Enzymgebundener Immunosorbens-Assay: Decodierung, Methoden

Mit der Entwicklung verwandter Wissenschaften wie Genetik, Molekularbiologie, Chemie sowie dem Wachstum des technologischen Fortschritts verfügt die moderne Medizin über innovative Diagnosemethoden für eine Vielzahl menschlicher Krankheiten. Sie zeichnen sich durch hohe Genauigkeit der Ergebnisse und Leistungssicherheit aus. Eine dieser Möglichkeiten zur Identifizierung von Gesundheitsproblemen ist der enzymgebundene Immunosorbens-Assay. Es hat in den letzten zehn Jahren eine weit verbreitete Popularität erlangt und sich einen Ruf als hochwirksame, zuverlässige und patientenfreundliche Methode zur Erkennung von Krankheiten erworben, noch bevor äußere Symptome auftreten. Wir werden leicht erklären, was diese Art der Diagnose ist, was das Prinzip ihrer Wirkung ist, die Vorteile beachten, wir werden uns an den Kosten einer solchen Analyse orientieren.

Die Reaktion des Körpers auf die pathogene Flora

Um zu verstehen, wie Labortechniker dank eines enzymgebundenen Immunosorbens-Assays verschiedene Krankheiten diagnostizieren, ist es notwendig, den physiologischen Prozess zu verstehen, der im Körper während einer Infektion mit Infektionen auftritt. Wenn ein pathogener Mikroorganismus in den Blutkreislauf gelangt, zeigt das menschliche Immunsystem eine Schutzreaktion in Form der Freisetzung bestimmter Substanzen - Antikörper. Sie binden an die Zelle und analysieren, ob sie Teil des Körpers ist oder von außen eingedrungen ist. Wenn das Immunsystem feststellt, dass die Zelle fremd ist, steigt die Anzahl der Antikörper an, um den pathogenen Mikroorganismus zu bekämpfen.

Antikörper kommen in vielen Formen vor und haben ihre eigenen Eigenschaften. Einige Substanzen treten direkt während der Infektionsperiode auf, andere verbleiben während des gesamten Lebens im menschlichen Körper und dank ihnen entwickeln sie eine stabile Immunität gegen eine bestimmte Krankheit. Proteinstrukturen werden in die folgenden Typen unterteilt: A, D, E, M, G. In der Medizin werden Antikörper als Immunglobuline bezeichnet. Daher ist es üblich, die Indikatoren dieser Substanzen in lateinischen Buchstaben Ig zu bezeichnen.

Der enzymgebundene Immunosorbens-Assay (ELISA) basiert auf Daten aus medizinischem Wissen. Mit speziellen Antigenen im Labor kann das Vorhandensein oder Fehlen bestimmter Antikörper in biologischem Material bestimmt werden. Basierend auf den Ergebnissen einer solchen Analyse kann der Arzt eine Diagnose stellen und nicht nur das Vorhandensein einer Pathologie, sondern auch die Einschränkung ihres Ursprungs feststellen, um das Ausmaß der Gefahr für den Patienten zu bestimmen. In einem Enzymimmunoassay wird am häufigsten das Vorhandensein von Antikörpern der M- und G-Gruppen untersucht..

Was ist eine IFA??

Tatsächlich ist ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay in der modernen Gesellschaft keine Innovation. Es wurde bereits in den 80er Jahren erfunden. Um solche Studien durchzuführen, waren jedoch sperrige, teure Geräte erforderlich. Daher wurde diese Methode nur in speziell ausgestatteten wissenschaftlichen Labors angewendet: Sie wurde zur Typisierung von Zellen und Geweben verwendet. Aber dann wurde er in der diagnostischen Medizin nicht weit verbreitet, da die Verwendung technisch schwierig und extrem teuer war. Erst mit der Entwicklung der Technologie und der Erfindung von Biopolymermaterialien verbesserte sich der ELISA. Danach begann die Methode populär zu werden und Vertrauen in medizinische Kreise zu gewinnen.

Wie oben erwähnt, beinhaltet dieses Verfahren den Nachweis bestimmter Gruppen von Immunglobulinen im Biomaterial - Blut, Fruchtwasser, Glaskörper oder Liquor cerebrospinalis -.

Es gibt Studien ohne Anwendung von Antigen auf die Oberfläche und einen enzymgebundenen Immunosorbens-Assay, bei dem die Reaktion in speziellen Vertiefungen erfolgt. Das letztere Verfahren weist eine große Empfindlichkeit und Zuverlässigkeit auf, daher wird auf diese Weise eine Analyse in medizinischen Laboratorien durchgeführt, um menschliche Krankheiten zu erkennen.

Enzymgebundener Immunosorbens-Assay

Abhängig von der vermuteten Krankheit wird das erforderliche Antigen aus dem enzymgebundenen Immunosorbens-Assay-Kit verwendet, das während der chemischen Reaktion in Gegenwart einer Infektion an die pathogene Flora bindet. Dieser Vorgang wird als Immunantwort bezeichnet..

Führen Sie dann die enzymatische Phase des ELISA durch, um das Ergebnis der Studie visuell zu bestimmen. Dabei wird das Material mit speziellen Reagenzien angefärbt. In dieser Studie werden Enzyme wie alkalische Phosphatase, Peroxidase und Avidin verwendet. Abhängig von der Farbe, die während chemischer Reaktionen erhalten wird, wird das Ergebnis eines Enzymimmunoassays bestimmt.

Was ist Kolorimetrie??

Die Analyse der enzymatischen Diagnosephase erfolgt nach der als "Kolorimetrie" bezeichneten Methode. Tatsache ist, dass nicht nur die Farbe des Materials Informationen über die Infektion liefert, sondern auch die Farbdichte, die sich aus chemischen Reaktionen ergibt. Dieser Indikator bestimmt die Konzentration des pathogenen Mikroorganismus. Wenn die manuelle Diagnosemethode auf die alte Art und Weise verwendet wird, wird ein spezielles Kalibrierungsdiagramm erstellt, um diese Indikatoren zu bestimmen.

In modernen Labors wird die manuelle Methode heutzutage selten angewendet. Für die Analyse des ELISA wird ein spezielles Gerät verwendet - ein Kolorimeter, bei dem nur die Forschungsparameter manuell eingestellt werden und dann alle Arbeiten, einschließlich des Zeichnens, automatisch ausgeführt werden.

ELISA-Methoden

Es gibt direkte und indirekte Methoden des Enzymimmunoassays. Die erste Ansicht benötigt weniger Zeit, da sie nur drei Ausführungsstufen umfasst. Zunächst werden den Antigenen des Testmaterials, die in speziellen Vertiefungen platziert sind, spezifische Antikörper zugesetzt. Dann wird ihre überschüssige Menge entfernt und die enzymatische Phase der Analyse durchgeführt, wodurch das Ergebnis erhalten wird.

Die indirekte Methode wird viel häufiger angewendet, da sie im Vergleich zur direkten Diagnosemethode eine höhere Empfindlichkeit aufweist. Bei der Durchführung wird eine Doppelstudie verwendet. Das Antigen ist nämlich zuerst mit einem nicht markierten Antikörper und dann mit einem markierten assoziiert. Dieser Vorgang dauert länger, aber das Ergebnis ist das genaueste..

Reagenzien-Kits

Enzymgebundene Immunosorbens-Assay-Kits werden von verschiedenen Herstellern in einer Vielzahl von Konfigurationen hergestellt. In Russland ist das anerkannte Unternehmen die Union of Medical and Biological. Dieser Hersteller stellt Reagenzienkits für ELISA-Studien für fast alle in unseren Breiten häufigen Infektionen her, die auf diese Weise analysiert werden können. Zusätzlich zu den Reagenzien selbst sind zusätzliche Materialien in den Kits enthalten, die Sicherheit, Komfort und Geschwindigkeit der Analyse gewährleisten. Darüber hinaus werden chemische Substanzen in verschiedenen Farben lackiert, was die Wahrscheinlichkeit eines Fehlers bei der Auswahl des Reagenzienlaborassistenten verringert.

