Was ist ein Enzymimmunoassay??

Mit dem Fortschritt der modernen Medizin ist es möglich, bei Verdacht auf bestimmte Pathologien des Patienten eine eingehendere Diagnose durchzuführen. Eine der informativen Methoden der Laborforschung war der ELISA, der nach der Methode der venösen Blutentnahme durchgeführt wird. Das heißt, für den Patienten ändert sich insgesamt nichts. Der ELISA-Analysator führt jedoch eine ausgeklügelte Technik zur Untersuchung des gesammelten Biomaterials durch. In den IFA-Analysen und den Feinheiten der Verwendung der ELISA-Methode als Diagnose verstehen wir das folgende Material.

Was ist ein Enzymimmunoassay??

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay ist eine der Methoden der Labordiagnose, die ausschließlich auf einer Reaktion basiert, die als "Antigen-Antikörper" bezeichnet wird. Es ist sinnvoll zu verstehen, dass ein Antigen eine fremde Proteinverbindung (Molekül) ist, die mit einer parasitären, viralen oder anderen Infektion in den menschlichen Körper gelangt ist. Das heißt, einfach ein Schädling. Ein Antikörper ist wiederum eine Immunzelle (Immunglobulin), die den menschlichen Körper verteidigt, wenn darin Fremdmoleküle nachgewiesen werden.

Antikörper selbst werden durch die Antigene selbst provoziert, die in den menschlichen Körper eingedrungen sind. Wenn Antikörper in den „Kampf“ um die Gesundheit des Körpers eintreten, scheinen sie sich selbst als Antigene zu kennzeichnen, was ein Labortechniker bei Blutuntersuchungen sieht. Das heißt, in dem gesammelten Biomaterial ist es möglich, nicht nur das Vorhandensein einer Infektion zu verfolgen, sondern auch deren Spuren, nachdem sich der Körper vollständig erholt hat.

Bei der Durchführung eines ELISA kann der Laborassistent die folgenden Immunglobuline für Antigene sehen:

  • Immunglobuline M (erscheinen in den Ergebnissen als IgM). Sie bezeugen, dass der Infektionsprozess im Körper nur an Stärke gewinnt. Das heißt, eine Infektion ist kürzlich aufgetreten;
  • Immunglobuline G (erscheinen als IgG). Sie tragen wenige Tage nach Einführung der Infektion in den menschlichen Körper zur Zerstörung von Antigenen bei. Immunglobuline G können sich lange genug im Körper des Patienten befinden und Immunität gegen ein bestimmtes Virus bilden.
  • Immunglobuline E (erscheinen als IgE). Zeigen Sie parasitäre Infektionen im Körper an. Er spricht auch von atopischen Reaktionen bei Allergien. Es ist wichtig zu wissen, dass die Analyse des ELISA ein Ergebnis mit einer Genauigkeit von 90% für parasitäre Infektionen ergibt.
  • Immunglobuline A (erscheinen als IgA). Schützen Sie die Schleimhäute des Patienten.

Durch Verschreiben eines enzymgebundenen Immunosorbens-Assays für einen Patienten kann der behandelnde Arzt die Dauer der Infektion, den Grad seines Fortschreitens oder das Vorhandensein einer Immunität gegen eine bestimmte Infektion nachverfolgen.

Der ELISA-Diagnoseprozess sieht folgendermaßen aus:

  • Das gesammelte venöse Blut wird im Labor in den Zustand des Blutserums gebracht;
  • Anschließend verwendet der Laborassistent eine spezielle Schale mit Zellen, von denen jede bereits alle erforderlichen Antigene enthält. Es reicht aus, einfach Blutserum in jede Zelle zu tropfen und die Reaktion von Immunglobulinen (Antikörpern) auf Antigene zu verfolgen. Das Vorhandensein der "gewünschten" Reaktion wird durch eine Änderung der Farbe des Testmaterials belegt. Anschließend untersucht der Laborassistent die optische Dichte des Testmediums.

Im Allgemeinen hilft ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay für Parasiten, solche parasitären Pathologien zu identifizieren:

  • Askaridose und Enterobiasis (Spulwürmer und Madenwürmer);
  • Trichinose;
  • Opisthorchiasis in akuten und chronischen Formen;
  • Giardiasis;
  • Amöbiasis;
  • Toxoplasmose;
  • Leishmaniose in jeglicher Form.

Wichtig: Der Enzymimmunoassay ist sowohl qualitativ als auch quantitativ. Im ersten Fall bestätigt oder widerlegt der Laborassistent nur das Vorhandensein der gewünschten Substanz im Blut. Im zweiten Fall zeigt die Analyse die Konzentration im Körper des Patienten an.

Nachteile der Methode

Bei all den Vorteilen dieser Diagnosemethode ist es sinnvoll zu verstehen, dass ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay kein Weg ist, die Ursache der Krankheit eines Patienten zu finden, sondern nur eine Methode zur Bestätigung der vom behandelnden Arzt angenommenen Diagnose. Und angesichts der Tatsache, dass Forschung ziemlich teuer ist, muss sie mit Bedacht eingesetzt werden. In diesem Fall sollten die Ergebnisse der Studie nur von einem qualifizierten Spezialisten interpretiert werden.

Vorbereitung für die Parasitenanalyse

Es ist wichtig zu verstehen, dass die Identifizierung von Parasiten durch eine Blutuntersuchung eine gewisse Vorbereitung des Patienten erfordert. Bevor Sie Blut spenden, müssen Sie Folgendes tun:

  • Am Tag vor der Einnahme des Biomaterials sollten fetthaltige Lebensmittel, Alkohol und geräucherte Lebensmittel von der Ernährung ausgeschlossen werden.
  • Blut für einen enzymgebundenen Immunosorbens-Assay auf Parasiten und andere Infektionen sollte morgens auf leeren Magen gespendet werden.
  • Vor der Blutspende ist das Rauchen mindestens 3-4 Stunden lang verboten.
  • Am Tag der Blutentnahme ist es ratsam, nicht nervös zu sein und nicht auf erhöhte körperliche Aktivität zurückzugreifen.

Die Einhaltung dieser Regeln hilft, falsch positive Ergebnisse für Antikörper gegen Parasiten zu vermeiden..

Ergebnisse entschlüsseln

Nachdem wir die Abkürzung ELISA und das, was es ist, zerlegt haben, haben wir herausgefunden, dass es sich lohnt, zur Interpretation der Ergebnisse zu gehen. Es ist wichtig zu verstehen, dass das Ergebnis nur positiv oder negativ ist, wenn die Analyse qualitativ durchgeführt wurde. Das heißt, die Diagnose bestätigt entweder den Verdacht des Arztes bezüglich einer bestimmten Diagnose oder widerlegt sie. In diesem Fall sind die Zeichen "+" bzw. "-".

Wichtig: Ein negatives Testergebnis zeigt nicht immer das Fehlen einer Infektion an. Tatsache ist, dass sich innerhalb von 14 Tagen nach der Infektion Antikörper gegen Antigene bilden können und es wahrscheinlich ist, dass sie noch nicht gebildet wurden.

Wenn eine quantitative Analyse durchgeführt wird, werden die Art der Antikörper, ihre Menge und ihr Aktivitätsstadium bestimmt. Insbesondere werden mit einer solchen Diagnose IgG- und IgM-Antikörper (Immunglobuline) bestimmt, die zu verschiedenen Zeitpunkten des Infektionsverlaufs gebildet werden. Die häufigsten Ergebnisse in diesem Fall sind:

  • Erhöhtes IgM und völlige Abwesenheit von IgG. Dieses Bild zeigt eine kürzlich aufgetretene Infektion und eine akute Phase der Pathologie..
  • Erhöhte Aktivität beider Arten von Immunglobulinen (IgM und IgG). Spricht über den langen und chronischen Verlauf des Infektionsprozesses.
  • IgG-Aktivität und völlige Abwesenheit von IgM. Die Infektion war vor mindestens sechs Monaten und jetzt befindet sich das Virus in einem langwierigen chronischen Stadium.
  • Das Fehlen der Antikörper IgG und IgA. Das Ergebnis ist nicht definiert..
  • Das Fehlen der Antikörper IgM, IgA und IgG. Zeigt einen Mangel an Immunität gegen eine bestimmte Infektion an..
  • Die Aktivität der Antikörper IgG, IgM und IgA zeigt eine Verschärfung des chronischen Prozesses an.

Neben der Identifizierung der Antikörpertypen gibt der Laborassistent in einer speziellen Spalte auf dem Formular auch deren Anzahl im Blutvolumen an. Denken Sie daran, nachdem Sie die ELISA-Methode verstanden haben, die Ergebnisse nicht selbst zu interpretieren. Die Ergebnisse können nur vom behandelnden Arzt mit Genauigkeit interpretiert werden, abhängig von der vorgeschlagenen Diagnose, basierend auf dem Krankheitsbild des Patienten..

