bindungen zu bilden.

    Antikörper werden immer im Überschuss zugesetzt. Selbst wenn sie vorhanden sind, verbleiben ungebundene Antigene in der Probe, und wenn überhaupt keine Antigene vorhanden sind, gibt es keine Bindungen. Um die "zusätzlichen" Antikörper zu entfernen, wird eine Dekantierung durchgeführt, wonach nur diejenigen Antikörper übrig bleiben, die eine Verbindung mit dem Antigen hergestellt haben.

    Danach folgt eine enzymatische Reaktion - Zugabe einer Lösung des Enzyms zu den Vertiefungen, wonach die erhaltenen Bindungen gefärbt werden.

    Bei der indirekten ELISA-Methode sind die verwendeten Antikörper mit dem Substrat der enzymatischen Reaktion vorverbunden; In diesem Fall erfolgt die Bindung von Antikörpern an das Antigen während des Inkubationsprozesses, wonach eine Mobilisierung von Bindungen auf der Oberfläche der Vertiefungen erfolgt und das nach der Reaktion eingeführte konjugierte und substratchromogene Reagenz die Reaktion färbt.

    Daher besteht der Hauptunterschied zwischen der indirekten Methode und der direkten Methode nicht darin, das Material an die Oberfläche der sauberen Vertiefungen zu kleben, sondern an das auf der Tablette immobilisierte Antigen zu binden.

    Die Reaktion stoppt unter Verwendung spezieller Vorrichtungen, dann wird jede Vertiefung einem photometrischen Prozess unterzogen, gefolgt von einer vergleichenden Beschreibung des Ergebnisses, das mit zuvor durchgeführten Kontrollproben erhalten wurde.

    Wird in der Probe eine Zunahme der optischen Dichte festgestellt, wird auch die Konzentration spezifischer Antikörper im Testergebnis überschätzt..

    Wann wird die Analyse fertig sein?

    Die Studie dauert nicht viel Zeit, von der Blutentnahme bis zur Erzielung des Ergebnisses. Je nach diagnostischen Maßnahmen dauert sie 1 bis 10 Tage.

    Testergebnisse und deren Interpretation

    Ein negatives oder positives Ergebnis für bestimmte Klassen von Immunglobulinen ist auf dem Formular angegeben, das der Patient als Ergebnis der Diagnose erhalten hat, und ein quantitativer Indikator für verschiedene Klassen von Antikörpern ist ebenfalls angegeben.

    Unterschiedliche Interpretationen der Ergebnisse sind möglich:

    1. IgM (+) (IgA, IgG nicht bestimmt) - der Heilungsprozess;
    2. IgM (-); IgG (+), IgA (+) - chronische infektiöse Pathologie;
    3. IgM, IgG, IgA (alle mit - Wert) - fehlende Schutzmechanismen für Infektionen;
    4. IgG (+/-) und IgA (+/-), IgM (+) - ein akuter Prozess;
    5. IgM (-), IgA (-), IgG (+) - postinfektiöse Immunität;
    6. IgM, IgG, IgA (+) - chronische Pathologie im akuten Stadium.

    Wenn beispielsweise IgG und IgM nachgewiesen wurden, kann der Patient eine der folgenden Krankheiten haben:

    • Virushepatitis;
    • Cytomegalovirus;
    • Herpes;
    • Windpocken;
    • Chlamydien
    • Staphylokokken- oder Streptokokkeninfektion.

    Für hormonelle Studien wird häufig ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay verschrieben. Die Normen sind in der Tabelle aufgeführt:

    Hormon NameFußbodenNorm
    1Thyreoglobulinm / wBis zu 70 IE / ml
    2Thyroxinm / w64-146 nmol / l
    3Triiodthyroninm / w1,8-2,8 nmol / l
    4Thyroxin freim / w11-25 pmol / l
    fünfFreies Triiodritoninm / w4,49-9,3 pmol / l
    6Testosteron, DehydrotestosteronF.0,5-10 mU / l

    Die ELISA-Analyse ist eine diagnostische Studie, mit der Sie die Wahrscheinlichkeit der Bildung von Krebspathologien beurteilen können. Die Interpretation der Ergebnisse erfolgt jedoch nur durch den behandelnden Arzt.

    Der Wert der Testergebnisse

    ELISA eignet sich zum Nachweis verschiedener Formen von Genitalinfektionen, einschließlich Syphilis, und wird häufig zum Screening schwangerer Frauen verwendet..

    Dank dieser Studie können Sie herausfinden, wie lange die Infektion und das Stadium der Krankheit zum Zeitpunkt der Studie aufgetreten sind:

    • Immunglobuline M geben die Dauer der Krankheit an;
    • IgA - der Patient wurde vor mehr als 30 Tagen infiziert;
    • IgG wird auf dem "Höhepunkt" von Krankheiten oder zu dem Zeitpunkt gefunden, an dem die Therapie vor kurzem beendet wurde.