Chemisch-biologische Sets unterscheiden sich in der relativen Zugänglichkeit, was sich direkt auf die Verteilung und Verfügbarkeit des Enzymimmunoassays für die Bevölkerung auswirkt.

Vorteile der Diagnosemethode

Zweifellos hat der Enzymimmunoassay eine Reihe von Vorteilen gegenüber anderen diagnostischen Methoden:

  1. Mit ihm können Sie sogar das unbedeutende Vorhandensein pathogener Organismen feststellen, was auf eine hohe Empfindlichkeit des Tests hinweist..
  2. Die Fähigkeit, eine Krankheit in den frühesten Stadien zu erkennen, was die Chance auf eine erfolgreiche Heilung erheblich erhöht.
  3. Einfachheit und Bequemlichkeit der Aufnahme von biologischem Material. Eine solche Analyse wird sowohl in privaten als auch in staatlichen Laboratorien durchgeführt. Bei Bedarf kann die Krankenschwester das Material dem Patienten zu Hause abnehmen.
  4. Eine Analyse erfordert eine sehr geringe Menge an Biomaterial.
  5. Schnelles Ergebnis. Mit modernen medizinischen Geräten können Sie tagsüber Analysen durchführen.
  6. Die Fähigkeit, latente asymptomatische Infektionsformen zu erkennen.
  7. Zugänglichkeit der Studie.
  8. Bei Bedarf sind Massenerhebungen mit dieser Methode möglich..
  9. Es ist möglich, das Fortschreiten der Krankheit und die Wirksamkeit der verschriebenen Behandlung zu verfolgen, da es möglich ist, eine ELISA-Analyse durchzuführen, die für den Patienten viele Male absolut sicher ist.
  10. Automatisierung der Phasen der Analyse, wodurch der Faktor Mensch eliminiert und die Zuverlässigkeit der Ergebnisse erhöht wird.
  11. Reagenzien für ELISA werden lange gelagert - etwa ein Jahr.
  12. Die Analyse ist bei Schwankungen der Umgebungstemperatur möglich..

Immunglobuline der Gruppe M.

Antikörper der Gruppe M werden vom Immunsystem unmittelbar nach dem Nachweis eines fremden Antigens produziert. Wenn der Enzymimmunoassay mit dem Nachweis solcher Substanzen im Biomaterial endete, deutet dies auf ein akutes Stadium des Krankheitsverlaufs hin, die Primärinfektion. Immunglobuline der Gruppe M können je nach Art der Infektion bis zu einem Monat im Körper verbleiben. Dann nimmt ihre Anzahl ab, um vollständig zu verschwinden.

Immunglobuline der Gruppe G.

Proteinstrukturen vom Typ G scheinen Immunglobuline der Gruppe M zu ersetzen. Diese Substanzen erzeugen in den meisten Fällen eine stabile, in den meisten Fällen lebenslange Immunität gegen die Krankheit. Die Bestimmung der Proteinstruktur von IgG im Testmaterial zeigt an, dass der Körper zuvor auf einen Erreger gestoßen ist und eine Schutzreaktion vor einer erneuten Infektion aufweist.

Indikationen zur Diagnose

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay wird verwendet, um verschiedene Infektionskrankheiten, hormonelle Zustände und Allergietests zu bestimmen. Nämlich:

  • den Spiegel der Schilddrüsenhormone bestimmen;
  • Indikatoren des reproduktiven Hormonpanels;
  • Tumormarker;
  • Erreger von Infektionskrankheiten wie Cytomegalievirus, Hepatitis, Toxoplasma, Röteln, Masern, Tuberkulose, Chlamydien, Syphilis, Mycoplasma, Ureplasma, Candida, Giardia und sogar HIV nachweisen;
  • Sie diagnostizieren Autoimmunerkrankungen. Insbesondere wird häufig ein Enzymimmunoassay verwendet, um Schilddrüsenhormone zu untersuchen: TSH, TG, T3 und T4.

Zusätzlich zu diagnostischen Zwecken wird die Enzymimmunoassay-Methode in medizinischen Forschungsaktivitäten eingesetzt.

Wie wird das Material aufgenommen??

In den meisten Fällen wird zur Analyse eine venöse Blutentnahme empfohlen. Nach der Verarbeitung und Vorbereitung des Materials für die Studie wird ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay für Serum oder Plasma durchgeführt.

Die Untersuchung des Hormonpanels erfordert besondere Aufmerksamkeit, da es in diesem Fall äußerst wichtig ist, die Merkmale der Materialaufnahme zu berücksichtigen. Zum Beispiel erfordert die Diagnose der meisten Hormone im Fortpflanzungssystem einer Frau die Entnahme von venösem Blut an bestimmten Tagen des Menstruationszyklus. Eine Reihe anderer Hormone wird von externen Faktoren beeinflusst: Saisonalität, Tageszeit, psychischer Zustand des Patienten und vieles mehr. Wenn Sie bestimmte Faktoren nicht berücksichtigen, können Sie ein falsches Ergebnis erhalten, das zu einer Verschlimmerung der Krankheit oder einer nicht ordnungsgemäß verschriebenen Behandlung führt.

In einigen, oft komplizierteren Fällen kann die Analyse bei einer schwangeren Frau Liquor cerebrospinalis, Glaskörper oder Fruchtwasser erfordern. Verfahren zur Sammlung dieser biologischen Materialien bergen ein gewisses Risiko, Kontraindikationen und eine Erholungsphase. Daher sollte ein solcher enzymgebundener Immunosorbens-Assay nur nach Aussage des Arztes und unter seiner professionellen Aufsicht durchgeführt werden. Die Entschlüsselung erfordert in diesem Fall spezielle medizinische Kenntnisse und kann einige Zeit dauern.

Analysevorbereitung

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay sollte unter Einhaltung aller Empfehlungen durchgeführt werden, da externe Faktoren die Ergebnisse der Studie beeinflussen. Zum Beispiel ist es wichtig, morgens (bis zu 11 Stunden) venöses Blut auf nüchternen Magen zu spenden. 2 Wochen vor der angeblichen Aufnahme des Materials müssen Sie die Einnahme von Medikamenten, insbesondere Hormonen, einstellen. Einige Tage vor der Studie sollten Sie auf Alkohol und fetthaltige Lebensmittel verzichten und körperliche Aktivität, Sorgen und Stress ausschließen..

Ergebnisse entschlüsseln

Die Entschlüsselung der Ergebnisse eines enzymgebundenen Immunosorbens-Assays erfordert spezielle Kenntnisse über die Merkmale der oben beschriebenen Proteinstrukturen (Antikörper) (IgG und IgM). In Übereinstimmung mit diesen Daten werden Forschungsindikatoren analysiert. In der Tabelle werden die Optionen beschrieben, die während der Analyse erhalten werden können:

Enzymimmunoassay: ein Transkript
Immunglobuline M.Immunglobuline G.Angebliche Entschlüsselung
negativnegativDer Körper hat diese Infektion noch nie erlebt. Es gibt weder einen Erreger noch Antikörper dagegen.
negativpositivDer Körper hat eine starke Immunität gegen Infektionen entwickelt..
positivnegativAkute Form der Infektion.
positivpositivHöchstwahrscheinlich Primärinfektion, aber zusätzliche diagnostische Tests sind erforderlich.