Was ist ein ELISA-Bluttest und warum ist er für die Diagnose wichtig?

ELISA-Bluttest, was ist das? Wahrscheinlich erinnert sich jeder daran, dass der Körper als Reaktion auf das Eindringen von Viren zur Bekämpfung dieser Viren beginnt, Antikörperkomplexe zu produzieren. Diese immunologischen Verbindungen haben die Fähigkeit, "ihren" Erreger zu erkennen und zu zerstören. Dies ist die Grundlage der Studie, mit der Sie das Vorhandensein und die Menge von Immunenzymen bestimmen können, die für eine bestimmte Krankheit charakteristisch sind.

Einige allgemeine Analyseinformationen

ELISA oder ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay ermöglicht die Bestimmung spezifischer Antikörper (Immunglobuline) gegen einen bestimmten Pathogentyp. Die ELISA-Methode basiert auf Folgendem:

  • In Reaktion auf die Einführung des Mikroorganismus beginnt das Immunsystem, Antikörper zu produzieren.
  • Immunkomplexe sind spezifisch und zerstören nur fremde Zellen;
  • Wenn dem Blutserum des Patienten ein Pathogenextrakt zugesetzt wird und Antikörper vorhanden sind, wird eine Standardverbindung gebildet: Antikörper-Antigen, und Enzyme werden aktiv freigesetzt.

Ein positiver oder negativer Test im Labor wird danach beurteilt, ob die Reaktion nach Zugabe des Pathogens im Plasma aufgetreten ist und wie intensiv der Prozess war..

Die Norm für einen gesunden Menschen sind einzelne Immunkomplexe oder deren Abwesenheit.

Ein ELISA zeigt keine spezifische Krankheit an, sondern legt nur ungefähr die Art des Pathogens nahe, der das Auftreten von Immunkomplexen verursacht hat, und bestimmt das Stadium des Entzündungsprozesses. Auf diese Weise können Sie weitere Diagnosemethoden anpassen..

Über Immunglobuline

Was Immunglobulin ist, verstehen viele: der Immunkomplex, der als Reaktion auf das Eindringen von Fremdzellen gebildet wird. Aber was sind sie??

Mit der ELISA-Methode können Sie 5 Arten von Immunglobulinen auswählen:

Die wichtigsten für die Diagnose sind A, M und G (einige diagnostische Quellen geben nur diese drei Immunkomplexe an), daher lohnt es sich, ihre Merkmale zu berücksichtigen:

  • A - ist für den Schutz der Schleimhäute verantwortlich. Bei akuten Pathologien tritt es 14 Tage nach der Infektion und manchmal später im Blut auf und verschwindet 8 Wochen nach Auftreten der Krankheitssymptome. Wenn der IgA-Immunkomplex länger anhält, können wir den Übergang der Krankheit in eine chronische Form annehmen. Antivirus A weist auf eine Schädigung der Schleimhaut der Blase, des Darms oder der Atemwege hin.
  • M - dient als Indikator für die akute Phase der Krankheit. Es wird 5 Tage nach dem Zeitpunkt der Infektion im Plasma festgestellt (auch wenn keine ausgeprägten Anzeichen der Krankheit vorliegen) und verschwindet nach 6 Wochen, wenn der akute Prozess abgeklungen ist.
  • G - Restreaktionen und Immunkomplexe bleiben lange (manchmal lebenslang) bestehen und verhindern eine erneute Infektion oder das Auftreten von Rückfällen. Das Prinzip der Impfung basiert auf der Bildung von Antikörpern G, wenn eine Person unter Einführung abgeschwächter Mikroben und Viren eine langfristige Immunität entwickelt. Erhöhtes G - ein Indikator dafür, dass der Erreger wieder in den Körper gelangt ist oder eine chronische Infektion verschlimmert hat.

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay für E und D ist nicht im obligatorischen Untersuchungsprogramm enthalten. Es wird in folgenden Fällen verschrieben:

  • E - wenn vermutet wird, dass die Pathologie durch Parasiten verursacht wird;
  • D - wenn die Möglichkeit besteht, dass die Pathologie systemisch ist oder aufgrund einer Immunschwäche auftritt.

Ein ELISA-Bluttest ermöglicht den Nachweis spezifischer Antikörper gegen Fremdstoffe bereits in den frühen Stadien der Pathologie. Das Testen basiert auf der Standard-Antigen-Antikörper-Reaktion, mit der das Vorhandensein von Antikörpern gegen den Erreger nachgewiesen werden kann..

Indikationen für die Labordiagnose

Ein Bluttest für einen Enzymimmunoassay ist bei Verdacht auf das Auftreten der folgenden Pathologien angezeigt:

  • Onkologie;
  • Virushepatitis (mit allen Arten von Viren);
  • herpetische Läsionen der Schleimhaut oder der Haut;
  • einige infektiöse Prozesse (Salmonellose, Masern, Enzephalitis, Ruhr);
    Syphilis;
  • sexuell übertragbare Infektionen (Gonorrhoe, Chlamydien, Mykoplasmose usw.);
  • atopische Prozesse (Allergien);
  • Cytomegalovirus;
  • endokrine Störungen;
  • Immunschwäche;
  • Unfruchtbarkeit;
  • Helminthenbefall.

Mit einem ELISA-Bluttest können Sie den Verlauf einiger nicht übertragbarer Krankheiten vorhersagen:

  • Herzinfarkt;
  • ein Schlaganfall;
  • neurologische Störungen;
  • Nierenerkrankungen.

Als prophylaktische Maßnahme wird der ELISA auch während körperlicher Untersuchungen durchgeführt..

Mit der ELISA-Diagnose können Sie mehr als 600 Antikörper gegen infektiöse und nicht infektiöse Antigene identifizieren. Daher ist die Studie für die frühzeitige Identifizierung der Krankheit unverzichtbar. ELISA gilt als am informativsten, wenn es auf HIV und Onkologie getestet wird.

Was ist die Basis der Technik

Es scheint, dass es nur fünf Immunglobuline gibt und mit ihrer Hilfe eine große Anzahl von pathologischen Prozessen bestimmt wird. ist es möglich?

Vielleicht. Dies liegt daran, dass die Berechnung der Immunglobulinverbindungen nach verschiedenen Tests erfolgt:

  • antinukleäre Körper (zeigen Autoimmunprozesse an);
  • Rheumafaktor (zeigt rheumatische Läsionen);
  • doppelsträngige DNA (eine Gruppe von Proteinen, die bei systemischen Erkrankungen auftreten, wird nachgewiesen);
  • ENA-Screening (identifiziert verschiedene Arten von Antigenen, die für rheumatische Faktoren oder systemische Bindegewebsläsionen charakteristisch sind);
  • Anticardiolipin-Antikörper (Immunkomplexe werden bei HIV, Epilepsie und einigen systemischen Prozessen gebildet);
  • ANGA-Screen (für Autoimmunprozesse charakteristische Verbindungen);
  • Citrullinpeptid (Antikörper treten bei rheumatoider Arthritis auf);
  • C-reaktives Protein (C-reaktives Protein zeigt das Vorhandensein einer akuten oder Verschlimmerung eines chronischen Prozesses an);
  • Immunfluoreszenzanalyse (zeigt hormonelles Versagen oder das Vorhandensein von malignen Neoplasmen an).

Die Entschlüsselung der Analyse erfolgt unter Berücksichtigung der angewandten Techniken. Die Auswertung der erhaltenen Daten ist recht kompliziert und wird von einem Arzt durchgeführt. Für Patienten, die die vom Labor vor dem Arztbesuch erhaltenen Daten unabhängig analysieren möchten, kann die folgende Tabelle vorgeschlagen werden:

Die Tabelle enthält nur allgemeine Informationen. Bei der Analyse des ELISA werden bei der Entschlüsselung durch einen Arzt nicht nur das Vorhandensein von Enzymimmunoassay-Verbindungen, sondern auch deren Menge sowie die zur Durchführung der Studie verwendeten Methoden berücksichtigt.