    Während der Studie bleiben die Vertiefungen auf der Tablette mit einem negativen Indikator farblos und die positiven sind hellgelb gefärbt. Wenn die Farbe der positiven Vertiefungen nicht mit der Farbe der Kontrolle übereinstimmt, wird das Ergebnis als zweifelhaft angesehen und eine erneute Untersuchung ist erforderlich..

    Der enzymgebundene Immunosorbens-Assay ist der erste Schritt bei der Diagnose von HIV. Es ist unmöglich, die Analyse unmittelbar nach der angeblichen Infektion durchzuführen. Es muss bis zum Ende der Inkubationszeit (von 14 Tagen bis 6 Monaten) gewartet werden..

    Im Verlauf der Analyse werden Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2 bestimmt, eine Suche nach Antikörpern der Klasse G, die üblicherweise zu einem späteren Zeitpunkt auftritt, und Antikörper der Klassen A und M können in den frühen Stadien (während der Inkubationszeit) bestimmt werden..

    Nach Erhalt positiver Proben sollte Folgendes sein:

    • Wenn der erste Test ein positives Ergebnis ergab, wird das Blut erneut von einem anderen Laborassistenten überprüft.
    • Das wiederholte positive Ergebnis beinhaltet die Rücknahme von Material,
    • Bei Wiederholung des Ergebnisses wird dem Patienten ein Immunoblot zugewiesen.

    Die endgültige Schlussfolgerung über das Vorhandensein einer HIV-Infektion wird erst nach dem Ergebnis des Immunoblots gezogen.

    Der ELISA wird auch als diagnostische Studie zur Tuberkulose verwendet. Selbst wenn der Patient sogar Antikörper gegen diese Pathologie aufweist, bestätigt dies nicht immer das Vorhandensein von Tuberkulose. Daher wird der ELISA häufig als Klärungstechnik oder zur Diagnose einer verborgenen extrapulmonalen Form verwendet.

    Die ELISA-Analyse ist eine solche Studie, mit der Sie eine Infektion eines Patienten mit Parasiten und Protozoen nachweisen können. Während der Diagnose können Sie sogar den Zeitpunkt der Infektion bestimmen.

    ChlamydienCytomegalovirusParasiten
    IgM - 7 Tage nach der Infektion nachgewiesen,IgM werden 30-45 Tage nach der Infektion oder während der Reaktivierung der Infektion für 4-6 Monate nachgewiesenDie Studie bestimmte IgME.

    IgG - chronisches Stadium der Invasion

    IgA - Infektion trat vor mehr als 30 Tagen auf
    Die IgG-Invasion befindet sich in der akuten Phase
    IgG - bestätigt die Diagnose und zeigt die Wirksamkeit der Therapie

    Vor- und Nachteile der Analyse

    IFA hat viele Vorteile, was seine Beliebtheit bei Ärzten und Patienten erklärt:

    • hohe Genauigkeit des Ergebnisses,
    • bezahlbarer Preis,
    • schnelles Ergebnis,
    • Identifizierung des Krankheitsstadiums,
    • Dynamik der Krankheitsbekämpfung.

    Neben den Vorteilen gibt es jedoch einen Nachteil: In seltenen Fällen ist die Analyse falsch positiv oder falsch negativ.

    Warum das Ergebnis möglicherweise unzuverlässig ist

    Fehler können aufgrund technischer Verstöße auftreten, die Analyse ist auch bei Menschen mit einigen chronischen Erkrankungen (Rheumafaktor) unzuverlässig, für die die Produktion spezifischer Antikörper charakteristisch ist.

    Das Endergebnis wird auch durch die Verwendung von Patientenmedikamenten und Stoffwechselstörungen beeinflusst. Aus diesen Gründen muss ein positives HIV- und onkologisches Testergebnis erneut getestet werden..

    Forschungskosten

    Der Preis für ELISA variiert je nach Diagnoserichtung (Rubel):

    • Hepatitis 250-900;
    • Viren - 250-1000;
    • HIV - 250-350;
    • Helminthenbefall - 280 - 900;
    • Syphilis -150-250;
    • Pilzinfektionen 400-500.

    Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay ist eine der effektivsten Methoden zur Untersuchung einer Vielzahl von viralen Pathologien, parasitären Infektionen und onkologischen Pathologien. Eine Studie wie der ELISA erleichtert die Diagnose erheblich. Diese Analyse sollte jedoch nicht vom Patienten selbst interpretiert werden, sondern nur von einem Arzt behandelt werden.

    Gepostet von: Bacio

    Artikelgestaltung: Oleg Lozinsky

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