Aus der Analyse der dargestellten Tabelle können wir schließen, dass in den meisten Fällen zusätzliche Studien erforderlich sind, um die Diagnose zu bestätigen. Eine enzymgebundene Immunosorbensanalyse allein kann keine eindeutige Antwort geben. Die Norm hat in diesem Fall keine klaren Grenzen: Die nachgewiesenen Proteine ​​der Gruppe G zeigen nur an, dass der Körper zuvor mit einem bestimmten Erreger infiziert wurde. Das gleiche Ergebnis kann jedoch auf das Vorhandensein einer akuten Phase hinweisen. Es ist wichtig, viele Faktoren und Indikatoren zu vergleichen, um die richtige Diagnose zu stellen.

Risikofaktoren

ELISA ist zu 90% genau. Dennoch gibt es Risikofaktoren, die die Verzerrung des Diagnoseergebnisses beeinflussen: Fehlfunktion der Geräte, unsachgemäße Sammlung, Lagerung und Transport von Material, Nichtberücksichtigung anderer externer Faktoren.

Eine Diagnose nach Bluttransfusion, Hämolyse, chirurgischen Eingriffen, Biopsie oder Punktion von biologischem Material wird nicht empfohlen - dies kann auch die Ergebnisse von Indikatoren beeinflussen.

Analysekosten

Die Kosten einer diagnostischen Studie sind breit gefächert und hängen von der Art der Analyse und dem zu bestimmenden Antigen ab, da auf der Grundlage dieser Faktoren die Kosten für Reagenzienkits berechnet und die Komplexität der Analyse bestimmt werden. In den meisten Fällen steht vielen Patienten jedoch ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay zur Verfügung. Sein Preis ist von 300 r. bis zu 2000 r.

ELISA ist eine kostengünstige, schnelle und hochwirksame Methode zur Diagnose einer großen Liste von Krankheiten. Aber nur ein qualifizierter Mediziner ist berechtigt, die Ergebnisse zu entschlüsseln und eine Diagnose zu stellen.

IFA: Wie wird die Analyse durchgeführt? Kosten. Ergebnisse entschlüsseln

Hochpräzise Analysemethoden sind ein wesentlicher Bestandteil der modernen Medizin und insbesondere der Diagnostik. Die in unserer Zeit verfügbaren Diagnosemethoden ermöglichen es, nicht nur die Tatsache des Vorhandenseins, sondern auch die Anzahl der Parasiten im Körper des Patienten rechtzeitig zu identifizieren.

Jetzt werden Patienten in der Regel nur noch einem Test unterzogen - dem Enzymimmunoassay.

Die Verwendung eines ELISA-Bluttests

Der enzymgebundene Immunosorbens-Assay ist eine hochspezialisierte Art der Analyse, die in einem Labor durchgeführt wird. Die Analyse basiert auf der Reaktion des Körpers, die üblicherweise als "Antigen-Antikörper" bezeichnet wird..

Eine auf diesem Indikator basierende Analysemethode ergibt eine Genauigkeit von 99%. Dies ist die genaueste derzeit bekannte Methode. In der Praxis gab es fast keine Fälle, in denen eine solche Analyse zu falschen Ergebnissen führte.

Mit dieser Methode können Sie Folgendes identifizieren:

  • eine signifikante Anzahl von Infektionskrankheiten, die durch Parasiten verursacht werden;
  • das Vorhandensein verschiedener Arten von Tumormarkern;
  • in der Reproduktionsmedizin - das Vorhandensein von Proteinen, Hormonen und Peptiden, die zur Beurteilung der Fruchtbarkeit des Patienten erforderlich sind;

Die Zuverlässigkeit der Testergebnisse hängt von mehreren Faktoren ab:

  • eine bestimmte Art von Parasiten;
  • die Anzahl der Parasiten im Körper;
  • Zuchtrate.

In welchen Fällen wird diese Art der Analyse verwendet??

Enzymgebundener Immunosorbens-Assay wird häufig bei der Diagnose einer Vielzahl von Krankheiten eingesetzt. Sein Hauptwert ist, dass Sie damit asymptomatische Krankheiten genau identifizieren können.

Wie Sie wissen, sind solche Krankheiten oft nur schwer frühzeitig zu erkennen und beginnen dementsprechend rechtzeitig mit der Behandlung.

Welche Krankheiten werden durch einen Enzymimmunoassay diagnostiziert:

  • onkologische Erkrankungen;
  • sexuell übertragbare Infektionen (HIV, Chlamydien, Syphilis, Ureaplasmose, Herpes und andere Krankheiten);
  • Tuberkulose, Masern, Toxoplasmose, Hepatitis und so weiter;
  • Schilddrüsenhormone;
  • Sexualhormone;
  • verschiedene Autoimmunerkrankungen;
  • allergische Reaktionen und Unverträglichkeiten gegenüber bestimmten Lebensmitteln.

Welche Faktoren basieren auf ELISA?

Dieses Verfahren hilft bei der Identifizierung von:

  • Infektion des Körpers mit Bakterien und Viren;
  • Proteinbase;
  • Helminthenbefall;
  • Fremdkörper.

Tatsächlich besteht das IFA-Verfahren aus zwei Teilen:

  1. Immunreaktion;
  2. enzymatische Reaktion.

Das Prinzip des "Antigen-Antikörpers" besteht im Wesentlichen darin, dass der Erreger der Krankheit oder ein Fremdkörper, dh das Antigen, zusammen mit der Infektionsquelle allmählich in den Körper gelangt. Dieser Prozess verursacht die sogenannte Immunantwort, die den Körper vor Fremdkörpern schützen soll..

Die Manifestationen eines solchen Schutzes hängen vom Antigen selbst und von den Symptomen der durch es verursachten Krankheit ab. Dieses Schema wurde "Antigen-Antikörper" genannt..

Zur Erhöhung der Zuverlässigkeit der Diagnose wird der gesamte enzymgebundene Immunosorbens-Assay nur in Labors und medizinischen Zentren durchgeführt. Verschiedene Antigene und Antikörper interagieren mit einer Blutprobe..

Um sowohl die Art als auch die Menge der Parasiten im Körper des Patienten zu identifizieren, wird Immunglobulin der Klassen "A" und "E" verwendet, das auf parasitären Befall reagiert.

Eine solche Analyse sollte Folgendes identifizieren:

Was ist eine Immunantwort und wie wird die Antigenerkennung bestimmt??

Die Immunantwort zeigt biologische Verbindungen in den Molekülen mikrobieller Zellen, deren Vorhandensein analysiert wird. Die Immunantwort als solche ist nur eine der Komponenten eines umfassenden ELISA-Programms, während die zweite Komponente eine enzymatische Reaktion ist.

Die Erkennung des Antigens erfolgt beim Kontakt einer Zelle des Immunsystems (Immunozyten) mit einer Fremdzelle. Die individuellen Eigenschaften von Antigenen dienen als Mittel zur Erkennung eines Freundes oder Feindes für das Immunsystem.

Was sind Antikörper??

In der Tat ist der Antikörper:

  • Es ist nur ein Molekül, das sich auf der Oberfläche eines Immunozyten befindet.
  • Dieses Molekül wird verwendet, um fremde Zellen zu erkennen..

Die Übertragung von Informationen über Antigen erfolgt auf zellulärer Ebene. Die Bindung wird zerstört, wenn die Zelle immun ist. Wenn nicht, löst der Körper eine natürliche Abwehrreaktion aus.

Die moderne Wissenschaft kennt 5 Klassen von Antikörpern, die auch als Immunglobuline oder Proteinstrukturen bezeichnet werden.

Lateinische Buchstaben werden verwendet, um Antikörper zu bezeichnen: A, D, E, G und M..