Methodenvorteile

Ein ELISA-Analysegerät wird häufig zur Differentialdiagnose von Krankheiten und zur Überwachung der Behandlungsqualität eingesetzt. Die Technik hat mehrere Vorteile:

  • Billigkeit. Diagnose-Kits sind relativ kostengünstig.
  • Einfachheit. Es ist nicht erforderlich, sich mit hoch entwickelten Geräten auszustatten, und die Studie kann in jedem Labor durchgeführt werden.
  • Hoher Informationsgehalt. Die Zuverlässigkeit der Bestimmung des Antigentyps beträgt etwa 90%.
  • Schnelligkeit. Der IFA-Analysator ist automatisiert. In einem Notfalllabor können Forschungsdaten innerhalb weniger Stunden nach Lieferung des Biomaterials abgerufen werden.
  • Früherkennung. Immunglobuline treten im Anfangsstadium der Krankheit im Blut auf.
  • Lagerdauer. Dem Patienten entnommenes Material kann bis zu einem Jahr gelagert werden.
  • Stadium der Krankheit. Das Verhältnis und die Hauptmerkmale der im Plasma gefundenen Immunglobuline ermöglichen es, die Schwere des Verlaufs und des Stadiums der Krankheit zu bestimmen.
  • Dynamiksteuerung. Während der Behandlung des ELISA ermöglicht ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay die Korrektur der laufenden Therapie in Abhängigkeit von den Laborparametern.
  • Einfache Sammlung von Biomaterial. Eine kleine Menge venösen Blutes reicht zur Diagnose aus.

Ein ELISA-Bluttest ist sehr informativ und ermöglicht es Ihnen, die Pathologie im Anfangsstadium der Entwicklung zu identifizieren, aber nur auf der Grundlage einer Laborstudie wird die Diagnose nicht gestellt. Die endgültige Diagnose ist erst nach vollständiger Untersuchung des Patienten möglich.

Die Nachteile der Methode

Trotz einer Reihe von Vorteilen hat eine Blutuntersuchung durch Immunfermentation einige Nachteile:

  • die Unfähigkeit, die Art des Pathogens mit 100% iger Genauigkeit zu bestimmen (bei einigen Krankheiten werden ähnliche Immunglobuline produziert);
  • die Wahrscheinlichkeit, ein falsch positives Ergebnis zu erhalten (dies tritt bei schwangeren Frauen auf oder wenn die Regeln zur Vorbereitung der Analyse nicht eingehalten werden).

Folgendes kann die Genauigkeit einer Diagnose beeinträchtigen:

  • Rauchen und Trinken;
  • nervöse Belastung oder Stress;
  • körperliche Bewegung;
  • Einnahme bestimmter Medikamente (Sie können nur 10 Tage nach dem Absetzen des Arzneimittels Blut spenden).

Diese Mängel einer Blutuntersuchung für ELISA hindern Ärzte nicht daran, die Technik als die bequemste und informativste für die Erkennung von Krankheiten im Frühstadium zu erkennen. Falls erforderlich, können den Patienten zur Klärung der vom Labor erhaltenen Daten spezifischere Tests zugewiesen werden, um die Art des Erregers genauer bestimmen zu können.

ELISA in der Parasitologie


IgE ist charakteristisch für helminthische Invasionen, kann jedoch im Plasma und bei einigen Allergien auftreten (es befindet sich in geringer Menge im Blut). Trotz der Wahrscheinlichkeit, falsch positive Reaktionen zu erhalten, wird von Parasitologen häufig Blut für den ELISA verschrieben, um die folgenden Arten von Parasiten nachzuweisen:

  • Helminthen;
  • Toxoplasma;
  • Amöbe;
  • Trichine;
  • Giardia
  • Protozoen;
  • Plattwürmer.

Helminthenbefall verursacht wie infektiöse Krankheitserreger die Produktion von Antikörpern E. Das Wachstum dieses Markers im Blut weist fast immer auf das Vorhandensein von Parasiten im Körper hin (bei atopischen Reaktionen bleibt er auf dem gleichen Niveau oder nimmt leicht zu)..

Parasiten befinden sich nicht unbedingt auf der Darmschleimhaut, sie können das Gewebe der Nieren, des Herzens und anderer Organe durchdringen. Wenn eine Parasitierung im Darm durch das Vorhandensein von Eiern, Larven oder Erwachsenen im untersuchten Kot leicht nachgewiesen werden kann, wird die Schädigung anderer Gewebe nur mittels eines Enzymimmunoassays bestimmt.

Jetzt haben viele verstanden, was ELISA ist und haben keine Angst mehr vor einer mysteriösen Laborkontraktion. In der Tat soll die Studie nicht nur Krankheiten bestätigen. Einige Enzymimmunoassays (Syphilis, HIV) sind Teil des obligatorischen medizinischen Untersuchungsprogramms, und ein negatives Ergebnis ist ein Indikator für die Gesundheit. Und wenn sich das Testen als positiv herausstellt, ist dies kein Grund zur Panik: Je früher die Behandlung der entdeckten Krankheit beginnt, desto günstiger ist die Prognose.

Enzymimmunoassay mit Aufschlüsselung der Indikatoren

Immun- und enzymatische Reaktionen

Wie der Name schon sagt, umfasst ein IFA-Bluttest mehrere Komponenten, nämlich eine Immun- und eine enzymatische Reaktion.
Eine Immunreaktion ermöglicht es Ihnen, zelluläre Elemente und Krankheitserreger miteinander zu verbinden, während eine enzymatische Reaktion es Ihnen ermöglicht, das Ergebnis einer früheren Reaktion zu visualisieren und zu bewerten.

Betrachten Sie jede Reaktion genauer..

Was sind Immunantworten??

Immun sind spezifische Reaktionen, mit denen Sie ein Antigen an einen Antikörper binden und einen Immunkomplex bilden können. Was bedeutet das? Zunächst muss verstanden werden, dass jede Zelloberfläche Moleküle enthält, die Daten über die Zelle enthalten, Antigene genannt und unterteilt in:

Einzelne Antigene weisen trotz einiger Ähnlichkeiten viele Unterschiede auf. Sie sind in einem bestimmten Organismus vorhanden und werden in anderen niemals wiederholt. Speziesantigene können in den Organismen verschiedener Arten von Lebewesen gefunden werden. So haben zum Beispiel Affen, Pferde oder Hunde ihre eigenen, anders als alles Antigen. Deshalb werden Antigene dieses Typs vom Immunsystem verwendet, um ihre eigenen und fremden Zellen zu erkennen, was in der Tat die Grundlage des Enzymimmunoassays ist.

Wie werden Antigene erkannt? Hier ist alles klar genug. In einfachen Worten, eine Immunzelle fängt eine Zelle, die sie „verdächtigt“ hat, und vergleicht ihr Antigen mit der Beschreibung. Wenn das Antigen der zweifelhaften Zelle ihm entspricht, "setzt" die Immunzelle es frei und fährt fort. Wenn die Beschreibung anders ist, ist die Reaktion des Organismus auf die Bedrohung eine - Zerstörung. Darüber hinaus beträgt die Anerkennung des "Feindes" in diesem Fall fast 100%.

Sandwich-Immunoassay Immunoassay

Feige. 2. Schematische Darstellung des Immunoassay- "Sandwich" -Typs. ATP ist ein Antikörper eines Substrats, ATd ist ein Nachweisantikörper, AH ist ein Antigen, M ist eine Markierung, die kovalent an einen Nachweisantikörper gebunden ist, P ist ein Substrat, auf dem der Antikörper des Substrats adsorbiert ist.

In dieser Variante des Immunoassays (Fig. 2) wird ein Paar von Antikörpern verwendet, die für räumlich entfernte Epitope des untersuchten Antigens spezifisch sind.

I. Sorption von Substratantikörpern

In den Vertiefungen einer Immunoassay-Platte mit 96 Vertiefungen werden Substratantikörper von 1 bis 2 & mgr; g pro Vertiefung in 100 & mgr; l phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) sorbiert. Die Inkubation wird 30 Minuten bei Raumtemperatur durchgeführt und auf einem horizontalen Tablettenschüttler geschüttelt. Das Waschen (2-fach) von ungebundenen Antigenmolekülen wird mit phosphatgepufferter Salzlösung durchgeführt, die 0,1% Tween-20 (PBST) enthält..

II. Sperren

Um unspezifische Bindungsstellen zu blockieren, werden Plattenvertiefungen mit PBST gefüllt und 10-15 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert.

III. Antigen-Inkubation

50 & mgr; l der Testlösung oder Standardverdünnungen des Antigens werden in die Vertiefungen der voradsorbierten Antikörperplatte gegeben. Antigenverdünnungen sollten auf der Basis von PBST hergestellt werden, da Tween-20 die unspezifische Bindung von Proteinmolekülen aneinander und an die Oberfläche der Tablette verringert. Sowohl die Testlösung als auch die Standardverdünnungen des Antigens werden paarweise (oder 3 Wiederholungen) eingeführt, wobei zwei (drei) Vertiefungen für jede Proteinverdünnung verwendet werden. Die Inkubation wird 30 Minuten bei Raumtemperatur unter konstantem Rühren durchgeführt. Das Waschen wird dreimal mit PBST-Lösung durchgeführt.

IV. Enzymmarkierte Antikörperinkubation

100 & mgr; l einer Lösung spezifischer Antikörper, die mit einer Enzymmarkierung konjugiert sind, werden in die Vertiefungen der Platte gegeben. Die optimale Konzentration an konjugierten Antikörpern wird normalerweise vom Hersteller angegeben (normalerweise eine Konzentration von 2-4 μg / ml verwenden). Die Inkubation mit Antikörpern, die die Enzymmarkierung enthalten, wird 30 Minuten bei Raumtemperatur durchgeführt und auf einem horizontalen Plattenschüttler geschüttelt. Das Waschen wird 5-6 mal mit PBST durchgeführt.

V. Durchführung einer enzymatischen Reaktion, begleitet vom Auftreten eines gefärbten Produkts

100 & mgr; l Substratlösung werden in die Vertiefungen gegeben und 10 Minuten bei Raumtemperatur unter konstantem Rühren inkubiert..

VI. Stoppen der enzymatischen Reaktion

Vor der Messung der optischen Dichte wird eine Farbreaktion mit 0,5 M H gestoppt2SO4. Nach der Inkubation werden 50 & mgr; l einer Lösung von 0,5 M Schwefelsäure mit einer Arbeitslösung von RPD in die Vertiefungen gegeben. Danach können Sie sofort mit der Messung der optischen Dichte beginnen.

VII. Absorptionsmessung

Die optische Dichte der Lösung des gefärbten Produkts wird bei λ = 490 nm unter Verwendung eines Tablettenspektrophotometers gemessen.

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Mehr zu Immunglobulinen

Insgesamt produziert der menschliche Körper 5 bekannte Klassen von Antikörpern, die als Ig (was für Immunglobuline steht) bezeichnet werden und zu den Klassen A, M, G, E und D gehören. Alle von ihnen sind für die Interpretation der Ergebnisse des ELISA von großer Bedeutung. Natürlich gibt es viel mehr Komplexe, und nicht alle sind noch offen. Bei der Diagnose verschiedener Krankheiten sind jedoch die ersten drei Arten von Antikörpern am wertvollsten. Ein ELISA-Bluttest verwendet ein Maximum an Informationen: den Zeitpunkt des Auftretens von Antikörpern im Blut, die Änderung ihrer Konzentration in Abhängigkeit von der Zeit, die Dauer des Verschwindens sowie die Art des spezifischen Antikörpers.

Teilnehmer am primären, akuten Infektionsprozess sind Immunglobuline der Klasse M, die immer auf eine akute Phase hinweisen, selbst wenn die Krankheit klinisch beseitigt ist. Ein typisches Beispiel ist die anikterische Form der akuten Virushepatitis B oder C. Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay für Hepatitis zeigt, dass eine Person an akuter Hepatitis leidet und Symptome wie Hypochondrien, Mundtrockenheit, Gelenkschmerzen und andere unspezifische Symptome leicht zu verstehen sind.

Nach einigen Wochen werden diese Antikörper in einer zunehmend verschwindenden Konzentration gefunden, was zu Immunglobulinen der Klasse G führt. Sie werden monatelang oder sogar jahrelang im Blut nachgewiesen und weisen auf eine Erholung hin und können dann lebenslang verbleiben und eine starke Immunität bilden. Dies weist auf eine starke Abwehr gegen Pathogenantigene hin. Es sind also die Antikörper dieser Klasse, die eine Person gegen wiederholte Fälle von Anthrax und Pest immun machen. Es gibt jedoch Zeiten, in denen diese Antikörper die schädlichen Wirkungen von Antigenen nicht beeinträchtigen. In diesem Fall können wir über die Steigerung der Aktivität des chronischen Prozesses sprechen.

IgE hat Anwendungen bei der Diagnose verschiedener parasitärer Infektionen und allergischer Zustände, und IgD erfüllt eine Hilfsfunktion: Mit dem enzymgebundenen Immunosorbens-Assay können Sie es für die umfassende Diagnose von Asthma bronchiale und Autoimmunerkrankungen verwenden. Natürlich ist die Entschlüsselung der ELISA-Analyse viel komplizierter, und Immunologen können viel mehr sagen. Was sind die Anzeichen dafür, dass der Patient unabhängig ins Labor gehen kann, um Studien durchzuführen??

Wie werden ELISA-Analysen durchgeführt?

Unter den Bedingungen ausgestatteter Labors und medizinischer Zentren kann die treponemale Bestimmung durch den Enzymimmunoassay mit verschiedenen Methoden durchgeführt werden, die als direkt und indirekt bezeichnet werden. Die Grundlage dieser Reaktionen ist jedoch eine Möglichkeit, mit der Sie mittels ELISA auf Syphilis analysieren können. Dieser Test wird auf eine bestimmte Weise durchgeführt..

Der Arzt des Laborarztes hat eine spezielle Tablette - eine Platte mit Löchern in Form von runden Hohlräumen in Höhe von bis zu hundert. Konzentrierte Syphilis-Antigene werden auch speziell in den Assay-Kits hergestellt, die in den Vertiefungen der ELISA-Platte platziert werden. Nach der morgendlichen Blutentnahme des Patienten auf nüchternen Magen wird das Serum vom Blut getrennt und in Vertiefungen mit Antigenen gegeben. Antigen-Antikörper-Bindungsreaktion tritt in Vertiefungen auf.

Der ELISA für Syphilis basiert auf der Reaktion der Bindung der Immunverbindungen und Konjugate der ersten Stufe mit einer speziellen Enzymmarkierung, die zum Ablesen der Reaktionsqualität erforderlich ist. In diesem Stadium werden zusätzlich zur enzymatischen Peroxidase chromogene Farbstoffe eingeführt, um das Material abhängig vom Ergebnis der Reaktion zu färben.

Basierend auf den erscheinenden farbigen Löchern in der Tablette wird der Test entschlüsselt. In Sätzen verschiedener ELISA-Methoden sind Tabellen mit Farbschemata beigefügt, die die Menge, den Gehalt an Immunglobulinen und Antikörpern aus dem Patientenserum in 1 Volumeneinheit bestimmen.

Zur Beurteilung des Reaktionsergebnisses wird eine spezielle Ausrüstung verwendet - ein Spektrophotometer zur Photometrie und Bewertung der Dichte des Materials in den Vertiefungen im Vergleich zu Kontrollproben. Basierend auf der Dichte wird ein Ergebnis erhalten, das für jeden Erreger der Syphilis innerhalb der Grenzen von Normen und Pathologie eindeutig festgelegt ist.

allgemeine Informationen

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay kann verwendet werden, um den Gehalt an Hormonen, Immunglobulinen, immunologischen Komplexen sowie einer Reihe von biologisch aktiven Substanzen zu bestimmen. Als Material für eine solche Studie können Sie Blut, Liquor cerebrospinalis, den Inhalt des Glaskörpers usw. spenden..

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay wurde in letzter Zeit aufgrund einer Reihe von Vorteilen zunehmend verwendet:

  • Empfindlichkeit über 90 Prozent;
  • stabile Lagerung der zum Halten benötigten Zutaten;
  • schnelle und einfache Diagnose;
  • Mindestkosten für Materialien;
  • automatisierter Prozess;
  • kostengünstig.

Darüber hinaus können Sie mit einem ELISA Infektionen, einschließlich Hepatitis, frühzeitig erkennen. Aus diesem Grund wird es manchmal anstelle von PCR-Studien sowie während der Schwangerschaft empfohlen. Es kommt jedoch nicht ohne Nachteile aus. Die Ergebnisse solcher Tests sprechen nur über die Reaktion des Körpers auf den Erreger, werden jedoch nicht bestimmt. In den meisten Fällen wird eine Kombination aus ELISA und PCR empfohlen..

Mithilfe von IFA-Tests können Sie die Ergebnisse eines ganzen Satzes ermitteln. Insbesondere werden die Norm der Schilddrüsenhormone, das Vorhandensein von Tumormarkern und eine Reihe von Infektionen bestimmt. Die Norm wird für jeden Indikator separat ausgewählt. Daher sollte der ELISA für Erwachsene normalerweise TG-Werte innerhalb von 70 IE / ml zeigen, T4 im Bereich von 64 bis 146 nmol / l, T3 wird in einer Menge von 1,8 bis 2,8 nmol / l berechnet.

Bei der Planung einer Schwangerschaft können solche Tests durchgeführt werden, um Sexualhormone zu bestimmen. Insbesondere Luteinisieren. Die Werte variieren je nach Tag des Zyklus. Insbesondere kann ein Maximalwert von 150 und ein Minimum von 1 mU / l beobachtet werden.