In den Analyseergebnissen sehen diese Notationen folgendermaßen aus:

Enzymgebundener Immunosorbens-Assay

Zunächst müssen spezielle Polystyroltabletten mit 96 Löchern hergestellt werden. Vor der Analyse werden die Wände jeder Zelle mit einem absorbierenden Antigen behandelt..

Serum wird in die behandelten Zellen getropft. Homologe Antikörper und Antigene reagieren miteinander und bilden starke Bindungen. Nicht gebundene Körper werden ausgewaschen. Dann werden Antikörper von Immunglobulinen zusammen mit auf besondere Weise markierten Enzymelementen in die Vertiefungen gegeben.

Die Reagenzien sind markiert, um die Identifizierung von Antikörpern im analysierten Serum zu erleichtern. Nach dem Waschen wird ein chromogenes Element zugesetzt, das die Reaktion beschleunigt und die Vertiefungen färbt. Die Farbintensität im Vergleich zum untersuchten Enzym zeigt den ungefähren Prozentsatz an Antigen in der Blutprobe.

Der Labortechniker verwendet dann optische Flüssigkeit, um:

  • die Konzentration von Antikörpern in den Vertiefungen messen;
  • Vergleichen Sie das Ergebnis mit einer Kontrollprobe, dh einem Standard.
  • Berechnen Sie die Konzentration von Antikörpern anhand einer speziellen Skala.

Zur Analyse von Helminthenbefall wird eine spezielle Version des Testsystems mit eigenen Normindikatoren und Abweichungen davon verwendet.

Analysevorbereitung

Die Serumprobenahme für den Enzymimmunoassay wird nur im Labor durchgeführt. Sie entnehmen einer Vene Blut und entfernen dort Elemente, die den Analyseprozess und die Genauigkeit der Ergebnisse beeinflussen können. Führen Sie morgens eine Analyse auf nüchternen Magen durch.

Dekodierung der Ergebnisse des Enzymimmunoassays

Die Qualität und Quantität der Antikörper zeigt das Vorhandensein von Fremdelementen im Körper des Patienten an, einschließlich Krankheitserregern. Dieselben Anzeichen deuten darauf hin, dass der Entzündungsprozess im Körper begonnen hat.

Beispiel für die Dekodierung von ELISA-Ergebnissen:

Stadium der KrankheitIgAIgMIgG
Primär (2 Wochen nach der Infektion)+- -- -
Primär (2,5-3 Wochen nach der Infektion)++- -
Primär (3-4 Wochen nach der Infektion)+++
Exazerbation der chronischen Phase (2 Wochen nach Beginn der Exazerbation)+- -+
Chronisch+/.-- -+
Vergangenheit (Infektion geheilt)- -- -+
WiederherstellungDer Titer nahm nach erfolgreicher Behandlung um das 2-4-fache ab- -Der Titer nahm nach 1-1,5 Monaten nach erfolgreicher Behandlung 4-8-mal ab
Negatives Ergebnis- -- -- -

Die mit dieser Methode durchgeführte quantitative Analyse allein ermöglicht es noch nicht, die Krankheit genau zu diagnostizieren, einen Behandlungsverlauf vorzuschreiben und die Dosierung von Arzneimitteln zu bestimmen.

Vor- und Nachteile der IFA

Alle Testmethoden, auch die fortschrittlichsten und hochpräzisesten, haben leider neben den Vorteilen auch ihre Nachteile..

Vorteile des Enzymimmunoassays:

  • Spezialisierung der Diagnosemethode;
  • Überempfindlichkeit gegen diese Methode;
  • Anwendung der neuesten Technologie.

Die Empfindlichkeit des diagnostischen Verfahrens ist eine hohe Wahrscheinlichkeit, das gewünschte zu erfassen, selbst wenn seine Konzentration im Testmaterial extrem niedrig ist.

Die Spezifität der Methode bedeutet:

    ein hohes Maß an Sicherheit, dh es besteht kein Risiko, ein falsches Ergebnis zu erhalten. Wenn das Ergebnis positiv ist, ist dem Patienten garantiert, dass es sich um die Art von Parasit handelt, an der er leidet.

  • Der Einfluss des "menschlichen Faktors" auf das Ergebnis, dh mögliche Fehler des Laborassistenten, wird auf Null reduziert, was ebenfalls zu einer erhöhten Genauigkeit beiträgt.
  • Mögliche Nachteile dieser Analysemethode:

    1. Es geht darum, die Art der Krankheit zu bestimmen, dh intuitiv zu „erraten“, dass in diesem Fall die richtige Diagnose unmöglich ist.
    2. Hohe Analysekosten.

    Vergleich von duodenalem und direktem Enzymimmunoassay

    Das ELISA-Verfahren nutzt direkt die Fähigkeit von Antikörpern, Antigen zu finden und Verbindungen mit Markierungen herzustellen. Diese Analysemethode gilt als industriell, die Wartezeit für das Ergebnis beträgt nicht mehr als eine Stunde.

    Nach der Fermentation erscheint ein spezielles Markierungssubstrat. Die Menge an Antikörpern entspricht dem Anteil an Antigenen im untersuchten Biomaterial.

    Es gibt auch eine duodenale (ansonsten indirekte) Methode zum Testen auf parasitären Befall, die trotz der hohen Genauigkeit des ELISA weit verbreitet ist.

    Der duodenale (indirekte) enzymgebundene Immunosorbens-Assay wird in zwei Stufen durchgeführt:

    1. Zunächst werden markierte Antikörper mit den gewünschten Antigenen verglichen;
    2. Markierte Antikörper werden auf unmarkierte Antikörper angewendet, die im vorherigen Schritt nachgewiesen wurden..

    Somit wird eine doppelte Kontrolle von Antigenen und Antikörpern erreicht, was die Zuverlässigkeit der Analyse erhöht..

    Beim indirekten ELISA im Labor wird das Antigen an der Oberfläche des Lochs fixiert und bildet Bindungen mit dem nicht markierten Teil der Antikörper.

    Vorteile der Zwölffingerdarmmethode:

    • Doppelte Kontrolle des untersuchten Biomaterials, wodurch die Genauigkeit erheblich erhöht wird;
    • Erhöhte Genauigkeit und Spezifität der Analysemethode selbst.

    Diese Methode nimmt jedoch viel Zeit in Anspruch und erfordert eine Reihe zusätzlicher Aktionen. Die Genauigkeit der Studie ist jedoch so hoch, dass sie diesen Nachteil rechtfertigt. Aus diesem Grund empfehlen die meisten Ärzte die duodenale Analysemethode..

    Wohin, wie lange warten und wie viel bezahlen??

    Wenn Sie über alle erforderlichen Werkzeuge und Verbrauchsmaterialien verfügen, können Sie das Ergebnis 2 Tage nach Lieferung erhalten. Wenn das Labor über einen Express-Analysedienst verfügt, kann eine Probe in nur 3-5 Stunden verarbeitet werden.

    Wohin kann ich die IFA bringen:

    • im Zustand Poliklinik;
    • in Privatkliniken.

    Die Preise für Enzymimmunoassays hängen direkt vom Preisniveau in einer bestimmten Klinik ab. Im Durchschnitt beträgt der Preis mindestens 4000 Rubel.

    Die als Ergebnis dieser Studie erhaltenen Informationen können einen nützlichen Beitrag für die medizinische Wissenschaft darstellen. Der Patient sollte sich jedoch daran erinnern, dass es angesichts der hohen Kosten eines Enzymimmunoassays klüger wäre, dieses Verfahren einer zuverlässigen, bewährten Klinik anzuvertrauen.

    Leider sind staatliche medizinische Einrichtungen nicht immer mit den neuesten wissenschaftlichen Erkenntnissen ausgestattet. Möglicherweise sind keine Geräte für die qualitativ hochwertige Sammlung von Biomaterial und dessen Verarbeitung in einer Bezirksklinik erforderlich.

    Was ist also nützlich für den Patientenenzym-Immunoassay:

    • ermöglicht es Ihnen, eine helminthische Invasion frühzeitig zu erkennen;
    • Infolgedessen können Sie die Behandlung rechtzeitig beginnen.
    • Die Stabilität der Methoden ermöglicht eine gleichmäßige Analyse bei Kindern und Erwachsenen.

    Ein Enzymimmunoassay zeigt nicht nur einen qualitativen, sondern auch einen quantitativen Faktor, dh er zeigt nicht nur das Vorhandensein von Helminthen im Körper des Patienten an, sondern ermöglicht auch die Schätzung ihrer Anzahl.

    Enzymimmunoassay mit Aufschlüsselung der Indikatoren

    Immun- und enzymatische Reaktionen

    Wie der Name schon sagt, umfasst ein IFA-Bluttest mehrere Komponenten, nämlich eine Immun- und eine enzymatische Reaktion.
    Eine Immunreaktion ermöglicht es Ihnen, zelluläre Elemente und Krankheitserreger miteinander zu verbinden, während eine enzymatische Reaktion es Ihnen ermöglicht, das Ergebnis einer früheren Reaktion zu visualisieren und zu bewerten.

    Betrachten Sie jede Reaktion genauer..

    Was sind Immunantworten??

    Immun sind spezifische Reaktionen, mit denen Sie ein Antigen an einen Antikörper binden und einen Immunkomplex bilden können. Was bedeutet das? Zunächst muss verstanden werden, dass jede Zelloberfläche Moleküle enthält, die Daten über die Zelle enthalten, Antigene genannt und unterteilt in:

    Einzelne Antigene weisen trotz einiger Ähnlichkeiten viele Unterschiede auf. Sie sind in einem bestimmten Organismus vorhanden und werden in anderen niemals wiederholt. Speziesantigene können in den Organismen verschiedener Arten von Lebewesen gefunden werden. So haben zum Beispiel Affen, Pferde oder Hunde ihre eigenen, anders als alles Antigen. Deshalb werden Antigene dieses Typs vom Immunsystem verwendet, um ihre eigenen und fremden Zellen zu erkennen, was in der Tat die Grundlage des Enzymimmunoassays ist.

    Wie werden Antigene erkannt? Hier ist alles klar genug. In einfachen Worten, eine Immunzelle fängt eine Zelle, die sie „verdächtigt“ hat, und vergleicht ihr Antigen mit der Beschreibung. Wenn das Antigen der zweifelhaften Zelle ihm entspricht, "setzt" die Immunzelle es frei und fährt fort. Wenn die Beschreibung anders ist, ist die Reaktion des Organismus auf die Bedrohung eine - Zerstörung. Darüber hinaus beträgt die Anerkennung des "Feindes" in diesem Fall fast 100%.

    Sandwich-Immunoassay Immunoassay

    Feige. 2. Schematische Darstellung des Immunoassay- "Sandwich" -Typs. ATP ist ein Antikörper eines Substrats, ATd ist ein Nachweisantikörper, AH ist ein Antigen, M ist eine Markierung, die kovalent an einen Nachweisantikörper gebunden ist, P ist ein Substrat, auf dem der Antikörper des Substrats adsorbiert ist.

    In dieser Variante des Immunoassays (Fig. 2) wird ein Paar von Antikörpern verwendet, die für räumlich entfernte Epitope des untersuchten Antigens spezifisch sind.

    I. Sorption von Substratantikörpern

    In den Vertiefungen einer Immunoassay-Platte mit 96 Vertiefungen werden Substratantikörper von 1 bis 2 & mgr; g pro Vertiefung in 100 & mgr; l phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) sorbiert. Die Inkubation wird 30 Minuten bei Raumtemperatur durchgeführt und auf einem horizontalen Tablettenschüttler geschüttelt. Das Waschen (2-fach) von ungebundenen Antigenmolekülen wird mit phosphatgepufferter Salzlösung durchgeführt, die 0,1% Tween-20 (PBST) enthält..

    II. Sperren

    Um unspezifische Bindungsstellen zu blockieren, werden Plattenvertiefungen mit PBST gefüllt und 10-15 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert.

    III. Antigen-Inkubation

    50 & mgr; l der Testlösung oder Standardverdünnungen des Antigens werden in die Vertiefungen der voradsorbierten Antikörperplatte gegeben. Antigenverdünnungen sollten auf der Basis von PBST hergestellt werden, da Tween-20 die unspezifische Bindung von Proteinmolekülen aneinander und an die Oberfläche der Tablette verringert. Sowohl die Testlösung als auch die Standardverdünnungen des Antigens werden paarweise (oder 3 Wiederholungen) eingeführt, wobei zwei (drei) Vertiefungen für jede Proteinverdünnung verwendet werden. Die Inkubation wird 30 Minuten bei Raumtemperatur unter konstantem Rühren durchgeführt. Das Waschen wird dreimal mit PBST-Lösung durchgeführt.

    IV. Enzymmarkierte Antikörperinkubation

    100 & mgr; l einer Lösung spezifischer Antikörper, die mit einer Enzymmarkierung konjugiert sind, werden in die Vertiefungen der Platte gegeben. Die optimale Konzentration an konjugierten Antikörpern wird normalerweise vom Hersteller angegeben (normalerweise eine Konzentration von 2-4 μg / ml verwenden). Die Inkubation mit Antikörpern, die die Enzymmarkierung enthalten, wird 30 Minuten bei Raumtemperatur durchgeführt und auf einem horizontalen Plattenschüttler geschüttelt. Das Waschen wird 5-6 mal mit PBST durchgeführt.

    V. Durchführung einer enzymatischen Reaktion, begleitet vom Auftreten eines gefärbten Produkts

    100 & mgr; l Substratlösung werden in die Vertiefungen gegeben und 10 Minuten bei Raumtemperatur unter konstantem Rühren inkubiert..

    VI. Stoppen der enzymatischen Reaktion

    Vor der Messung der optischen Dichte wird eine Farbreaktion mit 0,5 M H gestoppt2SO4. Nach der Inkubation werden 50 & mgr; l einer Lösung von 0,5 M Schwefelsäure mit einer Arbeitslösung von RPD in die Vertiefungen gegeben. Danach können Sie sofort mit der Messung der optischen Dichte beginnen.

    VII. Absorptionsmessung

    Die optische Dichte der Lösung des gefärbten Produkts wird bei λ = 490 nm unter Verwendung eines Tablettenspektrophotometers gemessen.

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    Mehr zu Immunglobulinen

    Insgesamt produziert der menschliche Körper 5 bekannte Klassen von Antikörpern, die als Ig (was für Immunglobuline steht) bezeichnet werden und zu den Klassen A, M, G, E und D gehören. Alle von ihnen sind für die Interpretation der Ergebnisse des ELISA von großer Bedeutung. Natürlich gibt es viel mehr Komplexe, und nicht alle sind noch offen. Bei der Diagnose verschiedener Krankheiten sind jedoch die ersten drei Arten von Antikörpern am wertvollsten. Ein ELISA-Bluttest verwendet ein Maximum an Informationen: den Zeitpunkt des Auftretens von Antikörpern im Blut, die Änderung ihrer Konzentration in Abhängigkeit von der Zeit, die Dauer des Verschwindens sowie die Art des spezifischen Antikörpers.