Wenn zur Bestimmung des Sexualhormons bei Männern ein ELISA verwendet wird, ist ein Wert im Bereich von 0,5 bis 10 mU / l ein normaler Indikator. Wenn chronisches Gonadotropin untersucht wird, variieren die Ergebnisse je nach Geschlecht. Insbesondere für erwachsene Männer und Frauen ohne Schwangerschaft sollte der Indikator innerhalb von 5 mU / ml liegen. Wenn Tests während der Schwangerschaft durchgeführt werden, können die Ergebnisse je nach Trimester bis zu Zehntausenden von Einheiten unterschiedlich sein.

Was ist Chlamydien?

PCR wird wie ELISA in modernen Labors häufig zur Diagnose sexuell übertragbarer Krankheiten eingesetzt. Gleichzeitig schlagen Ärzte häufig vor, beide Tests durchzuführen. Viele Patienten glauben, dass dies ein zusätzlicher Gewinn ist, aber diese Tests haben einen gravierenden Unterschied, obwohl sie auf den ersten Blick identisch erscheinen mögen. Eine Klassifizierung psychologischer Forschungsmethoden kann jedoch in gewissem Umfang angewendet werden.

Die Ergebnisse von PCR und ELISA werden häufig während der Schwangerschaft verwendet, wenn eine Chlamydieninfektion ausgeschlossen werden muss. Oft ist ein so positives Ergebnis für die Infektion eine Antwort auf die Frage von Männern und Frauen: "Warum kann ich nicht schwanger werden?". Zusätzlich zum Risiko einer Unfruchtbarkeit birgt Chlamydien während der Schwangerschaft ein Infektionsrisiko für das Baby.

Das Hauptproblem bei der Diagnose einer solchen Infektion ist der asymptomatische Verlauf. Spezifische Antikörper können jedoch zehn Tage nach der Infektion nachgewiesen werden. Wenn ein PCR-Test während der Schwangerschaft das Vorhandensein oder Fehlen solcher Krankheitserreger nachweist, zeigt Ihnen der ELISA, in welchem ​​Stadium sich der Prozess jetzt befindet

Eine solche Studie ist auch wichtig, um die Therapieergebnisse zu bewerten.

Decodierungsanalyse

Eine Analyse der Hepatitis oder eines anderen Pathogens bei der ELISA-Leistung wirft häufig Fragen auf. Insbesondere, wie die Entschlüsselung durchgeführt wird. Im Moment zeigen die Ergebnisse eines von fünf Immunglobulinen: IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. Sie sind es, die auffallen, da die Rolle der anderen nicht bis zum Ende geklärt wurde. Die wichtigsten für die Studie sind die Klassen A, M und G..

Immunglobulin A ist hauptsächlich für die Schutzfunktionen der Schleimhäute verantwortlich. Das Ergebnis ihres Vorhandenseins ist negativ, wenn die Krankheit zu Beginn in ihrer akuten Form identifiziert wird. Das Auftreten solcher Schutzmarker tritt gewöhnlich zwei Wochen nach dem Ausbruch der Krankheit auf. Manchmal wird sogar später ein positives Ergebnis erzielt.

Die Hauptfunktion dieser Antikörper ist der Nachweis und die Zerstörung von Mikroorganismen. Ihre Zahl wird immer verringert, wenn die Krankheit abklingt. Normalerweise fehlt acht Wochen nach Ausbruch der Krankheit wieder ein positives Ergebnis. Der Nachweis von Immunglobulinen der Klasse A zu einem späteren Zeitpunkt kann auf einen Prozess hinweisen, der in eine chronische Erkrankung übergeht.

Die Hauptmarker, deren Dekodierung zur Bestimmung der akuten Phase der Pathologie beiträgt, sind Immunglobuline der Klasse M. Sie können sie fünf Tage nach der Infektion im Blut nachweisen. Sie sind etwa sechs Wochen im Blut verzögert, danach tritt ihr Verschwinden schnell auf.

Immunglobuline der Klasse G sind für die Bildung eines verbleibenden Immuneffekts verantwortlich. Ungefähr einen Monat nach der Infektion beginnen sie, im Blut nachgewiesen zu werden. In Zukunft wird ihre Definition über viele Monate ausgedehnt. Oft kann man sie dein ganzes Leben lang beobachten. Solche Immunglobuline werden als Schutzreaktion gebildet, die eine erneute Infektion verhindert. Beispielsweise werden solche Immunglobuline im Blut einer Person gebildet, die im Kindesalter Windpocken hatte und dementsprechend bis zum Lebensende Immunität erhielt. Natürlich gibt es auch andere Infektionen, deren Rückkehr möglich ist. In diesem Fall wird durch die Analyse ein erneutes Wachstum dieser Gruppe von Immunglobulinen festgestellt.

Immunglobuline E werden zum Nachweis von Parasiten im Körper verwendet. Das zur Gruppe D gehörende Immunglobulin befindet sich in B-Lymphozyten und ist bei gesunden Menschen in einigen Mengen vorhanden. Mit etwa zehn Jahren erreichen sie ihre Maximalwerte. Die Menge dieses Immunglobulins steigt während der Schwangerschaft an. Darüber hinaus kann das Vorhandensein in einer größeren Menge als üblich ein Zeichen für Asthma bronchiale sein, einen Immundefizienzzustand.

Entschlüsselung

Antikörper, sie sind auch Immunglobuline, werden in fünf Klassen unterteilt, von denen jedoch normalerweise nur drei bestimmt werden: M, G und A, die sich zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Infektion im Körper ansammeln.

Immunglobuline M erscheinen zuerst, sie sind IgM. Sie entstehen 4-5 Tage nach der Infektion und sind anderthalb Monate im Blut, danach verschwinden sie. Wenn der ELISA ihre Anwesenheit zeigt, haben wir es mit einer akuten Periode der Krankheit oder ihrer Verschlimmerung zu tun.

In drei bis vier Wochen tritt IgG, dh Immunglobuline der Klasse G, auf. Sie können mehrere Monate oder sogar Jahre hintereinander vorhanden sein. Wenn der ELISA zweimal im Abstand von zwei Wochen durchgeführt wurde und die Menge an IgG in beiden Proben erhöht war, können wir über eine Infektion oder eine erneute Infektion damit sprechen.

IgA, dh Antikörper der Klasse A, werden nach einer Verschlimmerung der Infektion oder einen Monat nach ihrem Auftreten im Körper nachgewiesen. Die meisten von ihnen zirkulieren in unseren Schleimhäuten und nur ein Fünftel im Blut. Sie verschwinden erst, nachdem alle Infektionserreger zerstört wurden, dh mindestens zwei Wochen nach der Infektion maximal acht.

Wenn die Analyse des ELISA nach der Heilung das Vorhandensein zeigt, ist die Krankheit in das chronische Stadium übergegangen.

Bei der Entschlüsselung müssen Sie auch die Zeichen + und - im Formular beachten. Nur ein Arzt kann ein vollständiges Urteil fällen, aber einige Merkmale des Körpers können anhand der folgenden Daten beurteilt werden:

Nur ein Arzt kann ein vollständiges Urteil fällen, aber einige Merkmale des Körpers können anhand der folgenden Daten beurteilt werden:

  • Ein Mangel an Immunität gegen Infektionen wird durch eine Kombination von Indikatoren wie JgM, JgG, JgA mit einem Minus überall angezeigt;
  • Das Vorhandensein einer Immunität nach einem Impfstoff oder einer Infektion wird durch JgM und JgA mit einem Minuszeichen und JgG mit einem Pluszeichen (JgG (+)) angezeigt;
  • Die folgenden Indikatoren können auf das Vorhandensein einer akuten Infektion hinweisen: JgA (- / +), JgG (- / +) und JgM (+);
  • Im Falle einer Verschlimmerung chronischer Infektionen enthält das Formular die folgende Notation: JgM, JgG und JgA mit Pluspunkten überall;
  • Bei chronischen Infektionen wird das folgende Bild beobachtet: JgG (+/-), JgM (-) und JgA (+/-);
  • JgM (-) zeigt die Wiederherstellung an.

Oft wird auch eine Studie wie ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay von Blutserum durchgeführt. Es wird für das Studium der Schilddrüsenhormone benötigt. Die Indikatoren für Hormone wie Thyroxin, freies Thyroxin, Triiodthyronin, freies Triiodthyronin und Thyreoglobulin sind hier wichtig.

Darüber hinaus ist eine solche Studie zur Diagnose von Infektions- und Autoimmunerkrankungen nützlich..