    Teilnehmer am primären, akuten Infektionsprozess sind Immunglobuline der Klasse M, die immer auf eine akute Phase hinweisen, selbst wenn die Krankheit klinisch beseitigt ist. Ein typisches Beispiel ist die anikterische Form der akuten Virushepatitis B oder C. Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay für Hepatitis zeigt, dass eine Person an akuter Hepatitis leidet und Symptome wie Hypochondrien, Mundtrockenheit, Gelenkschmerzen und andere unspezifische Symptome leicht zu verstehen sind.

    Nach einigen Wochen werden diese Antikörper in einer zunehmend verschwindenden Konzentration gefunden, was zu Immunglobulinen der Klasse G führt. Sie werden monatelang oder sogar jahrelang im Blut nachgewiesen und weisen auf eine Erholung hin und können dann lebenslang verbleiben und eine starke Immunität bilden. Dies weist auf eine starke Abwehr gegen Pathogenantigene hin. Es sind also die Antikörper dieser Klasse, die eine Person gegen wiederholte Fälle von Anthrax und Pest immun machen. Es gibt jedoch Zeiten, in denen diese Antikörper die schädlichen Wirkungen von Antigenen nicht beeinträchtigen. In diesem Fall können wir über die Steigerung der Aktivität des chronischen Prozesses sprechen.

    IgE hat Anwendungen bei der Diagnose verschiedener parasitärer Infektionen und allergischer Zustände, und IgD erfüllt eine Hilfsfunktion: Mit dem enzymgebundenen Immunosorbens-Assay können Sie es für die umfassende Diagnose von Asthma bronchiale und Autoimmunerkrankungen verwenden. Natürlich ist die Entschlüsselung der ELISA-Analyse viel komplizierter, und Immunologen können viel mehr sagen. Was sind die Anzeichen dafür, dass der Patient unabhängig ins Labor gehen kann, um Studien durchzuführen??

    Wie werden ELISA-Analysen durchgeführt?

    Unter den Bedingungen ausgestatteter Labors und medizinischer Zentren kann die treponemale Bestimmung durch den Enzymimmunoassay mit verschiedenen Methoden durchgeführt werden, die als direkt und indirekt bezeichnet werden. Die Grundlage dieser Reaktionen ist jedoch eine Möglichkeit, mit der Sie mittels ELISA auf Syphilis analysieren können. Dieser Test wird auf eine bestimmte Weise durchgeführt..

    Der Arzt des Laborarztes hat eine spezielle Tablette - eine Platte mit Löchern in Form von runden Hohlräumen in Höhe von bis zu hundert. Konzentrierte Syphilis-Antigene werden auch speziell in den Assay-Kits hergestellt, die in den Vertiefungen der ELISA-Platte platziert werden. Nach der morgendlichen Blutentnahme des Patienten auf nüchternen Magen wird das Serum vom Blut getrennt und in Vertiefungen mit Antigenen gegeben. Antigen-Antikörper-Bindungsreaktion tritt in Vertiefungen auf.

    Der ELISA für Syphilis basiert auf der Reaktion der Bindung der Immunverbindungen und Konjugate der ersten Stufe mit einer speziellen Enzymmarkierung, die zum Ablesen der Reaktionsqualität erforderlich ist. In diesem Stadium werden zusätzlich zur enzymatischen Peroxidase chromogene Farbstoffe eingeführt, um das Material abhängig vom Ergebnis der Reaktion zu färben.

    Basierend auf den erscheinenden farbigen Löchern in der Tablette wird der Test entschlüsselt. In Sätzen verschiedener ELISA-Methoden sind Tabellen mit Farbschemata beigefügt, die die Menge, den Gehalt an Immunglobulinen und Antikörpern aus dem Patientenserum in 1 Volumeneinheit bestimmen.

    Zur Beurteilung des Reaktionsergebnisses wird eine spezielle Ausrüstung verwendet - ein Spektrophotometer zur Photometrie und Bewertung der Dichte des Materials in den Vertiefungen im Vergleich zu Kontrollproben. Basierend auf der Dichte wird ein Ergebnis erhalten, das für jeden Erreger der Syphilis innerhalb der Grenzen von Normen und Pathologie eindeutig festgelegt ist.

    allgemeine Informationen

    Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay kann verwendet werden, um den Gehalt an Hormonen, Immunglobulinen, immunologischen Komplexen sowie einer Reihe von biologisch aktiven Substanzen zu bestimmen. Als Material für eine solche Studie können Sie Blut, Liquor cerebrospinalis, den Inhalt des Glaskörpers usw. spenden..

    Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay wurde in letzter Zeit aufgrund einer Reihe von Vorteilen zunehmend verwendet:

    • Empfindlichkeit über 90 Prozent;
    • stabile Lagerung der zum Halten benötigten Zutaten;
    • schnelle und einfache Diagnose;
    • Mindestkosten für Materialien;
    • automatisierter Prozess;
    • kostengünstig.

    Darüber hinaus können Sie mit einem ELISA Infektionen, einschließlich Hepatitis, frühzeitig erkennen. Aus diesem Grund wird es manchmal anstelle von PCR-Studien sowie während der Schwangerschaft empfohlen. Es kommt jedoch nicht ohne Nachteile aus. Die Ergebnisse solcher Tests sprechen nur über die Reaktion des Körpers auf den Erreger, werden jedoch nicht bestimmt. In den meisten Fällen wird eine Kombination aus ELISA und PCR empfohlen..

    Mithilfe von IFA-Tests können Sie die Ergebnisse eines ganzen Satzes ermitteln. Insbesondere werden die Norm der Schilddrüsenhormone, das Vorhandensein von Tumormarkern und eine Reihe von Infektionen bestimmt. Die Norm wird für jeden Indikator separat ausgewählt. Daher sollte der ELISA für Erwachsene normalerweise TG-Werte innerhalb von 70 IE / ml zeigen, T4 im Bereich von 64 bis 146 nmol / l, T3 wird in einer Menge von 1,8 bis 2,8 nmol / l berechnet.

    Bei der Planung einer Schwangerschaft können solche Tests durchgeführt werden, um Sexualhormone zu bestimmen. Insbesondere Luteinisieren. Die Werte variieren je nach Tag des Zyklus. Insbesondere kann ein Maximalwert von 150 und ein Minimum von 1 mU / l beobachtet werden.

    Wenn zur Bestimmung des Sexualhormons bei Männern ein ELISA verwendet wird, ist ein Wert im Bereich von 0,5 bis 10 mU / l ein normaler Indikator. Wenn chronisches Gonadotropin untersucht wird, variieren die Ergebnisse je nach Geschlecht. Insbesondere für erwachsene Männer und Frauen ohne Schwangerschaft sollte der Indikator innerhalb von 5 mU / ml liegen. Wenn Tests während der Schwangerschaft durchgeführt werden, können die Ergebnisse je nach Trimester bis zu Zehntausenden von Einheiten unterschiedlich sein.

    Was ist Chlamydien?

    PCR wird wie ELISA in modernen Labors häufig zur Diagnose sexuell übertragbarer Krankheiten eingesetzt. Gleichzeitig schlagen Ärzte häufig vor, beide Tests durchzuführen. Viele Patienten glauben, dass dies ein zusätzlicher Gewinn ist, aber diese Tests haben einen gravierenden Unterschied, obwohl sie auf den ersten Blick identisch erscheinen mögen. Eine Klassifizierung psychologischer Forschungsmethoden kann jedoch in gewissem Umfang angewendet werden.

    Die Ergebnisse von PCR und ELISA werden häufig während der Schwangerschaft verwendet, wenn eine Chlamydieninfektion ausgeschlossen werden muss. Oft ist ein so positives Ergebnis für die Infektion eine Antwort auf die Frage von Männern und Frauen: "Warum kann ich nicht schwanger werden?". Zusätzlich zum Risiko einer Unfruchtbarkeit birgt Chlamydien während der Schwangerschaft ein Infektionsrisiko für das Baby.

    Das Hauptproblem bei der Diagnose einer solchen Infektion ist der asymptomatische Verlauf. Spezifische Antikörper können jedoch zehn Tage nach der Infektion nachgewiesen werden. Wenn ein PCR-Test während der Schwangerschaft das Vorhandensein oder Fehlen solcher Krankheitserreger nachweist, zeigt Ihnen der ELISA, in welchem ​​Stadium sich der Prozess jetzt befindet

    Eine solche Studie ist auch wichtig, um die Therapieergebnisse zu bewerten.

    Decodierungsanalyse

    Eine Analyse der Hepatitis oder eines anderen Pathogens bei der ELISA-Leistung wirft häufig Fragen auf. Insbesondere, wie die Entschlüsselung durchgeführt wird. Im Moment zeigen die Ergebnisse eines von fünf Immunglobulinen: IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. Sie sind es, die auffallen, da die Rolle der anderen nicht bis zum Ende geklärt wurde. Die wichtigsten für die Studie sind die Klassen A, M und G..

    Immunglobulin A ist hauptsächlich für die Schutzfunktionen der Schleimhäute verantwortlich. Das Ergebnis ihres Vorhandenseins ist negativ, wenn die Krankheit zu Beginn in ihrer akuten Form identifiziert wird. Das Auftreten solcher Schutzmarker tritt gewöhnlich zwei Wochen nach dem Ausbruch der Krankheit auf. Manchmal wird sogar später ein positives Ergebnis erzielt.

    Die Hauptfunktion dieser Antikörper ist der Nachweis und die Zerstörung von Mikroorganismen. Ihre Zahl wird immer verringert, wenn die Krankheit abklingt. Normalerweise fehlt acht Wochen nach Ausbruch der Krankheit wieder ein positives Ergebnis. Der Nachweis von Immunglobulinen der Klasse A zu einem späteren Zeitpunkt kann auf einen Prozess hinweisen, der in eine chronische Erkrankung übergeht.

    Die Hauptmarker, deren Dekodierung zur Bestimmung der akuten Phase der Pathologie beiträgt, sind Immunglobuline der Klasse M. Sie können sie fünf Tage nach der Infektion im Blut nachweisen. Sie sind etwa sechs Wochen im Blut verzögert, danach tritt ihr Verschwinden schnell auf.

    Immunglobuline der Klasse G sind für die Bildung eines verbleibenden Immuneffekts verantwortlich. Ungefähr einen Monat nach der Infektion beginnen sie, im Blut nachgewiesen zu werden. In Zukunft wird ihre Definition über viele Monate ausgedehnt. Oft kann man sie dein ganzes Leben lang beobachten. Solche Immunglobuline werden als Schutzreaktion gebildet, die eine erneute Infektion verhindert. Beispielsweise werden solche Immunglobuline im Blut einer Person gebildet, die im Kindesalter Windpocken hatte und dementsprechend bis zum Lebensende Immunität erhielt. Natürlich gibt es auch andere Infektionen, deren Rückkehr möglich ist. In diesem Fall wird durch die Analyse ein erneutes Wachstum dieser Gruppe von Immunglobulinen festgestellt.

    Immunglobuline E werden zum Nachweis von Parasiten im Körper verwendet. Das zur Gruppe D gehörende Immunglobulin befindet sich in B-Lymphozyten und ist bei gesunden Menschen in einigen Mengen vorhanden. Mit etwa zehn Jahren erreichen sie ihre Maximalwerte. Die Menge dieses Immunglobulins steigt während der Schwangerschaft an. Darüber hinaus kann das Vorhandensein in einer größeren Menge als üblich ein Zeichen für Asthma bronchiale sein, einen Immundefizienzzustand.

    Entschlüsselung

    Antikörper, sie sind auch Immunglobuline, werden in fünf Klassen unterteilt, von denen jedoch normalerweise nur drei bestimmt werden: M, G und A, die sich zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Infektion im Körper ansammeln.

    Immunglobuline M erscheinen zuerst, sie sind IgM. Sie entstehen 4-5 Tage nach der Infektion und sind anderthalb Monate im Blut, danach verschwinden sie. Wenn der ELISA ihre Anwesenheit zeigt, haben wir es mit einer akuten Periode der Krankheit oder ihrer Verschlimmerung zu tun.

    In drei bis vier Wochen tritt IgG, dh Immunglobuline der Klasse G, auf. Sie können mehrere Monate oder sogar Jahre hintereinander vorhanden sein. Wenn der ELISA zweimal im Abstand von zwei Wochen durchgeführt wurde und die Menge an IgG in beiden Proben erhöht war, können wir über eine Infektion oder eine erneute Infektion damit sprechen.

    IgA, dh Antikörper der Klasse A, werden nach einer Verschlimmerung der Infektion oder einen Monat nach ihrem Auftreten im Körper nachgewiesen. Die meisten von ihnen zirkulieren in unseren Schleimhäuten und nur ein Fünftel im Blut. Sie verschwinden erst, nachdem alle Infektionserreger zerstört wurden, dh mindestens zwei Wochen nach der Infektion maximal acht.

    Wenn die Analyse des ELISA nach der Heilung das Vorhandensein zeigt, ist die Krankheit in das chronische Stadium übergegangen.

    Bei der Entschlüsselung müssen Sie auch die Zeichen + und - im Formular beachten. Nur ein Arzt kann ein vollständiges Urteil fällen, aber einige Merkmale des Körpers können anhand der folgenden Daten beurteilt werden:

    Nur ein Arzt kann ein vollständiges Urteil fällen, aber einige Merkmale des Körpers können anhand der folgenden Daten beurteilt werden:

    • Ein Mangel an Immunität gegen Infektionen wird durch eine Kombination von Indikatoren wie JgM, JgG, JgA mit einem Minus überall angezeigt;
    • Das Vorhandensein einer Immunität nach einem Impfstoff oder einer Infektion wird durch JgM und JgA mit einem Minuszeichen und JgG mit einem Pluszeichen (JgG (+)) angezeigt;
    • Die folgenden Indikatoren können auf das Vorhandensein einer akuten Infektion hinweisen: JgA (- / +), JgG (- / +) und JgM (+);
    • Im Falle einer Verschlimmerung chronischer Infektionen enthält das Formular die folgende Notation: JgM, JgG und JgA mit Pluspunkten überall;
    • Bei chronischen Infektionen wird das folgende Bild beobachtet: JgG (+/-), JgM (-) und JgA (+/-);
    • JgM (-) zeigt die Wiederherstellung an.

    Oft wird auch eine Studie wie ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay von Blutserum durchgeführt. Es wird für das Studium der Schilddrüsenhormone benötigt. Die Indikatoren für Hormone wie Thyroxin, freies Thyroxin, Triiodthyronin, freies Triiodthyronin und Thyreoglobulin sind hier wichtig.

    Darüber hinaus ist eine solche Studie zur Diagnose von Infektions- und Autoimmunerkrankungen nützlich..

    ELISA-Bluttest

    Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay (ELISA) wird durchgeführt, um die Schutzfunktionen des Körpers umfassend zu bewerten. Während der Studie werden Anzahl und Eigenschaften der Immunzellen sowie das Vorhandensein der notwendigen Antikörper bestimmt. Ein ELISA-Bluttest wird durchgeführt, um infektiöse, hämatologische, Autoimmunerkrankungen sowie primäre und sekundäre Immundefekte zu diagnostizieren. Überlegen Sie, was eine Blutuntersuchung mittels ELISA ist und welche Indikationen für diese Studie vorliegen.