Beschreibung der Diagnose von sexuell übertragbaren Krankheiten: Enzymimmunoassay (ELISA)

Die Liste der verfügbaren Diagnosetechniken in den letzten Jahrzehnten wächst rasant. Diagnostiker versuchen mit neuen Methoden, die Vorteile aller vorherigen Tests zu kombinieren und alle ihre bisherigen Mängel zu beseitigen.

In letzter Zeit erscheint in der Liste der diagnostischen Verfahren häufiger ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay - ein moderner und ziemlich neuer Test, der einem normalen Menschen, der nicht mit der Medizin in Verbindung steht, wenig bekannt ist. Trotzdem erweitert diese Technik rasch die Zahl der Anhänger unter qualifiziertem medizinischem Personal. Was es ist und in welchen Fällen es verwendet werden sollte, können Sie versuchen, es herauszufinden, indem Sie sich seine Merkmale und Hauptmerkmale ansehen.

Die Essenz der Methode

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay ist eine Instrumentallabortechnik, die auf der molekularen Antigen-Antikörper-Reaktion basiert und den Nachweis spezifischer Proteine ​​in biologischen Materialien (Proben für Forschungszwecke) ermöglicht. Solche Proteine ​​können Enzyme, eine Vielzahl von Mikroorganismen (Viren, Bakterien, Pilze), Protozoen usw. sein..

Nach der Entdeckung der Methode erhielt er den Namen ELISA-Test, der nicht mit dem Namen der Entdecker zusammenhängt, sondern eine Abkürzung des vollständigen Namens in der englischen Version ist - enzymgebundener Immunosorbens-Assay. Ärzte auf der ganzen Welt verwenden diesen Namen, einige Ärzte im russischsprachigen Raum nennen diese Art der Forschung auch.

Das Grundprinzip der Methode ist die molekulare Antigen-Antikörper-Reaktion.

Ein Antigen ist ein Fremdmolekül, das als Teil einer pathogenen Mikrobe in den menschlichen Körper gelangt. Antigene sind normalerweise Proteinmoleküle. Zusätzlich zu Mikroorganismen können solche „Fremden“ Zellen von Fremdblut sein, die in der Gruppe oder im Rh-Faktor nicht zusammenfallen.

In Reaktion auf die Aufnahme eines solchen Antigens wird im Körper eine Immunreaktion ausgelöst, die auf den Schutz vor Fremdmolekülen abzielt. Dies geschieht aufgrund der Synthese spezieller Wirkstoffe des Immunsystems - Antikörper (Immunglobuline). Jeder Antikörper ist nur für ein bestimmtes Antigen geeignet und neutralisiert das pathogene "Alien" durch Kontakt in einem einzigen Komplex. Es ist der Prozess einer solchen Bindung, der als Antigen-Antikörper-Reaktion bezeichnet wird.

Arten von Antikörpern

Alle Antikörper (Immunglobuline) werden in 5 Typen unterteilt, je nachdem, in welchem ​​Stadium der Immunantwort sie auftreten:

  • Klasse M (IgM). Ein Anstieg solcher Immunglobuline wird innerhalb der ersten Tage nach Einführung einer Infektion oder eines anderen Krankheitserregers beobachtet. Nach ungefähr 6 Wochen beginnen sie sich aufzulösen und zu verschwinden..
  • Klasse G (IgG). Im zweiten Stadium synthetisiert, um die Krankheit zu überwinden. Nach der vollständigen Eliminierung von Fremdmolekülen sind diese weiterhin in geringer Menge im Blut vorhanden, um im Falle einer erneuten Infektion Immunität zu gewährleisten.
  • Klasse A (IgA). Solche Immunglobuline sind für die Schutzfunktionen der Schleimhäute des Körpers verantwortlich, durch die pathogene Elemente am leichtesten eindringen, da das Schleimhautepithel viel dünner und empfindlicher ist als gewöhnliche Hautintegumente..
  • Klasse E (IgE). Diese spezifischen Globuline lenken ihre Wirkung gegen parasitäre Infektionen, die den menschlichen Körper betreffen. Sie treten unabhängig davon auf, welches Organsystem von Parasiten betroffen ist..
  • Klasse D (IgD). Diese Klasse findet man auch bei gesunden Menschen immer. Bei Kindern unter 10 Jahren nimmt sie allmählich zu, wonach sich ihre Menge, vorbehaltlich der absoluten Gesundheit, nicht ändert. Wenn der Indikator über den Normalwert ansteigt, kann dies auf eine Schwangerschaft, Asthma, Immunschwäche usw. hinweisen..

Für die ELISA-Diagnostik sind die IgG-, IgM- und IgA-Spiegel von Immunglobulinen am wichtigsten. Entsprechend ihren Credits können Sie herausfinden, ob eine Person zuvor eine Krankheit hatte oder sich kürzlich zusammengezogen hat, eine Immunität entwickelt hat oder ob ihr Körper gegen Pathologie schutzlos ist.

Vor- und Nachteile des Enzymimmunoassays

Derzeit ist der ELISA eine der genauesten und empfindlichsten Methoden. Es wurde von Spezialisten auf verschiedenen Gebieten der Medizin übernommen und erweitert seinen Anwendungsbereich weiter..

Methodenvorteile

  • Hohe Datengenauigkeit.
  • Empfindlichkeit (ermöglicht es Ihnen, die erforderliche Substanz auch bei minimalem Vorhandensein des Erregers in der Probe nachzuweisen).
  • Die Möglichkeit der Diagnose in den frühen Tagen der Krankheit oder in der Inkubationszeit.
  • Die Geschwindigkeit der Datenerfassung im Vergleich zu anderen Methoden mit ähnlicher Genauigkeit.
  • Hohe Automatisierung des Prozesses und minimale menschliche Beteiligung, was die Genauigkeit des Darstellers verringert.
  • Erhalten von Daten über das Stadium des pathologischen Prozesses und die Wirksamkeit der ausgewählten Therapie.
  • Schmerzfreie und geringe Invasivität bei der Materialauswahl.

Nachteile der Methode

  • In den meisten Fällen können Sie damit die Reaktion des Körpers auf einen Krankheitserreger und nicht auf den Krankheitserreger selbst bestimmen.
  • Vor der Studie muss die angebliche Krankheit genau bekannt sein, da der Test hochspezifisch ist..
  • Die Wahrscheinlichkeit falscher Indikatoren, die durch technische Probleme, die Einnahme von Medikamenten, das gleichzeitige Vorhandensein mehrerer chronischer Krankheiten oder Stoffwechselstörungen im Körper des Patienten verursacht werden.
  • Die Interpretation der Ergebnisse sollte nur von einem hochqualifizierten Spezialisten durchgeführt werden, da für die Interpretation der erhaltenen Daten eine spezielle Ausbildung und ein großer Bestand an medizinischem Wissen in einem bestimmten Bereich erforderlich sind.
  • ELISA ist eine eher seltene Analyse, daher wird sie nicht in allen diagnostischen Labors durchgeführt.
  • Das Verfahren ist ziemlich teuer, da das Labor neben Reagenzien über zahlreiche teure Geräte und Proben von Antigenen verfügen muss, die in speziellen Instituten hergestellt werden.

In welchen Fällen verwenden Sie einen Enzymimmunoassay

Die vollständige Liste der Indikationen für die Ernennung eines Enzymimmunoassays ist sehr umfangreich und umfasst nahezu alle Bereiche der Medizin.

Am häufigsten wird IFA für folgende Zwecke verwendet:

  • Erkennung von Infektionskrankheiten;
  • Diagnose sexuell übertragbarer Krankheiten;
  • Bestimmung des Immunstatus oder einzelner Autoimmunerkrankungen;
  • Identifizierung von Tumormarkern;
  • Hormonbestimmung.

Bei Infektions- und Viruserkrankungen können mit der Technik folgende Pathologien identifiziert werden:

  • alle Arten von Virushepatitis;
  • Epstein Barr Virus;
  • alle TORCH-Infektionen;
  • alle Arten von Darminfektionen;
  • HIV
  • Syphilis;
  • die meisten parasitären Infektionen;
  • Helicobacteriose usw..

Darüber hinaus können Sie mit ELISA schnell und effektiv einen Herzinfarkt bestimmen, das Fortpflanzungspotential des Körpers bewerten, Allergien, seine Ursache usw. identifizieren..

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay wird verwendet, um klinische Studien während der Entwicklung neuer Arzneimittel durchzuführen und deren Wirkung auf den menschlichen Körper zu bewerten..

Arten von Proben und Methoden für ihre Auswahl für die Forschung

Am häufigsten ist das untersuchte Material für den enzymgebundenen Immunosorbens-Assay Blut, das aus der Ulnarvene des Patienten entnommen wird. Die Probenahme erfolgt vor allem morgens auf nüchternen Magen. Nach der Selektion aus dem Blut werden die geformten Zellen, die die Studie stören, getrennt und entfernt, wobei nur Serum übrig bleibt.

Bei der Diagnose von Urogenitalinfektionen handelt es sich häufig um Abstriche aus den Schleimhäuten der Genitalien, Schleim aus der Harnröhre oder dem Gebärmutterhals, Proben aus dem Rektum, Kratzer durch Erosion oder Geschwüre in der Leiste und anderen Körperteilen. Abstriche können sowohl aus der Mundhöhle als auch aus dem Nasopharynx entnommen werden.

Manchmal wird in der geburtshilflichen und gynäkologischen Praxis während der Schwangerschaft ein Enzymimmunoassay verwendet, um den Zustand des Fruchtwassers zu bestimmen. In diesem Fall wird das Fruchtwasser zu einer Probe. Dazu wird eine kleine Menge Flüssigkeit entnommen, die mit einer langen Nadel in die fetale Blase eindringt. Alle Manipulationen werden mit einem sterilen Instrument durchgeführt, um mögliche Risiken zu minimieren..

Oft wird das Material zu Liquor cerebrospinalis oder seröser Flüssigkeit. Dies geschieht bei örtlicher Betäubung, die injiziert wird..

Klären Sie, welche Art von Materialien für den enzymgebundenen Immunosorbens-Assay erforderlich sind, falls ein Spezialist die Studie leitet. Oft werden mehrere Arten von Proben gleichzeitig oder an verschiedenen Orten entnommen. Ein Arzt, der eine Überweisung für diese Art der Untersuchung ausstellt, sollte den Patienten auch über die Vorbereitung der Lieferung von Biomaterial informieren.

Vorbereitung für den Enzymimmunoassay

Um die Genauigkeit der nach einem Enzymimmunoassay erhaltenen Daten zu erhöhen, sollte die Vorbereitung für die Materialauswahl wie folgt sein:

  • 10 Tage vor der Studie Antibiotika, antivirale und antimykotische Medikamente ausschließen;
  • pro Tag ist es notwendig, Alkohol, Rauchen und die Einnahme von Betäubungsmitteln auszuschließen;
  • im gleichen Zeitraum ist es notwendig, körperliche Überlastung zu vermeiden;
  • den verschreibenden Spezialisten vor allen Arzneimitteln zu warnen, die der Patient einnimmt;
  • Benachrichtigen Sie einen Arzt bei Schwangerschaft oder Verdacht auf Schwangerschaft.

Am besten, wenn die Testmaterialien morgens auf nüchternen Magen ausgewählt werden..

Wenn die Diagnose darauf abzielt, den Zustand des hormonellen Hintergrunds zu bestimmen, ist es wichtig, am Vorabend einen ruhigen Zustand sicherzustellen und nervöse Spannungen zu vermeiden. Bei Frauen wird die Blutspende für Hormone eindeutig durch den Zeitraum des monatlichen Zyklus bestimmt, wie der Arzt zum Zeitpunkt des Termins sagen wird.

2-3 Tage vor der Auswahl des Materials müssen gebratene und fettige Produkte von der Speisekarte ausgeschlossen werden. Vor der Hepatitis-Analyse sollten keine Zitrusfrüchte und kein anderes Obst und Gemüse in Orange und Gelb gegessen werden.

Dekodierung der Ergebnisse des Enzymimmunoassays

Das Ergebnis einer qualitativen Studie wird normalerweise durch die Zeichen „+“ (gefunden) oder „-“ (nicht gefunden) angezeigt..

Das Vorhandensein oder Fehlen bestimmter Gruppen von Immunglobulinen kann die folgenden Schlussfolgerungen ziehen:

  • JgM (-), JgG (-), JgA (-) - das Immunsystem gegen die Krankheit fehlt vollständig (der Körper ist dieser Art von Antigen bisher nicht begegnet);
  • JgM (-), JgG (+), JgA (-) - zuvor gab es eine Kollision mit diesem Antigen oder Impfstoff;
  • JgM (+), JgG (- / +), JgA (- / +) - akuter pathologischer Prozess (höchstwahrscheinlich primär);
  • JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - der Prozess eines chronischen Verlaufs;
  • JgM (+), JgG (+), JgA (+) - Rückfall;
  • JgM (-) - Stadium der Genesung.

Quantitative Werte sind mit einer großen Informationslast verbunden, aber nur der behandelnde Arzt kann sie basierend auf früheren Indikationen, dem Alter des Patienten und den Normen für jede spezifische Krankheit interpretieren. Aus diesem Grund können Sie die Ergebnisse nicht selbst bewerten..

Wie lange auf Ergebnisse warten

Diese Technik hat viele Varianten, je nachdem, welcher Zeitraum für den Empfang von Daten zur Verfügung steht. Die durchschnittliche Dauer der ELISA-Diagnose beträgt 4-6 Stunden, sodass Sie bereits am nächsten Tag Ergebnisse liefern können.

Die längsten Methoden dauern beispielsweise bei einer HIV-Infektion bis zu 10 Tage.

Im dringenden Bedarf ist die Verwendung von Expressmethoden möglich, bei denen die Antwort nach 1-2 Stunden eingeht.

Wo kann ich einen IFA-Test bekommen?

Da die Ausrüstung für diese Art der Diagnose ziemlich teuer ist, können nicht alle Labors sie erwerben. Darüber hinaus sind Tests, die bestimmte Antigene enthalten, nur begrenzt haltbar (normalerweise etwa 1 Jahr), sodass sie ständig aktualisiert werden müssen..

Aus diesen Gründen gibt es in staatlichen medizinischen Einrichtungen bei weitem nicht immer IFA-Labors. In den meisten Fällen müssen Sie sich an große private medizinische oder große Diagnosezentren wenden.

Um eine IFA-Studie durchführen zu können, muss das Labor über eine spezielle Lizenz verfügen, und Personal und Laborassistenten müssen eine spezielle Schulung absolvieren.

In den meisten Fällen wird vom Arzt ein bestimmtes Diagnosezentrum oder Labor empfohlen, das den Patienten zur Untersuchung überweist.

Enzymimmunoassay

Der Preis dieser Studie hängt von der Region des Landes und von der Ebene der Klinik ab, die die Dienstleistung erbringt. In Moskau beginnt der Mindestpreis für die Bestimmung eines Antigens bei 700 Rubel. Wenn mehrere Immunglobuline gleichzeitig identifiziert werden müssen, wird der Preis zusammengefasst.

Bei dringenden Analysen steigen die Kosten um 150-200 Rubel. für jedes Antigen.

Trotz der relativ hohen Kosten können Sie mit einem enzymgebundenen Immunosorbens-Assay die Patientenuntersuchung so informativ und schnell wie möglich gestalten, was die Zeit vor der Behandlung verkürzt und es Ihnen ermöglicht, den Zustand einer Person schnell zu stabilisieren.

Dieses Video zeigt den Film "Grundlagen des enzymgebundenen Immunosorbens-Assays"..

Was ist besser und effektiver in der Labordiagnostik - PCR oder ELISA?

PCR und ELISA sind zwei diagnostische Methoden, die bei Medizinern Anerkennung gefunden haben. Beide Studien aus der Kategorie der Molekularbiochemie sind genau und zuverlässig. Gibt es einen Unterschied zwischen PCR oder ELISA, der Pathologien besser und wahrheitsgemäßer charakterisiert? Um die Frage zu beantworten, lohnt es sich, das Wesentliche der Methoden zu verstehen und die Ähnlichkeiten und Unterschiede der Diagnosemethoden zu identifizieren.

Was ist PCR??

PCR ist eine hochempfindliche Polymerasekettenreaktion, die den Erreger der Krankheit (Viren, Bakterien, Chlamydien) im Körper nachweist. Die Technik basiert auf der Bestimmung der spezifischen Struktur der in einer Infektion vorhandenen DNA. Die PCR wird mit Verdacht auf einen latenten chronischen Verlauf des Infektionsprozesses im Körper durchgeführt, der in latenter Form vorliegt. Die Merkmale und Vorteile der PCR umfassen:

  • hohe 100% ige Empfindlichkeit gegenüber Krankheitserregern jeglicher Art bei Vorhandensein einzigartiger Nukleinsäurefragmente,
  • Geschwindigkeit, um das Ergebnis zu erhalten,
  • die Fähigkeit, die Anzahl einer Art von Krankheitserreger zu bestimmen,
  • gleichzeitige Diagnose mehrerer Krankheitserreger.