    Was ist das

    Ein ELISA ist eine Labormethode, mit der Antikörper oder Antigene in einer Blutprobe bestimmt werden. Diese Studie wird verwendet, um den Gehalt an Immunglobulinen, immunologischen Komplexen und Hormonen nachzuweisen..

    Indikationen zur Analyse

    Für die Ernennung eines ELISA-Bluttests liegen folgende Indikationen vor:

    • Diagnose sexuell übertragbarer Infektionen - Ureaplasma, Mycoplasma, Chlamydien, Trichomonas, Syphilis;
    • Diagnose von Viruserkrankungen - Cytomegalievirus, Herpes, Hepatitis, Epstein-Barr-Virus;
    • Bestimmung des Hormonspiegels;
    • Diagnose von Krebs;
    • Bestimmung des Immundefekts;
    • Diagnose von Allergien;
    • präoperative umfassende Untersuchung vor Organtransplantation;
    • Einschätzung der Wirksamkeit der Therapie.

    Methodenprinzip

    Das Prinzip der Enzymimmunoassay-Methode basiert auf der Bestimmung spezifischer Antikörperproteine ​​in den Blut-Immunglobulinen. Immunglobuline werden vom menschlichen Immunsystem produziert, wenn Antigene (fremde Mikroorganismen) in den Körper gelangen. Solche Immunmoleküle binden an viele infektiöse Krankheitserreger im Körper und neutralisieren sie..

    Immunglobuline haben eine wichtige charakteristische Spezifität. Aufgrund dessen können sie an ein bestimmtes Antigen binden und einen Antigen-Antikörper-Komplex bilden. Während des ELISA einer Blutuntersuchung wird dieser Komplex qualitativ und quantitativ bestimmt.

    Es gibt fünf Klassen von Immunglobulinen. In der Regel werden jedoch drei Klassen definiert - Immunglobuline A, M, G. Diese Antikörper reichern sich zu unterschiedlichen Zeitpunkten ab dem Zeitpunkt der Infektion im Körper an..

    • Immunglobuline der Klasse M (IgM) treten am fünften Tag nach dem Zeitpunkt der Infektion zum ersten Mal im Blut auf. Sie sind 5-6 Wochen im Körper und verschwinden dann aus dem Blutkreislauf. IgM-Antikörper zeigen eine akute Periode der Krankheit oder eine Verschlimmerung der Krankheit in ihrem chronischen Verlauf an.
    • Ungefähr 3-4 Wochen nach der Infektion erscheinen Immunglobuline der Klasse G (IgG) im Blut. Sie können mehrere Monate oder sogar Jahre im Blut einer Person existieren. Nach der Interpretation des ELISA eines Bluttests sprechen zwei nach zwei Wochen nacheinander entnommene Blutproben, die die Anzahl der IgG-Immunglobuline erhöht haben, von einer aktuellen Infektion oder Reinfektion - einer erneuten Infektion mit derselben Infektion.
    • Immunglobuline der Klasse A (IgA) können mit dieser Testmethode 2–4 Wochen nach Infektion oder Verschlimmerung einer Infektionskrankheit nachgewiesen werden. Von diesen zirkulieren nur 20% im Blut, der Rest befindet sich im Geheimnis der Schleimhäute. IgA-Antikörper verschwinden 2–8 Wochen nach der Zerstörung der Infektionserreger aus dem Blutkreislauf. Das Verschwinden dieser Immunglobuline bedeutet eine Heilung der Infektion. Wenn das Vorhandensein von IgA-Antikörpern im Blut nach dem Ende der Krankheit festgestellt wird, ist die Krankheit in das chronische Stadium übergegangen.

    Analysevorbereitung

    Für die Analyse von Blut mittels ELISA wird am häufigsten menschliches Blut verwendet. Sie können aber auch den Inhalt des Glaskörpers, der Cerebrospinalflüssigkeit und des Fruchtwassers untersuchen.

    Dem Patienten wird eine Blutprobe zur Untersuchung aus der Kubitalvene entnommen. Es wird empfohlen, Blut auf leeren Magen zu spenden (ab dem Moment der letzten Mahlzeit sollten mindestens 12 Stunden vergehen). Es ist notwendig, den Arzt zu informieren, wenn der Patient Medikamente einnimmt, da einige von ihnen das Ergebnis der Analyse ändern können. Die Zuverlässigkeit der Ergebnisse der Studie wird durch den Konsum von Alkohol und Drogen beeinträchtigt..

    Entschlüsselung

    Die Ergebnisform dieser Analyse zeigt das positive (+) oder negative (-) Ergebnis der Bestimmung jeder Klasse von Immunglobulinen an.

    Betrachten Sie die Interpretation einer möglichen Dekodierung eines ELISA-Bluttests.

    • Negatives Ergebnis von IgM, IgG, IgA - mangelnde Immunität gegen Infektionen.
    • Negativ IgM, IgA und IgG positiv - Immunität nach Infektion oder Impfung.
    • Negative oder positive IgG-, IgA- und IgM-positive - akute Infektion.
    • Ein positives Ergebnis von IgM, IgG, IgA - Verschlimmerung einer chronischen Infektionskrankheit.
    • Negatives IgM-Ergebnis und negatives oder positives IgG, IgA-Ergebnis - chronische Infektion.
    • Negatives IgM-Ergebnis und nicht bestimmtes IgG, IgA - Erholung.

    Methodenvorteile

    Ein ELISA-Bluttest hat viele Vorteile. Die wichtigsten können unterschieden werden:

    • relativ hohe Genauigkeit (Empfindlichkeit);
    • die Möglichkeit einer frühzeitigen Diagnose;
    • die Fähigkeit, die Dynamik des Infektionsprozesses zu verfolgen;
    • hoher Vereinigungsgrad, der ein Massenscreening ermöglicht;
    • eine kurze Zeitspanne, die erforderlich ist, um ein Analyseergebnis zu erhalten;
    • Bequemlichkeit bei der Arbeit;
    • Automatisierung aller Analysephasen;
    • relativ niedrige Kosten.

    Nachteile

    Der Nachteil der ELISA-Methode besteht darin, dass sie manchmal falsch negative oder falsch positive Ergebnisse liefert. Neben technischen Fehlern während der Studie kann der Rheumafaktor des Patienten, das Vorhandensein chronischer Krankheiten (bei denen Antikörper produziert werden), Stoffwechselstörungen und die Verwendung bestimmter Medikamente die Ursache für falsche Ergebnisse sein.

    ELISA-Bluttest auf Parasiten

    Mit dieser Methode bestimmen Blutuntersuchungen das Vorhandensein der folgenden parasitären Prozesse im Körper:

    • Ascariasis;
    • Trichinose - die Analyse wird mehrmals durchgeführt, der maximale Antikörperspiegel wird 4-12 Wochen nach der Infektion bestimmt;
    • Zystizerkose;
    • Teniose;
    • Faszioliasis - Antikörper werden im akuten Stadium der Krankheit bestimmt;
    • Opisthorchiasis - Differenzialdiagnose zwischen der chronischen und der akuten Form der Krankheit durchführen;
    • Giardiasis;
    • viszerale und kutane Leishmaniose;
    • Amöbiasis;
    • Toxoplasmose.

    Ein ELISA-Bluttest auf Parasiten wird verwendet, um Antigene (Parasiten und ihre Stoffwechselprodukte) und Antikörper (Immunglobuline) nachzuweisen. Immunglobuline werden im Körper als Antikörper gegen Antigene produziert. Die Spezifität dieser Methode bei der Bestimmung von Parasiten beträgt 90%. Mit dieser Analyse können Sie die Art der Parasiten, ihre Anzahl und aufgrund der Menge an Antikörpern bestimmen, um die Dynamik der Prozesse zu verfolgen.

    Literatur Zu Dem Herzrhythmus

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