Laborassistenten bestimmen leicht die DNA-Struktur eines einzelnen Pathogens mithilfe der Polymerasekettenreaktion, die es ermöglicht, die Behandlungsergebnisse nach der Verschreibung einer medikamentösen Therapie zu verfolgen und zu bewerten. Die PCR als neue Forschungsmethode ist für die Diagnose solcher Krankheiten unverzichtbar:

  • Tuberkulose,
  • Diphtherie,
  • Salmonellose,
  • HIV,
  • Aids,
  • Hepatitis C im unabhängigen Stadium,
  • Bakteriose.

Die Genauigkeit der PCR als Technik erreicht 99% bei der Identifizierung von Krankheitserregern im Anfangsstadium einer Schädigung des Körpers ohne spezielle Symptome bei Patienten. Dies gewährleistet eine schnelle Heilung von Krankheiten und erreicht in einigen Fällen eine nachhaltige Remission..

Was ist IFA??

ELISA ist eine Immunforschungsmethode und eine genaue Analyse zur Identifizierung von Pathologien im Körper, die durch infektiöse Krankheitserreger verursacht werden. Bei Verdacht auf:

  • Syphilis,
  • Hepatitis B, C.,
  • Chlamydien,
  • Toxoplasmose,
  • Cytomegalovirus,
  • Herpesvirus,
  • Ureaplasmose,
  • weibliche Mykoplasmose.

Ein Immunofer kann die Onkologie frühzeitig erkennen. ELISA wird verschrieben, um den Hormonspiegel im Blut zu bestimmen und Krankheiten des endokrinen Systems durch Nachweis von Tumormarkern zu diagnostizieren. Ein Enzymimmunoassay hat viele Vorteile:

  • Einfachheit und Geschwindigkeit der Durchführung,
  • hohe Empfindlichkeit bei Antigen-Antikörper-Reaktionen auch vor dem Hintergrund einer geringen Konzentration des Erregers im Körper,
  • Aufgrund der hohen Spezifität der Analyse, mit der Sie den Antigen-Antikörper-Komplex schnell nachweisen und etablieren können, dient das verwendete Enzym als Markierung, mit der das Interaktionssignal zwischen ihnen genau erfasst und Immunglobuline (IgM-, IgG-Antikörper) im Blut erkannt werden können.

Im Falle einer Infektion des Körpers im Anfangsstadium überwiegen Immunglobuline der Klasse M. Mit fortschreitender Infektion haften Antikörper der Klasse A an. Wenn die Krankheit in ein fortgeschrittenes Stadium übergeht, beginnt die Produktion von Immunglobulin der Klasse G. Die Enzymreaktion von Immunglobulin zeigt die Schwere der Krankheit und das Stadium der Entwicklung der Pathologie.

Was ist der Unterschied zwischen ELISA und PCR??

PCR- und Immunoassay-Analysen (ELISA) sind für diagnostische Zwecke gleichermaßen gefragt. Beide Studien haben Vor- und Nachteile, Ähnlichkeiten und Unterschiede..

  1. WENN EINE. Die Hauptrichtung ist der Nachweis von Abfallprodukten von Markerproteinen oder die Herstellung von Kontakten zwischen dem Erreger und dem Immunsystem. Widerlegung oder Bestätigung der Ausbreitung der Infektion in den Organen. Der Unterschied zwischen ELISA und PCR besteht in der Eignung jedes Biomaterials für die Analyse: einer Gewebeprobe, Speichel, Urin, Blut.
  2. Mit der PCR können Sie einen bestimmten Erreger identifizieren, der zur Gruppe der Pilze, Viren und Bakterien gehört. Die Polymerase-Diagnosemethode erkennt einen pathogenen Organismus im Testmaterial: Flüssigkeit, Gewebe, Organ. Um ein umfassendes Bild der im Körper ablaufenden pathologischen Prozesse zu erhalten, verschreiben Ärzte sofort zwei Arten von Analysen in einem Komplex. Dies ist wichtig für die Erkennung von sexuell übertragbaren Krankheiten (Pathologien, die durch Geschlechtsverkehr übertragen werden)..

Um eine sexuell übertragbare Infektionskrankheit und den Gehalt an Antikörpern im Blut genau zu bestimmen, wird zunächst eine PCR durchgeführt, da die Ergebnisse einer ELISA-Studie nicht als Grundlage dienen können, ohne Primärdaten zu erhalten.

Wenn Antikörper im Körper nachgewiesen werden, kann ein ELISA allein nicht eindeutig gesagt werden: ob der pathologische Prozess im Körper abläuft oder nicht. Vielleicht waren die Kontakte mit dem Erreger, aber weit in der Vergangenheit, und die Analyse kann zu einem falschen Ergebnis führen.

Es ist unmöglich, eindeutige Schlussfolgerungen über PCR oder ELISA zu ziehen, und was tatsächlich zuverlässiger ist. ELISA ist eine wirksame diagnostische Methode, aber die Wahrscheinlichkeit, eine Krankheit zu entwickeln, kann nur durch PCR bestätigt werden. Daher ist es sinnvoll, beide Studien zusammen durchzuführen. Die PCR ist eine genauere Forschungsmethode, jedoch in einer Probe von Gewebematerial und in einem separaten Bereich des Körpers. Trotz der Genauigkeit der Methodik treten häufig Fehler auf, da sich der Infektionsprozess schnell im ganzen Körper ausbreiten kann.

Verfolgen Sie den Fortschritt, zum Beispiel: Chlamydien entlang des Gebärmutterhalskanals sind schwierig. Eine Infektion in den Eierstöcken und Eileitern ist möglicherweise nicht vorhanden, wenn der ELISA-Test positiv und der PCR-Test negativ ist. Es passiert umgekehrt. Um ein 100% iges Ergebnis zu erhalten, werden sowohl PCR- als auch ELISA-Tests am besten zusammen durchgeführt..

Es kommt vor, dass die Ergebnisse der PCR oder des ELISA nicht übereinstimmen, was bei längerer chronischer Infektion oder wenn sich der Körper an seine Wirkung gewöhnt. In diesem Fall ist der ELISA negativ und die PCR positiv. Wenn sich nur wenige Mikroben im Abstrich befinden, aber Antikörper gebildet werden und die Titer auch nach dem Behandlungsverlauf noch lange im Blut verbleiben, ist der ELISA positiv und die PCR negativ.

Oft geben Methoden falsch positive falsche Antworten, wenn zum Beispiel: ELISA positiv ist, PCR positiv ist. Die Symptome von Patienten werden berücksichtigt, wenn sie wegen Infektionen behandelt wurden. Es kommt vor, dass die PCR negativ und der ELISA negativ ist.

Unterschiedliche klinische Fälle erfordern einen individuellen Ansatz. Welche Analyse ist daher besser und genauer durchzuführen: PCR oder ELISA - die Entscheidung trifft der behandelnde Arzt.

Es ist ratsam, nach versteckten sexuell übertragbaren Infektionen zu suchen und Tests mit einem Partner durchzuführen. Schließlich kommt es vor, dass einer einen ausgeprägten Verlauf des Entzündungsprozesses hat und der andere nicht einmal Verdacht hat, was sich negativ auf das Sexualleben auswirkt und Misstrauen hervorruft. Es ist immer besser, einen Arzt zu konsultieren und von beiden Partnern behandelt zu werden, um die Wirksamkeit des Behandlungsverlaufs zu erhöhen und die Therapiedauer zu verkürzen.

Zum Beispiel: Bei Ureaplasmose und Mykoplasmose können gute Ergebnisse bei der Behandlung von Entzündungsprozessen im Becken nur erzielt werden, wenn ein gemeinsamer Behandlungsverlauf durchgeführt wird.

Unter Berücksichtigung der Merkmale kann geschlossen werden, dass PCR-Diagnostik und ELISA unterschiedlich sind, aber beide Methoden das Vorhandensein von Pathologien zuverlässig bestimmen können. Nur Spezialisten können jedoch den Unterschied zwischen den Methoden identifizieren, die tatsächlichen und korrekten Diagnosemethoden auswählen und die erhaltenen Analyseergebnisse genauer dekodieren.

Weitere Informationen zur PCR-Methode finden Sie im Video:

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In Ruhe arbeitet das Herz ruhig, aber während des Trainings steigt die Herzfrequenz.Wie kann man die Anzahl der Herzschläge pro Minute ermitteln? Sie können es selbst tun - ohne die Hilfe von Ärzten oder speziellen Geräten.

Während der Schwangerschaft CTG: Transkript

Eine schwangere Frau muss, bevor sie ihr neugeborenes Glück findet, neun Monate lang von einem Arzt beobachtet, vielen Tests unterzogen und verschiedenen Studien unterzogen werden.